En biologisk prospektiv studie hos pasienter med metastaserende pankreasnett behandlet med Everolimus

• Bakgrunn:: Everolimus har blitt rapportert å være effektiv sammenlignet med placebo i godt/moderat differensierte pankreas-NET når det gjelder progresjonsfri overlevelse (PFS) forbedring. Imidlertid er en rekke pasienter refraktære på forhånd eller blir resistente etter noen måneders behandling. Derfor er det avgjørende å oppdage noen biologiske faktorer som kan bidra til å identifisere de responsive svulstene. Everolimus er et biologisk middel og dets virkningsmekanisme kan delvis være rettet mot angiogenese. Dette kan studeres på ulike nivåer og med ulike metoder. Forutgående og tidlige surrogatprediktive markører for aktivitet/effekt kan studeres på tumorvev, på tumoravbildning og på det perifere blodet. Tumorstudie med diffusjons-MR og angiogene sirkulerende markører kan også studeres som markører for respons sammenlignet med morfologisk avbildning.

• Materialer og metoder :

  1. Sirkulerende endotelceller (CEC) og sirkulerende endotelceller (CEP) vil bli utført ved flowcytometri. De monoklonale antistoffene som brukes for søk etter CECs og CEPs inkluderer: klynge av differensieringsantigen 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-actinomycin D (7-AAD) og Syto1. Vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), basisk fibroblastvekstfaktor (bFGF), VEGFR-2 og trombospondin-1 (TSP-1) vil også bli påvist på det perifere blodet.

  2. På svulstvevet vil følgende bestemmelser bli utført, inkludert:

     • Subtype 2 somatostatinreseptor,
     • Phospho-AKT
     • Fosfo-mTOR
     • Phospho-4E-BP1
     • Phospho-p70-S6 kinase Kanin anti-tuberøs sklerosekompleks 2 (TSC2) cellesignalteknologi
     • Mus anti-PTEN Cell Signaling Technology
  3. Diffusjonsvektet bildebehandling (DWI) har vist seg å være i stand til å gi informasjon angående den cellulære tettheten og egenskapene til den ekstracellulære matrisen og den tilsynelatende diffusjonskoeffisienten (ADC)-verdien beregnet ved hjelp av DWI kan tjene som en markør for cellularitet. Gitt at tumorcellularitet i stor grad er bidratt av cellulær spredning, kan ADC-verdien være en surrogatbiomarkør for tumorcelleproliferasjon. ADC-Magnetic Resonance Imaging (MRI) vil bli utført ved baseline, etter 1 måned og etter tre måneders behandling.
• Studere design

Baseline, etter 1 måneds behandling, etter tre måneders behandling og ved progresjon:

• Abdomen DWI-MRI
• CEC, CEPs
• Sirkulerende VEGF, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Baseline biopsi av et metastatisk sted og muligens en ny biopsi på tidspunktet for tumorprogresjon

Korrelasjon av biologiske parametere med klinisk utfall (svulstrespons og progresjonsfri overlevelse, responsevalueringskriterier i solide svulster, RECIST 1.0-kriterier)

• Statistisk analyse: Dette er en eksplorativ studie av den potensielle prediktive verdien av noen biologiske faktorer (CECs, VEGF og bFGF blant dem) uttrykt i form av å redusere risikoen for progresjon hos pasienter med avanserte pankreas-NET behandlet med Everolimus.

Vi vil bruke to-halet log-rank test (α = 0,05, 1-β = 0,20) for å teste hypotesen om 30 % reduksjon i risiko (hazard rate; HR) lik HR = 0,30 for de som tilhører følgende lag :

• ≥ 2,2/uL vs < 2,2/uL for CEC ved basal eller
• ≤ 65,6 vs > 65,6 for FGF-nivåer etter to måneder siden behandlingsstart eller
• ≤ 32,5 vs > 32,5 for VEGF-nivåer etter to måneder siden behandlingsstart. Prøvestørrelsen er beregnet for å kompensere for effekttapet til log-rank-testen, forutsatt et gjennomsnittlig og ensartet log-rank testfall på 10 % og med tanke på at terskelverdiene refererer til 25., 75. og 50. persentilfordelingen av henholdsvis CEC, bFGF og VEGF. Tatt i betraktning en opptjeningsprosent på 20 pasienter/år, en behandlingsperiode på 12 uker med en oppfølging på 1 år og for en prøvestørrelse lik 43 pasienter, vil studien ha en total lengde på ca 3 år og 6 måneder.