Prospektív biológiai vizsgálat everolimusszal kezelt, metasztatikus hasnyálmirigy-hálókban szenvedő betegeknél

• Háttér:: Az everolimusz a placebóval összehasonlítva hatásosnak bizonyult a jól/közepesen differenciált hasnyálmirigy NET-ekben a progressziómentes túlélés (PFS) javulása tekintetében. Számos beteg azonban eleve refrakter, vagy néhány hónapos kezelés után rezisztenssé válik. Ezért kulcsfontosságú néhány olyan biológiai tényező kimutatása, amelyek segíthetnek a reagáló daganatok azonosításában. Az everolimusz biológiai szer, és hatásmechanizmusa részben az angiogenezis felé irányulhat. Ezt különböző szinteken és módszerekkel lehet tanulmányozni. Az aktivitás/hatékonyság előzetes és korai helyettesítő prediktív markerei daganatszöveten, daganatképalkotáson és a perifériás véren tanulmányozhatók. A diffúziós MRI-vel és angiogén keringő markerekkel végzett tumorvizsgálat a válasz markereként is vizsgálható a morfológiai képalkotással összehasonlítva.

• Anyag és módszerek :

  1. A keringő endoteliális sejteket (CEC) és a keringő endoteliális progenitorokat (CEP) áramlási citometriával végezzük. A CEC-k és CEP-ek keresésére használt monoklonális antitestek a következők: 45-ös differenciációs antigén (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-aktinomicin D (7-AAD) és Syto1 klaszter. A vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF), az alapvető fibroblaszt növekedési faktor (bFGF), a VEGFR-2 és a thromboszpondin-1 (TSP-1) is kimutatható a perifériás vérben.

  2. A tumorszöveten a következő meghatározásokat kell elvégezni, beleértve:

     • 2-es altípusú szomatosztatin receptor,
     • Phospho-AKT
     • Phospho-mTOR
     • Foszfo-4E-BP1
     • Foszfo-p70-S6 kináz Nyúl tuberkulózis elleni szklerózis komplex 2 (TSC2) sejtjelző technológia
     • Egér anti-PTEN Cell Signaling Technology
  3. Kimutatták, hogy a diffúziós súlyozott képalkotás (DWI) képes információt szolgáltatni a sejtsűrűségről és az extracelluláris mátrix tulajdonságairól, és a DWI-vel számított látszólagos diffúziós koefficiens (ADC) értéke a sejtesség markereként szolgálhat. Tekintettel arra, hogy a tumorsejtek proliferációja nagymértékben hozzájárul, az ADC-érték helyettesítő biomarker lehet a tumorsejtek proliferációjában. Az ADC-mágneses rezonancia képalkotást (MRI) a kezelés megkezdésekor, 1 hónapos és három hónapos kezelés után végzik el.
• Dizájnt tanulni

Kiindulási állapot 1 hónapos kezelés után, három hónapos kezelés után és progresszió esetén:

• Hasi DWI-MRI
• CEC, CEPs
• Keringő VEGF, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Metasztatikus hely kiindulási biopsziája és esetleg új biopszia a tumor progressziója idején

A biológiai paraméterek összefüggése a klinikai eredménnyel (tumorválasz és progressziómentes túlélés, válaszértékelési kritériumok szilárd daganatokban, RECIST 1.0 kritériumok)

• Statisztikai elemzés: Ez egy feltáró jellegű tanulmány néhány biológiai tényező (köztük a CEC, VEGF és bFGF) potenciális prediktív értékéről, amelyet a progresszió kockázatának csökkentésében fejeznek ki Everolimusszal kezelt, előrehaladott hasnyálmirigy-NET-ben szenvedő betegeknél.

Kétirányú log-rank tesztet (α = 0,05, 1-β = 0,20) fogunk használni annak a hipotézisnek a tesztelésére, hogy a kockázat 30%-os csökkenése (veszélyességi arány; HR) egyenlő HR = 0,30 a következő rétegekhez tartozókkal :

• ≥ 2,2/uL vs < 2,2/uL a CEC esetében alap- vagy
• ≤ 65,6 vs > 65,6 az FGF-szintekre a kezelés megkezdése óta eltelt két hónap után, vagy
• ≤ 32,5 vs > 32,5 a VEGF-szintekre a kezelés megkezdése óta számított két hónap után. A minta méretét úgy számították ki, hogy kompenzálja a log-rank teszt teljesítményveszteségét, feltételezve az átlagos és egyenletes 10%-os log-rank teszt kiesést, és szem előtt tartva hogy a küszöbértékek a CEC, bFGF és VEGF 25., 75. és 50. percentilis eloszlására vonatkoznak. Figyelembe véve a 20 beteg/év felhalmozási arányt, a 12 hetes kezelési időszakot 1 éves követéssel és a 43 betegből álló mintamérettel, a vizsgálat teljes időtartama körülbelül 3 év és 6 hónap lesz.