Ограничение калорий у пациентов с рассеянным склерозом

Целью этого исследования является определение влияния CR на биомаркеры крови (включая сывороточные уровни адипокинов, цитокинов, кортизола и числа T reg) по сравнению со стандартной терапией у пациентов с РС во время восстановления после рецидива. Шестнадцать пациентов с рассеянным склерозом (индекс массы тела-ИМТ ≥ 23) с приступом будут зарегистрированы и рандомизированы в одну из следующих групп:

1. лечение стероидами (10 дней), которое является стандартной терапией рецидивов рассеянного склероза; или
2. CR плюс лечение стероидами (10 дней). Ограничение калорий будет достигнуто за счет соблюдения режима голодания через день (в течение дня голодания субъекту будет разрешено съесть два салата с оливковым маслом и лимонным соком или уксусом). Вкратце, испытуемые голодают в первый день (первый день приема стероидов), а затем продолжают голодать через день до 15-го дня, еще одного дня голодания. После 15 дней голодания через день обеим группам будет предложено записаться на режим прерывистого голодания на 6 месяцев (с разрешенными салатами в разгрузочный день) (хроническая фаза CR). В частности, пациенты с ИМТ <28 будут следовать режиму голодания два дня в неделю, а пациенты с ИМТ> 28 будут следовать режиму голодания три дня в неделю. Образцы крови будут получены и проанализированы в определенные моменты во время исследования для рутинного тестирования (CBC и CMP) и иммунных/воспалительных анализов. В частности, образец крови будет получен на исходном уровне (день 1, до начала приема стероидов) и через 15 дней при чередующемся голодании. Для тех пациентов, которые будут включены в исследование хронического CR в течение шести месяцев, образцы крови также будут получены через 3 и 6 месяцев. Субъекты РС будут оцениваться на 15-й день после начала приема стероидов. Те субъекты, которые будут участвовать в исследовании хронического CR, также будут сдавать кровь на 3 и 6 месяце. Если пациенты принимают иммуномодулирующие препараты для лечения рассеянного склероза, они будут продолжать принимать их в течение всего испытания. Они будут отслеживаться и оцениваться во время исследования диетологом, имеющим опыт работы с ОК человека. Пациенты будут осмотрены диетологом на исходном уровне, на 15-й день первой части исследования. Во время исходного визита им будет рекомендовано голодать в первый день, а затем через день. В разгрузочные дни больным разрешается есть салат из 2 столовых ложек оливкового масла или масла канолы с добавлением уксуса или лимонного сока два раза в день. Цель состоит в том, чтобы потреблять менее 500 калорий в разгрузочные дни. Диетолог также научит пациента придерживаться адекватной диеты в дни без голодания, чтобы избежать «переедания». Пациенты будут вести ежедневный дневник питания, а те, кто вступает в хроническую фазу CR, вернутся в центр, чтобы встретиться с диетологом через 3 и 6 месяцев (с телефонными контактами между ними).

Во время исходного визита пациенты подписывают информированное согласие, а исследователи собирают анамнез, проводят физикальное обследование, рассчитывают ИМТ (определяемый как вес в кг / рост в м2) и окружность талии (индекс накопления висцерального жира) и проводят неврологический осмотр. оценки, в том числе EDSS, который является стандартным неврологическим тестом, используемым в исследованиях РС, который присваивает балл от 0 (нет дефицита) до 10 (смерть от РС), функциональный комплекс рассеянного склероза (MSFC), который является количественным тестом верхнего и функцию нижних конечностей и когнитивные функции, дополненные дополнительным когнитивным тестом, называемым тестом модальности символов и цифр (SDMT) и инвентаризацией качества жизни MS (MSQLI).

Кровь будет собираться для рутинных анализов (CBC, CMP) и для анализов адипокинов/цитокинов, кортизола и T reg клеток, проводимых исследовательской лабораторией. Все эти оценки и сборы образцов будут повторяться на 15-й день, а также на 3-м и 6-м месяцах для пациентов, которые будут участвовать в фазе хронического CR. Неврологические обследования также будут проводиться на 2-й, 3-й день во время лечения стероидами и на 15-й день. Дополнительные оценки будут проводиться через 1, 3 и 6 месяцев для тех пациентов, которые переходят в фазу хронического CR. Эти оценки будут включать в себя при каждом посещении: физическую оценку с неврологическими оценками (неврологический осмотр / EDSS, MSFC) и MSQLI, ИМТ и окружность талии, чтобы отразить изменения массы тела из-за CR. Кровь будет получена в день 1, день 15 и месяц 3 и 6 для тех пациентов в хронической фазе CR. Это будет 15 мл крови, собранной утром после ночного голодания. CBC, CMP и общий анализ кортизола будут проводиться химической лабораторией еврейской больницы Барнса. Остальная кровь будет обработана в течение часа в лаборатории следователей. Сыворотка будет разделена на аликвоты и сохранена при -80 ⁰C для будущих анализов (адипонектин, лептин, резистин, фактор некроза опухоли-альфа и ИЛ-6 с помощью ELISA). Исследователи также изучат количество и функцию периферических Т-клеток. Количество T reg будет оцениваться с помощью проточной цитометрии после окрашивания свежей крови специфическими маркерами, которые идентифицируют T reg (клетки CD4+, экспрессирующие высокие уровни CD25) и Foxp3. Функцию T reg оценивают in vitro, как описано. Вкратце, популяции клеток CD4+CD25high и CD4+CD25- будут выделены из периферической крови и совместно культивированы в различных соотношениях в присутствии антител против кластерной дифференцировки (CD) 3 , которые стимулируют пролиферацию клеток CD4+CD25-. Пролиферация CD4+CD25- ингибируется по-разному в зависимости от доли клеток T reg в культуре. Пролиферация клеток CD4+CD25- и уровни цитокинов в культуральных супернатантах будут отражать супрессивные способности T reg.

Образец стула также будет собираться на исходном уровне, на 15-й день, на 3-м и 6-м месяцах. Эти образцы будут проанализированы для изучения влияния CR на микробиоту кишечника.