Restrição calórica em pacientes com esclerose múltipla

O objetivo deste estudo é determinar os efeitos da CR nos biomarcadores sanguíneos (incluindo níveis séricos de adipocinas, citocinas, cortisol e números T reg) em comparação com terapias padrão em pacientes com EM durante a recuperação de uma recaída. Dezesseis pacientes com EM (índice de massa corporal-IMC ≥ 23) com um ataque serão inscritos e randomizados para:

1. tratamento com esteroides (10 dias) que é a terapia padrão para recaídas de EM; ou
2. CR mais tratamento com esteroides (10 dias). A restrição calórica será alcançada seguindo um regime de jejum em dias alternados (durante o dia de jejum o sujeito poderá comer duas saladas com azeite e suco de limão ou vinagre). Resumidamente, os sujeitos jejuarão no dia 1 (primeiro dia de esteróides) e continuarão a jejuar em dias alternados até o dia 15, outro dia de jejum. Após 15 dias de jejum em dias alternados, ambos os grupos serão oferecidos para se inscrever no regime de jejum intermitente por 6 meses (com saladas permitidas no dia do jejum) (fase de RC crônica). Especificamente, pacientes com IMC <28 seguirão um regime de jejum por dois dias por semana, enquanto pacientes com IMC>28 seguirão um regime de jejum por três dias por semana. Amostras de sangue serão obtidas e analisadas em pontos específicos durante o estudo para testes de rotina (CBC e CMP) e análises imunológicas/inflamatórias. Especificamente, uma amostra de sangue será obtida na linha de base (dia 1, antes de iniciar os esteróides) e após 15 dias em jejum alternado. Para os pacientes que serão incluídos no estudo CR crônico por seis meses, amostras de sangue também serão obtidas no mês 3 e 6. Os indivíduos com EM serão avaliados no dia 15 após o início dos esteróides. Os indivíduos que participarão do estudo de RC crônica também doarão sangue nos meses 3 e 6. Se os pacientes estiverem tomando um medicamento imunomodulador para EM, eles continuarão durante todo o estudo. Eles serão acompanhados e avaliados durante o estudo por uma nutricionista com experiência em RC humana. Os pacientes serão vistos pelo nutricionista na linha de base, dia 15 para a primeira parte do estudo. Na visita inicial, eles serão instruídos a jejuar no dia 1 e depois em dias alternados. Durante os dias de jejum, os pacientes podem comer uma salada com 2 colheres de sopa de azeite ou óleo de canola mais vinagre ou suco de limão duas vezes ao dia. O objetivo é comer menos de 500 calorias em dias de jejum. O nutricionista também orientará o paciente a consumir uma dieta nutricionalmente adequada durante os dias sem jejum para evitar "comer demais". Os pacientes manterão um diário alimentar e aqueles que entrarem na fase de RC crônica retornarão ao centro para consultar o nutricionista nos meses 3 e 6 (com contatos telefônicos entre eles).

Na visita inicial, os pacientes assinarão o termo de consentimento informado e os investigadores coletarão histórico médico, realizarão exame físico, calcularão o IMC (definido como peso em Kg / altura em m2) e circunferência da cintura (índice de acúmulo de gordura visceral) e realizarão exames neurológicos avaliações, incluindo o EDSS, que é o exame neurológico padrão usado em testes de EM, que atribui uma pontuação de 0 (sem déficit) a 10 (morto por EM), o composto funcional de esclerose múltipla (MSFC), que é um teste quantitativo de função e cognição dos membros inferiores suplementadas com um teste cognitivo adicional chamado Symbol Digit Modality Test (SDMT) e inventário de qualidade de vida MS (MSQLI).

O sangue será coletado para testes de rotina (CBC, CMP) e para análises de adipocina/citocina, cortisol e células T reg realizadas pelo laboratório dos investigadores. Todas essas avaliações e coletas de amostras serão repetidas no dia 15 e nos meses 3 e 6 para pacientes que participarão da fase de RC crônica. Exames neurológicos também serão realizados no dia 2, 3 durante o tratamento com esteroides e no dia 15. Avaliações adicionais serão realizadas no mês 1, 3 e 6 para os pacientes que entram na fase CR crônica. Essas avaliações incluirão a cada visita: avaliação física com avaliações neurológicas (exame neurológico / EDSS, MSFC) e MSQLI, IMC e circunferência da cintura para refletir as mudanças no peso corporal devido ao CR. O sangue será adquirido no dia 1, dia 15 e mês 3 e 6 para aqueles pacientes na fase crônica de RC. Serão 15 ml de sangue coletados pela manhã após um jejum noturno. Os testes de CBC, CMP e cortisol total serão realizados pelo laboratório de química do Barnes Jewish Hospital. O resto do sangue será processado dentro de uma hora no laboratório dos investigadores. O soro será aliquotado e armazenado a -80 ⁰C para análises futuras (adiponectina, leptina, resistina, fator de necrose tumoral-alfa e IL-6 por ELISA). Os investigadores também investigarão o número e a função das células T reg periféricas. O número de T regs será avaliado por citometria de fluxo após a coloração do sangue fresco com os marcadores específicos que identificam T regs (células CD4+ expressando altos níveis de CD25) e Foxp3. A função T reg será avaliada in vitro conforme descrito. Resumidamente, as populações de células CD4+CD25high e CD4+CD25- serão isoladas do sangue periférico e co-cultivadas em diferentes proporções na presença de anticorpos anti-cluster diferenciation (CD) 3 que estimulam a proliferação de células CD4+CD25-. A proliferação de CD4+CD25- é inibida diferencialmente com base na proporção de células T reg em cultura. A proliferação de células CD4+CD25- e os níveis de citocinas nos sobrenadantes da cultura refletirão as capacidades supressoras de T reg.

Uma amostra de fezes também será coletada no início, dia 15, mês 3 e 6. Essas amostras serão analisadas para estudar os efeitos do CR na microbiota intestinal.