Biologiczne badanie prospektywne u pacjentów z przerzutowymi NET trzustki leczonych ewerolimusem

• Tło:: Donoszono, że ewerolimus jest skuteczny w porównaniu z placebo w dobrze/średnio zróżnicowanych NET trzustki pod względem poprawy czasu przeżycia wolnego od progresji choroby (PFS). Jednak wielu pacjentów jest opornych z góry lub staje się opornych po kilku miesiącach terapii. Dlatego kluczowe znaczenie ma wykrycie pewnych czynników biologicznych, które mogą pomóc w identyfikacji reagujących guzów. Everolimus jest środkiem biologicznym, a jego mechanizm działania może być częściowo ukierunkowany na angiogenezę. Można to badać na różnych poziomach i różnymi metodami. Wstępne i wczesne zastępcze predykcyjne markery aktywności/skuteczności można badać na tkance guza, obrazowaniu guza i krwi obwodowej. Badanie guza za pomocą dyfuzyjnego MRI i angiogennych markerów krążenia można również badać jako markery odpowiedzi w porównaniu z obrazowaniem morfologicznym.

• Materiał i metody :

  1. Krążące komórki śródbłonka (CEC) i krążące progenitory śródbłonka (CEP) zostaną zbadane za pomocą cytometrii przepływowej. Przeciwciała monoklonalne stosowane do wyszukiwania CEC i CEP obejmują: klaster antygenu różnicowania 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-aktynomycyna D (7-AAD) i Syto1. We krwi obwodowej zostanie również wykryty czynnik wzrostu śródbłonka naczyniowego (VEGF), zasadowy czynnik wzrostu fibroblastów (bFGF), VEGFR-2 i trombospondyna-1 (TSP-1).

  2. Na tkance nowotworowej zostaną wykonane następujące oznaczenia, w tym:

     • Receptor somatostatynowy podtypu 2,
     • Fosforo-AKT
     • Fosfo-mTOR
     • Fosforo-4E-BP1
     • Kinaza fosfo-p70-S6 Króliczy kompleks przeciw stwardnieniu guzowatemu 2 (TSC2) Technologia sygnalizacji komórkowej
     • Technologia sygnalizacji komórkowej anty-PTEN myszy
  3. Wykazano, że obrazowanie ważone dyfuzją (DWI) jest w stanie dostarczyć informacji dotyczących gęstości komórkowej i właściwości macierzy pozakomórkowej, a wartość pozornego współczynnika dyfuzji (ADC) obliczona za pomocą DWI może służyć jako marker komórkowości. Biorąc pod uwagę, że komórkowość guza jest w dużej mierze spowodowana proliferacją komórkową, wartość ADC może być zastępczym biomarkerem proliferacji komórek nowotworowych. ADC-Magnetic Resonance Imaging (MRI) będzie wykonywane na początku leczenia, po 1 miesiącu i po 3 miesiącach terapii.
• Projekt badania

Wartość wyjściowa, po 1 miesiącu terapii, po 3 miesiącach terapii i przy progresji:

• Brzuch DWI-MRI
• CEC, CEP
• Krążące VEGF, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Wyjściowa biopsja miejsca przerzutu i ewentualnie nowa biopsja w czasie progresji nowotworu

Korelacja parametrów biologicznych z wynikiem klinicznym (odpowiedź guza i przeżycie wolne od progresji choroby, kryteria oceny odpowiedzi w guzach litych, kryteria RECIST 1.0)

• Analiza statystyczna: Jest to badanie eksploracyjne dotyczące potencjalnej wartości predykcyjnej niektórych czynników biologicznych (między innymi CEC, VEGF i bFGF) wyrażonej w kategoriach zmniejszenia ryzyka progresji u pacjentów z zaawansowanymi NET trzustki leczonych ewerolimusem.

Użyjemy dwustronnego testu log-rank (α = 0,05, 1-β = 0,20), aby przetestować hipotezę 30% redukcji ryzyka (współczynnik ryzyka; HR) równego HR = 0,30 dla tych należących do kolejnych warstw :

• ≥ 2,2/ul vs < 2,2/ul dla CEC w dawce podstawowej lub
• ≤ 65,6 vs > 65,6 dla poziomu FGF po dwóch miesiącach od rozpoczęcia leczenia lub
• ≤ 32,5 vs > 32,5 dla poziomów VEGF po dwóch miesiącach od rozpoczęcia leczenia Wielkość próby oblicza się, aby zrekompensować utratę mocy w teście log-rank przy założeniu średniego i jednolitego odpadnięcia w teście log-rank na poziomie 10% i mając na uwadze że wartości progowe odnoszą się odpowiednio do 25., 75. i 50. percentyla dystrybucji CEC, bFGF i VEGF. Biorąc pod uwagę wskaźnik narastania 20 pacjentów rocznie, okres leczenia wynoszący 12 tygodni z okresem obserwacji wynoszącym 1 rok i wielkość próby równą 43 pacjentom, badanie będzie miało całkowitą długość około 3 lat i 6 miesięcy.