Omezení kalorií u pacientů s roztroušenou sklerózou

Cílem této studie je určit účinky CR na krevní biomarkery (včetně sérových hladin adipokinů, cytokinů, kortizolu a T reg čísel) ve srovnání se standardními terapiemi u pacientů s RS během zotavování z relapsu. Šestnáct pacientů s RS (body mass index-BMI ≥ 23) s atakou bude zařazeno a randomizováno do:

1. léčba steroidy (10 dní), která je standardní terapií pro relapsy RS; nebo
2. CR plus léčba steroidy (10 dní). Omezení kalorií bude dosaženo dodržováním režimu půstu každý druhý den (během dne půstu bude subjektu dovoleno jíst dva saláty s olivovým olejem a citronovou šťávou nebo octem). Stručně řečeno, subjekty budou držet půst v den 1 (první den steroidů) a poté budou pokračovat v půstu každý druhý den až do dne 15, dalšího dne nalačno. Po 15 dnech půstu každý druhý den bude oběma skupinám nabídnuto, aby se zapsaly do režimu přerušovaného hladovění po dobu 6 měsíců (se saláty povolenými v den půstu) (fáze chronické CR). Konkrétně pacienti s BMI <28 budou dodržovat režim hladovění po dobu dvou dnů v týdnu, zatímco pacienti s BMI >28 budou dodržovat režim hladovění po dobu tří dnů v týdnu. Vzorky krve budou odebrány a analyzovány ve specifikovaných bodech během studie pro rutinní testování (CBC a CMP) a imunitní/zánětlivé analýzy. Konkrétně bude vzorek krve odebrán na začátku (den 1, před zahájením podávání steroidů) a po 15 dnech na střídavém hladovění. Těm pacientům, kteří budou zařazeni do studie chronické CR po dobu šesti měsíců, budou také odebrány vzorky krve ve 3. a 6. měsíci. Subjekty s RS budou hodnoceny 15. den po zahájení podávání steroidů. Ty subjekty, které se zúčastní studie chronické CR, budou darovat krev také ve 3. a 6. měsíci. Pokud pacienti užívají imunomodulační léky na RS, budou pokračovat během celé studie. Během studie je bude sledovat a posuzovat nutriční specialista se zkušenostmi s lidskou CR. Pacienti budou vyšetřeni odborníkem na výživu na začátku, 15. den první části studie. Při základní návštěvě budou instruováni, aby se postili v den 1 a poté každý druhý den. Během dnů půstu mohou pacienti dvakrát denně jíst salát se 2 polévkovými lžícemi olivového oleje nebo řepkového oleje a octem nebo citronovou šťávou. Cílem je sníst ve dnech půstu méně než 500 kalorií. Výživový poradce také edukuje pacienta, aby během dní bez půstu konzumoval nutričně adekvátní stravu, aby se vyhnul „přejídání“. Pacienti si budou vést denní stravovací deník a ti, kteří vstoupí do chronické fáze CR, se vrátí do centra, aby se setkali s nutričním specialistou ve 3. a 6. měsíci (s telefonickými kontakty mezi nimi).

Při základní návštěvě pacienti podepíší informovaný souhlas a vyšetřovatelé shromáždí anamnézu, provedou fyzikální vyšetření, vypočítají BMI (definovaný jako hmotnost v kg / výška v m2) a obvod pasu (index akumulace viscerálního tuku) a provedou neurologické vyšetření. hodnocení, včetně EDSS, což je standardní neurologické vyšetření používané ve studiích RS, které přiděluje skóre od 0 (žádný deficit) do 10 (mrtvý z RS), funkční kompozit roztroušené sklerózy (MSFC), což je kvantitativní test horních a funkce a kognice dolních končetin doplněné o doplňkový kognitivní test nazvaný Symbol Digit Modality Test (SDMT) a MS inventář kvality života (MSQLI).

Krev bude odebrána pro rutinní testování (CBC, CMP) a pro analýzy adipokinů/cytokinů, kortizolu a T reg buněk provedené laboratoří vyšetřovatelů. Všechna tato hodnocení a odběry vzorků se budou opakovat 15. den a 3. a 6. měsíc u pacientů, kteří se zúčastní fáze chronické CR. Neurologická vyšetření budou také provedena 2., 3. den během léčby steroidy a 15. den. Další vyšetření budou provedena v měsíci 1, 3 a 6 u pacientů vstupujících do fáze chronické CR. Tato hodnocení budou při každé návštěvě zahrnovat: fyzické hodnocení s neurologickým hodnocením (neurologické vyšetření / EDSS, MSFC) a MSQLI, BMI a obvod pasu, aby odrážely změny tělesné hmotnosti způsobené CR. U pacientů v chronické fázi CR bude krev odebrána 1., 15. a 3. a 6. měsíc. Bude to 15 ml krve odebrané ráno po celonočním hladovění. Testování CBC, CMP a celkového kortizolu provede chemická laboratoř Barnes Jewish Hospital. Zbytek krve bude zpracován do jedné hodiny v laboratoři vyšetřovatelů. Sérum bude rozděleno na alikvoty a skladováno při -80 °C pro budoucí analýzy (adiponektin, leptin, rezistin, tumor nekrotizující faktor-alfa a IL-6 pomocí ELISA). Výzkumníci budou také zkoumat počet a funkci periferních T reg buněk. Počet T reg bude hodnocen průtokovou cytometrií po obarvení čerstvé krve specifickými markery, které identifikují T reg (CD4+ buňky exprimující vysoké hladiny CD25) a Foxp3. Funkce Treg bude hodnocena in vitro, jak je popsáno. Stručně řečeno, populace buněk CD4+CD25high a CD4+CD25- budou izolovány z periferní krve a společně kultivovány v různých poměrech v přítomnosti protilátek proti klastrové diferenciaci (CD) 3, které stimulují proliferaci buněk CD4+CD25. Proliferace CD4+CD25- je inhibována rozdílně na základě podílu Treg buněk v kultuře. Proliferace buněk CD4+CD25- a hladiny cytokinů v supernatantech kultury budou odrážet supresivní schopnosti Treg.

Vzorek stolice bude také odebrán na začátku, 15. den, 3. a 6. měsíc. Tyto vzorky budou analyzovány za účelem studia účinků CR na střevní mikroflóru.