多発性硬化症患者におけるカロリー制限

この研究の目的は、再発から回復中のMS患者における標準療法と比較して、血液バイオマーカー（アディポカイン、サイトカイン、コルチゾール、T reg の血清レベルを含む）に対するCRの効果を判定することです。 発作を起こした16人のMS患者（BMI≧23）が登録され、以下のいずれかに無作為に割り付けられます。

1. MS再発の標準治療であるステロイド治療（10日間）。また
2. CR とステロイド治療 (10 日間)。 カロリー制限は、隔日断食の計画に従うことによって達成されます（断食の日中、被験者はオリーブオイルとレモン汁または酢を加えたサラダを2つ食べることが許可されます）。 簡単に説明すると、被験者は 1 日目 (ステロイドの初日) に絶食し、その後、別の絶食日である 15 日目まで隔日で絶食を続けます。 15 日間の隔日絶食の後、両グループは 6 か月間断続的断食療法に登録するよう提案されます (断食日はサラダの摂取が許可されます) (慢性 CR 段階)。 具体的には、BMI < 28 の患者は週 2 日の絶食レジメンに従い、BMI > 28 の患者は週 3 日の絶食レジメンに従います。 ルーチン検査（CBCおよびCMP）および免疫/炎症分析のために、研究中の特定の時点で血液サンプルが採取および分析されます。 具体的には、ベースライン（ステロイド開始前の1日目）と交互絶食の15日後に血液サンプルを採取します。 6か月間慢性CR研究に登録される患者については、3か月目と6か月目に血液サンプルも採取されます。 MS被験者はステロイドの開始後15日目に評価されます。 慢性 CR 研究に参加する被験者は、3 か月目と 6 か月目にも献血します。 患者がMSの免疫調節薬を服用している場合は、治験期間中ずっと服用を継続します。 研究期間中、ヒトのCRの経験がある栄養士によって追跡および評価が行われます。 患者は、研究の最初の部分のベースライン、つまり15日目に栄養士の診察を受けます。 ベースライン訪問では、初日は絶食し、その後は隔日するように指示されます。 断食日中、患者は1日2回、大さじ2杯のオリーブ油またはキャノーラ油と酢またはレモン汁を加えたサラダを食べることが許可されます。 目標は、断食日の摂取カロリーを500カロリー未満にすることです。 栄養士はまた、「過食」を避けるために、絶食日以外は栄養的に適切な食事を摂るよう患者に指導します。 患者は毎日の食事日記を付け、慢性 CR 期に入った患者は 3 か月目と 6 か月目に栄養士と面談するためにセンターに戻ります (その間は電話連絡あり)。

ベースライン訪問時に、患者はインフォームドコンセントに署名し、研究者は病歴を収集し、身体検査を実施し、BMI（体重Kg/身長m2で定義）と腹囲（内臓脂肪蓄積の指標）を計算し、神経学的検査を行います。評価には、MS試験で使用される標準的な神経学的検査であるEDSS（欠損なし）から10（MSによる死亡）までのスコアが割り当てられ、多発性硬化症機能複合体（​​MSFC）が含まれます。下肢の機能と認知には、シンボル ディジット モダリティ テスト (SDMT) と MS 生活の質インベントリ (MSQLI) と呼ばれる追加の認知テストが追加されます。

血液は、ルーチン検査 (CBC、CMP) および研究者の研究室で行われるアディポカイン/サイトカイン、コルチゾール、および T reg 細胞分析のために採取されます。 これらすべての評価とサンプル収集は、慢性 CR 段階に参加する患者に対して 15 日目と 3 か月目と 6 か月目に繰り返されます。 神経学的検査は、ステロイド治療中の2日目、3日目と15日目にも行われます。 慢性 CR 期に入った患者については、1 か月目、3 か月目、および 6 か月目に追加の評価が実行されます。 これらの評価には、各訪問時に以下が含まれます：神経学的評価（神経学的検査/EDSS、MSFC）を伴う身体的評価と、CRによる体重の変化を反映するMSQLI、BMIおよび腹囲。 CR慢性期の患者については、1日目、15日目、3か月目と6か月目に血液を採取します。 これは、一晩の絶食後の朝に採取された 15 ml の血液です。 CBC、CMP、総コルチゾール検査は、バーンズ・ユダヤ病院の化学検査室で実施されます。 残りの血液は研究者の研究室で 1 時間以内に処理されます。 血清は等分して、将来の分析（ELISA によるアディポネクチン、レプチン、レジスチン、腫瘍壊死因子アルファおよび IL-6）のために -80 °C で保存します。 研究者らは末梢T reg 細胞の数と機能も調査する予定だ。 T reg 数は、T reg (高レベルの CD25 を発現する CD4+ 細胞) および Foxp3 を識別する特異的マーカーで新鮮な血液を染色した後、フローサイトメトリーによって評価されます。 T reg 機能は、記載されているように in vitro で評価されます。 簡単に説明すると、CD4+CD25high および CD4+CD25- 細胞集団を末梢血から単離し、CD4+CD25- 細胞の増殖を刺激する抗クラスター分化 (CD)3 抗体の存在下でさまざまな比率で共培養します。 CD4+CD25- の増殖は、培養中の T reg 細胞の割合に基づいて示差的に阻害されます。 CD4+CD25-細胞の増殖と培養上清中のサイトカインレベルは、Treg抑制能力を反映します。

便サンプルは、ベースライン、15 日目、3 か月目、6 か月目にも収集されます。 これらのサンプルは、腸内細菌叢に対する CR の影響を研究するために分析されます。