Kaloriebegrænsning hos multipel sklerosepatienter

Målet med denne undersøgelse er at bestemme virkningerne af CR på blodbiomarkører (inklusive serumniveauer af adipokiner, cytokiner, cortisol og T reg-tal) sammenlignet med standardbehandlinger hos MS-patienter under bedring efter et tilbagefald. Seksten MS-patienter (body mass index-BMI ≥ 23) med et anfald vil blive indskrevet og randomiseret til enten:

1. steroidbehandling (10 dage), som er standardbehandling for MS-tilbagefald; eller
2. CR plus steroidbehandling (10 dage). Kaloriebegrænsning vil blive opnået ved at følge et regime med alternativ dag faste (i løbet af fastedagen vil forsøgspersonen få lov til at spise to salater med olivenolie og citronsaft eller eddike). Kort fortalt vil forsøgspersonerne faste på dag 1 (første dag med steroider) og derefter fortsætte med at faste på skiftende dage indtil dag 15, en anden fastedag. Efter 15 dages faste på en anden dag vil begge grupper blive tilbudt at tilmelde sig den intermitterende fastekur i 6 måneder (med salater tilladt på fastedagen) (kronisk CR-fase). Specifikt vil patienter med et BMI <28 følge et fasteregime i to dage om ugen, mens patienter med et BMI>28 vil følge et fasteregime i tre dage om ugen. Blodprøver vil blive indhentet og analyseret på specificerede punkter under undersøgelsen til rutinetest (CBC og CMP) og immun/inflammatoriske analyser. Specifikt vil der blive taget en blodprøve ved baseline (dag 1, før start af steroider) og efter 15 dage på alternativ faste. For de patienter, der vil blive indskrevet i det kroniske CR-studie i seks måneder, vil der også blive taget blodprøver i måned 3 og 6. MS-personer vil blive evalueret på dag 15 efter påbegyndelse af steroider. De forsøgspersoner, der vil deltage i den kroniske CR-undersøgelse, vil også donere blod i måned 3 og 6. Hvis patienter tager immunmodulerende medicin mod MS, vil de fortsætte under hele forsøget. De vil blive fulgt og vurderet under undersøgelsen af ​​en ernæringsekspert med erfaring med menneskelig CR. Patienterne vil blive tilset af ernæringseksperten ved baseline, dag 15 i den første del af undersøgelsen. Ved baseline-besøget vil de blive instrueret i at faste på dag 1 og derefter hver anden dag. I fastedagene må patienterne spise en salat med 2 spiseskefulde olivenolie eller rapsolie plus eddike eller citronsaft to gange om dagen. Målet er at spise mindre end 500 kalorier på fastedage. Ernæringseksperten vil også uddanne patienten til at indtage en ernæringsmæssigt adækvat diæt under ikke-fastende dage for at undgå "overspisning". Patienter vil føre en daglig maddagbog, og dem, der går ind i den kroniske CR-fase, vil vende tilbage til centret for at mødes med ernæringseksperten i måned 3 og 6 (med telefonkontakter imellem).

Ved baselinebesøget vil patienterne underskrive det informerede samtykke, og efterforskerne vil indsamle anamnese, udføre fysisk undersøgelse, beregne BMI (defineret som vægt i kg/højde i m2) og taljeomkreds (indeks for visceral fedtophobning) og udføre neurologiske vurderinger, herunder EDSS, som er den standardneurologiske undersøgelse, der bruges i MS-forsøg, som tildeler en score fra 0 (intet underskud) til 10 (død af MS), multipel sklerose funktionel komposit (MSFC), som er en kvantitativ test af øvre og underekstremiteternes funktion og kognition suppleret med en yderligere kognitiv test kaldet Symbol Digit Modality Test (SDMT) og MSQLI (MS Quality of Life Inventory).

Blod vil blive indsamlet til rutinetest (CBC, CMP) og til adipokin/cytokin, cortisol og T reg celleanalyser udført af efterforskernes laboratorium. Alle disse vurderinger og prøveindsamlinger vil blive gentaget på dag 15 og ved måned 3 og 6 for patienter, der vil deltage i den kroniske CR-fase. Neurologiske undersøgelser vil også blive udført på dag 2, 3 under steroidbehandling og dag 15. Yderligere vurderinger vil blive udført i måned 1, 3 og 6 for de patienter, der går ind i den kroniske CR-fase. Disse vurderinger vil ved hvert besøg omfatte: fysisk evaluering med neurologiske vurderinger (neurologisk undersøgelse / EDSS, MSFC) og MSQLI, BMI og taljeomkreds for at afspejle ændringerne i kropsvægt på grund af CR. Der tages blod på dag 1, dag 15 og måned 3 og 6 for de patienter i den kroniske CR-fase. Dette vil være 15 ml blod opsamlet om morgenen efter en natfaste. CBC, CMP og total cortisol test vil blive udført af Barnes Jewish Hospital kemi laboratorium. Resten af ​​blodet vil blive behandlet inden for en time i efterforskernes laboratorium. Serum uddeles i alikvoter og opbevares ved -80 ⁰C til fremtidige analyser (adiponectin, leptin, resistin, tumornekrosefaktor-alfa og IL-6 ved ELISA). Efterforskerne vil også undersøge antallet og funktionen af ​​perifere T reg-celler. T reg nummer vil blive evalueret ved flowcytometri efter farvning af frisk blod med de specifikke markører, der identificerer T regs (CD4+ celler, der udtrykker høje niveauer af CD25) og Foxp3. T reg funktion vil blive evalueret in vitro som beskrevet. Kort fortalt vil CD4+CD25-høj og CD4+CD25- cellepopulationer blive isoleret fra perifert blod og co-dyrket i forskellige forhold i nærvær af anti-klynge differentiering (CD) 3 antistoffer, som stimulerer CD4+CD25- celleproliferation. CD4+CD25-proliferation hæmmes differentielt baseret på andelen af ​​T reg-celler i kultur. Proliferation af CD4+CD25-celler og cytokinniveauer i kultursupernatanterne vil afspejle T reg-undertrykkende kapacitet.

En afføringsprøve vil også blive indsamlet ved baseline, dag 15, måned 3 og 6. Disse prøver vil blive analyseret for at studere virkningerne af CR på tarmmikrobiota.