多发性硬化症患者的卡路里限制

本研究的目的是确定 MS 患者在复发恢复期间与标准疗法相比，CR 对血液生物标志物（包括脂肪因子、细胞因子、皮质醇和 T reg 数量的血清水平）的影响。 将招募 16 名发作的 MS 患者（体重指数 BMI ≥ 23）并随机分配至：

1. 类固醇治疗（10 天），这是 MS 复发的标准疗法；或者
2. CR 加类固醇治疗（10 天）。 卡路里限制将通过遵循隔日禁食的方案来实现（在禁食当天，受试者将被允许吃两份橄榄油和柠檬汁或醋的沙拉）。 简而言之，受试者将在第 1 天（类固醇的第一天）禁食，然后隔天继续禁食，直到第 15 天，即另一个禁食日。 在隔日禁食 15 天后，两组将被提供参加为期 6 个月的间歇性禁食方案（禁食日允许沙拉）（慢性 CR 阶段）。 具体而言，BMI <28 的患者将遵循每周禁食两天的方案，而 BMI >28 的患者将遵循每周禁食三天的方案。 在常规测试（CBC 和 CMP）和免疫/炎症分析的研究期间，将在特定时间点获取和分析血样。 具体来说，将在基线（第 1 天，开始使用类固醇之前）和交替禁食 15 天后获取血样。 对于那些将参加为期六个月的慢性 CR 研究的患者，还将在第 3 个月和第 6 个月采集血样。 将在类固醇开始后第 15 天评估 MS 受试者。 那些将参与慢性 CR 研究的受试者也将在第 3 个月和第 6 个月献血。 如果患者正在服用 MS 免疫调节药物，他们将在整个试验期间继续服用。 他们将在研究期间由一位对人类 CR 有经验的营养师进行跟踪和评估。 在研究的第一部分的第 15 天基线时，营养师会看到患者。 在基线访问时，他们将被指示在第 1 天禁食，然后每隔一天禁食。 在禁食期间，允许患者每天两次吃含有 2 汤匙橄榄油或菜籽油加醋或柠檬汁的沙拉。 目标是在禁食日摄入少于 500 卡路里的热量。 营养师还会教育患者在非禁食期间摄入营养充足的饮食，以避免“暴饮暴食”。 患者将每天记录饮食日记，进入慢性 CR 阶段的患者将在第 3 个月和第 6 个月返回中心与营养师会面（期间通过电话联系）。

基线访视时，患者签署知情同意书，研究者收集病史，进行体格检查，计算BMI（定义为体重Kg/身高m2）和腰围（内脏脂肪堆积指标），并进行神经学检查评估，包括 EDSS，它是 MS 试验中使用的标准神经学检查，它分配从 0（无缺陷）到 10（死于 MS）的分数，多发性硬化症功能综合 (MSFC)，这是一种定量测试下肢功能和认知，辅以额外的认知测试，称为符号数字模态测试 (SDMT) 和 MS 生活质量量表 (MSQLI)。

将收集血液用于常规检测（CBC、CMP）以及由研究者实验室进行的脂肪因子/细胞因子、皮质醇和 T reg 细胞分析。 所有这些评估和样本收集将在第 15 天以及第 3 个月和第 6 个月对将参与慢性 CR 阶段的患者重复进行。 还将在类固醇治疗期间的第 2 天、第 3 天和第 15 天进行神经系统检查。 对于进入慢性 CR 阶段的患者，将在第 1、3 和 6 个月进行额外评估。 这些评估将在每次就诊时包括：身体评估和神经学评估（神经学检查/EDSS、MSFC）和 MSQLI、BMI 和腰围，以反映 CR 引起的体重变化。对于那些处于 CR 慢性期的患者，将在第 1 天、第 15 天以及第 3 个月和第 6 个月采集血液。 这将是在隔夜禁食后的早晨采集的 15 毫升血液。 CBC、CMP 和总皮质醇测试将由巴恩斯犹太医院化学实验室进行。 其余的血液将在一小时内在研究人员的实验室进行处理。 血清将被等分并储存在 -80 ⁰C 以供将来分析（通过 ELISA 进行的脂联素、瘦素、抵抗素、肿瘤坏死因子-α 和 IL-6）。 研究人员还将研究外周 T reg 细胞的数量和功能。 在用识别 T regs（表达高水平 CD25 的 CD4+ 细胞）和 Foxp3 的特异性标记物对新鲜血液进行染色后，将通过流式细胞术评估 T reg 数量。 将如所述在体外评估T reg 功能。 简而言之，将从外周血中分离出 CD4+CD25high 和 CD4+CD25- 细胞群，并在存在刺激 CD4+CD25- 细胞增殖的抗簇分化 (CD) 3 抗体的情况下以不同的比例进行共培养。 根据培养物中 T reg 细胞的比例，CD4+CD25- 增殖受到不同程度的抑制。 培养物上清液中 CD4+CD25- 细胞的增殖和细胞因子水平将反映 T reg 抑制能力。

还将在基线、第 15 天、第 3 个月和第 6 个月收集粪便样本。 这些样本将被分析以研究 CR 对肠道微生物群的影响。