Estudio prospectivo biológico en pacientes con TNE pancreáticos metastásicos tratados con everolimus

• Antecedentes: se ha informado que everolimus es eficaz en comparación con placebo en TNE pancreáticos bien/moderadamente diferenciados en términos de mejora de la supervivencia libre de progresión (PFS). Sin embargo, varios pacientes son refractarios al principio o se vuelven resistentes después de unos meses de terapia. Por lo tanto, es crucial detectar algunos factores biológicos que puedan ayudar a identificar los tumores que responden. Everolimus es un agente biológico y su mecanismo de acción puede estar parcialmente dirigido hacia la angiogénesis. Esto se puede estudiar en diferentes niveles y con diferentes métodos. Los marcadores predictivos sustitutos iniciales y tempranos de actividad/eficacia se pueden estudiar en tejido tumoral, en imágenes de tumores y en la sangre periférica. El estudio tumoral con resonancia magnética de difusión y los marcadores circulantes angiogénicos pueden estudiarse también como marcadores de respuesta en comparación con la imagen morfológica.

• Material y métodos :

  1. Las células endoteliales circulantes (CEC) y los progenitores endoteliales circulantes (CEP) se realizarán mediante citometría de flujo. Los anticuerpos monoclonales utilizados para la búsqueda de CEC y CEP incluyen: grupo de antígeno de diferenciación 45 (CD45), CD31, CD133, CD146, CD34, VEGFR-2, 7-amino-actinomicina D (7-AAD) y Syto1. El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), el factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF), VEGFR-2 y trombospondina-1 (TSP-1) también se detectarán en la sangre periférica.

  2. Sobre el tejido tumoral se realizarán las siguientes determinaciones, entre ellas:

     • Receptor de somatostatina subtipo 2,
     • Fosfo-AKT
     • Fosfo-mTOR
     • Fosfo-4E-BP1
     • Fosfo-p70-S6 cinasa Conejo anti-tuberous sclerosis complex 2 (TSC2) Tecnología de señalización celular
     • Tecnología de señalización celular anti-PTEN de ratón
  3. Se ha demostrado que las imágenes ponderadas por difusión (DWI) pueden proporcionar información sobre la densidad celular y las propiedades de la matriz extracelular y el valor del coeficiente de difusión aparente (ADC) calculado mediante DWI puede servir como marcador de celularidad. Dado que la proliferación celular contribuye en gran medida a la celularidad del tumor, el valor de ADC puede ser un biomarcador sustituto de la proliferación de células tumorales. La resonancia magnética nuclear (RMN) ADC se realizará al inicio, después de 1 mes y después de tres meses de terapia.
• Diseño del estudio

Línea de base, después de 1 mes de terapia, después de tres meses de terapia y en la progresión:

• Abdomen DWI-MRI
• CEC, CEP
• VEGF circulante, VEGFR-2, bFGF, TSP-1

Biopsia de referencia de un sitio metastásico y posiblemente una nueva biopsia en el momento de la progresión del tumor

Correlación de parámetros biológicos con el resultado clínico (respuesta tumoral y supervivencia libre de progresión, Criterios de Evaluación de Respuesta en Tumores Sólidos, criterios RECIST 1.0)

• Análisis estadístico: Se trata de un estudio exploratorio sobre el potencial valor predictivo de algunos factores biológicos (CECs, VEGF y bFGF entre ellos) expresados ​​en términos de reducción del riesgo de progresión en pacientes con TNE pancreáticos avanzados tratados con Everolimus.

Usaremos la prueba de rango logarítmico de dos colas (α = 0.05, 1-β = 0.20) para probar la hipótesis de una reducción del 30% en el riesgo (índice de riesgo; HR) igual a HR = 0.30 para aquellos pertenecientes a las siguientes capas :

• ≥ 2,2/uL frente a < 2,2/uL para CEC basal o
• ≤ 65,6 vs > 65,6 para los niveles de FGF después de dos meses desde el inicio del tratamiento o
• ≤ 32,5 frente a > 32,5 para los niveles de VEGF después de dos meses desde el inicio del tratamiento El tamaño de la muestra se calcula para compensar la pérdida de potencia de la prueba de rango logarítmico suponiendo un abandono promedio y uniforme de la prueba de rango logarítmico del 10 % y teniendo en cuenta que los valores umbral se refieren a las distribuciones percentil 25, 75 y 50 de CEC, bFGF y VEGF, respectivamente. Considerando una tasa de acumulación de 20 pacientes/año, un período de tratamiento de 12 semanas con un seguimiento de 1 año y para un tamaño de muestra igual a 43 pacientes, el estudio tendrá una duración total de aproximadamente 3 años y 6 meses.