Kalorirajoitus multippeliskleroosipotilailla

Tämän tutkimuksen tavoitteena on määrittää CR:n vaikutukset veren biomarkkereihin (mukaan lukien seerumin adipokiini-, sytokiini-, kortisoli- ja Treg-arvot) verrattuna standardihoitoihin MS-potilailla toipumisen aikana. Kuusitoista MS-potilasta (painoindeksi-BMI ≥ 23), joilla on kohtaus, otetaan mukaan ja satunnaistetaan jompaankumpaan:

1. steroidihoito (10 päivää), joka on MS-taudin uusiutumisen standardihoito; tai
2. CR plus steroidihoito (10 päivää). Kalorirajoitus saavutetaan noudattamalla vuorotellen paastoamista (paastopäivän aikana koehenkilö saa syödä kaksi salaattia, joissa on oliiviöljyä ja sitruunamehua tai etikkaa). Lyhyesti sanottuna koehenkilöt paastoavat päivänä 1 (ensimmäinen steroidipäivä) ja jatkavat sitten paastoamista vaihtoehtoisina päivinä 15. päivään asti, joka on toinen paastopäivä. Vuorottelupäivän 15 päivän paaston jälkeen molemmille ryhmille tarjotaan ilmoittautumista jaksoittaiseen paastohoitoon 6 kuukaudeksi (salaatit ovat sallittuja paastopäivänä) (krooninen CR-vaihe). Erityisesti potilaat, joiden BMI <28, noudattavat paastoamisohjelmaa kaksi päivää viikossa, kun taas potilaat, joiden BMI on >28, noudattavat paastoamisohjelmaa kolmena päivänä viikossa. Verinäytteet otetaan ja analysoidaan tietyissä kohdissa tutkimuksen aikana rutiinitestejä (CBC ja CMP) ja immuuni-/tulehdusanalyysiä varten. Tarkemmin sanottuna verinäyte otetaan lähtötilanteessa (päivä 1, ennen steroidien aloittamista) ja 15 päivän kuluttua vuorotellen paastoamalla. Niiltä potilailta, jotka otetaan mukaan krooniseen CR-tutkimukseen kuuden kuukauden ajan, otetaan verinäytteitä myös kuukausina 3 ja 6. MS-potilaat arvioidaan 15. päivänä steroidien käytön aloittamisen jälkeen. Krooniseen CR-tutkimukseen osallistuvat henkilöt luovuttavat verta myös kuukausina 3 ja 6. Jos potilaat käyttävät MS-tautiin immunomoduloivaa lääkitystä, he jatkavat koko tutkimuksen ajan. Ihmisen CR:stä kokenut ravitsemusterapeutti seuraa ja arvioi niitä tutkimuksen aikana. Ravitsemusterapeutti tarkastaa potilaat lähtötilanteessa, päivänä 15 tutkimuksen ensimmäisen osan aikana. Peruskäynnillä heitä neuvotaan paastoamaan ensimmäisenä päivänä ja sen jälkeen joka toinen päivä. Paastopäivinä potilaat saavat syödä salaattia, jossa on 2 ruokalusikallista oliiviöljyä tai rypsiöljyä sekä etikkaa tai sitruunamehua kahdesti päivässä. Tavoitteena on syödä alle 500 kaloria paastopäivinä. Ravitsemusterapeutti myös kouluttaa potilasta nauttimaan ravitsemuksellisesti riittävää ruokavaliota ei-paastopäivinä välttääkseen "yli syömisen". Potilaat pitävät päivittäistä ruokapäiväkirjaa ja krooniseen CR-vaiheeseen siirtyvät palaavat keskukseen tapaamaan ravitsemusterapeuttia kuukausina 3 ja 6 (puhelinyhteydet välissä).

Peruskäynnillä potilaat allekirjoittavat tietoisen suostumuksen, ja tutkijat keräävät sairaushistorian, suorittavat fyysisen tutkimuksen, laskevat BMI:n (määritelty painona kg / pituus m2) ja vyötärön ympärysmitan (viskeraalisen rasvan kertymisen indeksi) ja suorittavat neurologiset tutkimukset. arvioinnit, mukaan lukien EDSS, joka on standardi neurologinen tutkimus, jota käytetään MS-tutkimuksissa ja joka antaa pistemäärän 0 (ei alijäämää) 10:een (kuollut MS-tautiin), multippeliskleroosin toiminnallinen komposiitti (MSFC), joka on kvantitatiivinen testi ylä- ja alaraajojen toimintaa ja kognitiota täydennettynä ylimääräisellä kognitiivisella testillä nimeltä Symbol Digit Modality Test (SDMT) ja MS-elämänlaatuinventaariolla (MSQLI).

Veri otetaan rutiinitestejä (CBC, CMP) ja adipokiini/sytokiini-, kortisoli- ja Treg-soluanalyysejä varten, jotka tutkijoiden laboratorio suorittaa. Kaikki nämä arvioinnit ja näytekeräykset toistetaan päivänä 15 ja kuukausina 3 ja 6 potilaille, jotka osallistuvat krooniseen CR-vaiheeseen. Neurologiset tutkimukset tehdään myös päivinä 2, 3 steroidihoidon aikana ja päivänä 15. Lisäarvioinnit suoritetaan kuukausina 1, 3 ja 6 niille potilaille, jotka ovat siirtymässä krooniseen CR-vaiheeseen. Nämä arvioinnit sisältävät jokaisella käynnillä: fyysisen arvioinnin neurologisilla arvioinneilla (neurologinen tutkimus / EDSS, MSFC) ja MSQLI:n, BMI:n ja vyötärön ympärysmitan heijastamaan CR:n aiheuttamia ruumiinpainon muutoksia. Veri otetaan päivänä 1, päivänä 15 ja kuukaudella 3 ja 6 niiltä potilailta, jotka ovat CR:n kroonisessa vaiheessa. Tämä on 15 ml verta, joka kerätään aamulla yön yli paaston jälkeen. CBC-, CMP- ja kokonaiskortisolitestit suorittaa Barnesin juutalaisen sairaalan kemian laboratorio. Loput verestä käsitellään tunnin sisällä tutkijoiden laboratoriossa. Seerumi jaetaan eriin ja säilytetään -80 °C:ssa tulevia analyysejä varten (adiponektiini, leptiini, resistiini, tuumorinekroositekijä-alfa ja IL-6 ELISA:lla). Tutkijat tutkivat myös perifeeristen T reg -solujen lukumäärää ja toimintaa. Treg-luku arvioidaan virtaussytometrialla sen jälkeen, kun tuore veri on värjätty spesifisillä markkereilla, jotka tunnistavat T regit (CD4+-solut, jotka ilmentävät korkeita CD25-tasoja) ja Foxp3. Treg-funktio arvioidaan in vitro, kuten on kuvattu. Lyhyesti sanottuna CD4+CD25high- ja CD4+CD25-solupopulaatiot eristetään ääreisverestä ja niitä viljellään yhdessä eri suhteissa CD4+CD25-solujen lisääntymistä stimuloivien anticluster differentiation (CD) 3 -vasta-aineiden läsnä ollessa. CD4+CD25- proliferaatiota estetään eri tavalla viljelmässä olevien T-reg-solujen osuuden perusteella. CD4+CD25-solujen lisääntyminen ja sytokiinitasot viljelmän supernatanteissa heijastavat Treg-suppressiivisia kykyjä.

Ulostenäyte otetaan myös lähtötilanteessa, päivänä 15, kuukausina 3 ja 6. Nämä näytteet analysoidaan CR:n vaikutusten tutkimiseksi suoliston mikrobiotaan.