Restricción calórica en pacientes con esclerosis múltiple

El objetivo de este estudio es determinar los efectos de la CR en los biomarcadores sanguíneos (incluidos los niveles séricos de adipoquinas, citoquinas, cortisol y números de T reg) en comparación con las terapias estándar en pacientes con EM durante la recuperación de una recaída. Dieciséis pacientes con EM (índice de masa corporal-IMC ≥ 23) que sufran un ataque serán inscritos y aleatorizados a:

1. tratamiento con esteroides (10 días) que es la terapia estándar para las recaídas de EM; o
2. CR más tratamiento con esteroides (10 días). La restricción calórica se conseguirá siguiendo un régimen de ayuno en días alternos (durante el día de ayuno se permitirá al sujeto comer dos ensaladas con aceite de oliva y zumo de limón o vinagre). Brevemente, los sujetos ayunarán el día 1 (primer día de esteroides) y luego continuarán ayunando en días alternos hasta el día 15, otro día de ayuno. Después de 15 días de ayuno en días alternos, a ambos grupos se les ofrecerá inscribirse en el régimen de ayuno intermitente durante 6 meses (con ensaladas permitidas en el día de ayuno) (fase RC crónica). Específicamente, los pacientes con un IMC <28 seguirán un régimen de ayuno de dos días a la semana, mientras que los pacientes con un IMC>28 seguirán un régimen de ayuno de tres días a la semana. Las muestras de sangre se obtendrán y analizarán en puntos específicos durante el estudio para pruebas de rutina (CBC y CMP) y análisis inmunológicos/inflamatorios. Específicamente, se obtendrá una muestra de sangre al inicio (día 1, antes de comenzar con los esteroides) y después de 15 días en ayuno alterno. Para aquellos pacientes que se inscribirán en el estudio de CR crónica durante seis meses, también se obtendrán muestras de sangre en los meses 3 y 6. Los sujetos con EM serán evaluados el día 15 después del inicio de los esteroides. Aquellos sujetos que participarán en el estudio de CR crónica también donarán sangre en los meses 3 y 6. Si los pacientes están tomando un medicamento inmunomodulador para la EM, continuarán durante todo el ensayo. Serán seguidos y evaluados durante el estudio por un nutricionista con experiencia en CR humana. Los pacientes serán vistos por el nutricionista al inicio del estudio, el día 15 para la primera parte del estudio. En la visita inicial, se les indicará que ayunen el día 1 y luego cada dos días. Durante los días de ayuno, los pacientes pueden comer una ensalada con 2 cucharadas soperas de aceite de oliva o aceite de canola más vinagre o jugo de limón dos veces al día. El objetivo es comer menos de 500 calorías en los días de ayuno. El nutricionista también educará al paciente para que consuma una dieta nutricionalmente adecuada durante los días sin ayuno para evitar "comer en exceso". Los pacientes llevarán un diario de alimentación diario y los que entren en fase de RC crónica volverán al centro para reunirse con el nutricionista a los 3 y 6 meses (con contactos telefónicos intermedios).

En la visita inicial, los pacientes firmarán el consentimiento informado y los investigadores recopilarán la historia clínica, realizarán un examen físico, calcularán el IMC (definido como peso en Kg / altura en m2) y la circunferencia de la cintura (índice de acumulación de grasa visceral) y realizarán pruebas neurológicas. evaluaciones, incluido el EDSS, que es el examen neurológico estándar utilizado en los ensayos de EM que asigna una puntuación de 0 (sin déficit) a 10 (muerto por EM), el compuesto funcional de esclerosis múltiple (MSFC), que es una prueba cuantitativa de la función y la cognición de las extremidades inferiores complementadas con una prueba cognitiva adicional llamada Prueba de modalidad de dígitos simbólicos (SDMT) y el inventario de calidad de vida de la EM (MSQLI).

Se recolectará sangre para pruebas de rutina (CBC, CMP) y para análisis de adipoquinas/citoquinas, cortisol y células T reg realizadas por el laboratorio de investigadores. Todas estas valoraciones y recogidas de muestras se repetirán el día 15 y los meses 3 y 6 para los pacientes que participarán en la fase de RC crónica. También se realizarán exámenes neurológicos el día 2, 3 durante el tratamiento con esteroides y el día 15. Se realizarán evaluaciones adicionales en los meses 1, 3 y 6 para aquellos pacientes que ingresen a la fase CR crónica. Estas evaluaciones incluirán en cada visita: evaluación física con evaluaciones neurológicas (examen neurológico/EDSS, MSFC) y MSQLI, IMC y circunferencia de la cintura para reflejar los cambios en el peso corporal debido a la RC. Se tomará sangre el día 1, día 15 y mes 3 y 6 para aquellos pacientes en fase crónica RC. Serán 15 ml de sangre recolectada por la mañana después de un ayuno nocturno. Las pruebas de CBC, CMP y cortisol total serán realizadas por el laboratorio de química del Barnes Jewish Hospital. El resto de la sangre se procesará en el plazo de una hora en el laboratorio de los investigadores. El suero se dividirá en alícuotas y se almacenará a -80 ⁰C para futuros análisis (adiponectina, leptina, resistina, factor de necrosis tumoral alfa e IL-6 por ELISA). Los investigadores también estudiarán el número y la función de las células T reg periféricas. El número de T reg se evaluará mediante citometría de flujo después de teñir sangre fresca con los marcadores específicos que identifican T reg (células CD4+ que expresan altos niveles de CD25) y Foxp3. La función T reg se evaluará in vitro como se describe. Brevemente, se aislarán poblaciones de células CD4+CD25high y CD4+CD25- de sangre periférica y se cultivarán conjuntamente en diferentes proporciones en presencia de anticuerpos antidiferenciación de grupos (CD) 3 que estimulan la proliferación de células CD4+CD25-. La proliferación de CD4+CD25- se inhibe de forma diferencial en función de la proporción de células T reg en el cultivo. La proliferación de células CD4+CD25- y los niveles de citocinas en los sobrenadantes del cultivo reflejarán las capacidades supresoras de T reg.

También se recolectará una muestra de heces al inicio, el día 15, los meses 3 y 6. Estas muestras se analizarán para estudiar los efectos de la RC en la microbiota intestinal.