Ograniczenie kalorii u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym

Celem tego badania jest określenie wpływu CR na biomarkery krwi (w tym poziomy adipokin, cytokin, kortyzolu i liczby T w surowicy) w porównaniu ze standardowymi terapiami u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym podczas zdrowienia po nawrocie. Szesnastu pacjentów ze stwardnieniem rozsianym (wskaźnik masy ciała – BMI ≥ 23) z napadem zostanie włączonych i losowo przydzielonych do:

1. leczenie sterydami (10 dni), które jest standardową terapią nawrotów stwardnienia rozsianego; Lub
2. CR plus leczenie sterydami (10 dni). Ograniczenie kalorii zostanie osiągnięte poprzez przestrzeganie reżimu postu co drugi dzień (podczas dnia postu pacjent będzie mógł zjeść dwie sałatki z oliwą z oliwek i sokiem z cytryny lub octem). W skrócie, badani będą pościć pierwszego dnia (pierwszy dzień przyjmowania sterydów), a następnie będą pościć co drugi dzień, aż do dnia 15, kolejnego dnia postu. Po 15 dniach postu co drugi dzień, obie grupy otrzymają propozycję zapisania się na schemat przerywanego postu przez 6 miesięcy (z sałatkami dozwolonymi w dniu postu) (przewlekła faza CR). Konkretnie, pacjenci z BMI <28 będą przestrzegać reżimu głodówki przez dwa dni w tygodniu, podczas gdy pacjenci z BMI>28 będą przestrzegać reżimu postu przez trzy dni w tygodniu. Próbki krwi będą pobierane i analizowane w określonych punktach podczas badania do rutynowych testów (CBC i CMP) oraz analiz immunologicznych/zapalnych. Konkretnie, próbka krwi zostanie pobrana na początku badania (dzień 1, przed rozpoczęciem przyjmowania sterydów) i po 15 dniach naprzemiennego postu. W przypadku pacjentów, którzy zostaną włączeni do badania przewlekłej CR przez sześć miesięcy, zostaną również pobrane próbki krwi w 3. i 6. miesiącu. Pacjenci ze stwardnieniem rozsianym będą oceniani w dniu 15 po rozpoczęciu podawania steroidów. Osoby, które wezmą udział w badaniu przewlekłej CR, również oddadzą krew w 3. i 6. miesiącu. Jeśli pacjenci przyjmują leki immunomodulujące na stwardnienie rozsiane, będą je kontynuować przez cały okres badania. Będą obserwowani i oceniani podczas badania przez dietetyka mającego doświadczenie z ludzkim CR. Pacjenci będą obserwowani przez dietetyka na początku badania, w 15. dniu pierwszej części badania. Podczas wizyty początkowej zostaną poinstruowani, aby pościć pierwszego dnia, a następnie co drugi dzień. Podczas dni postu pacjenci mogą jeść sałatkę z 2 łyżkami stołowymi oliwy z oliwek lub oleju rzepakowego plus ocet lub sok z cytryny dwa razy dziennie. Celem jest zjedzenie mniej niż 500 kalorii w dni postu. Dietetyk będzie również edukować pacjenta, aby spożywał odpowiednią pod względem odżywczym dietę w dni bez postu, aby uniknąć „przejadania się”. Pacjenci będą prowadzić dzienny dziennik żywieniowy, a ci, którzy wejdą w fazę przewlekłej CR, powrócą do ośrodka, aby spotkać się z dietetykiem w 3. i 6. miesiącu (z kontaktami telefonicznymi pomiędzy).

Podczas wizyty wyjściowej pacjenci podpiszą świadomą zgodę, a badacze zbiorą wywiad lekarski, przeprowadzą badanie fizykalne, obliczą BMI (określany jako waga w kg / wzrost w m2) i obwód talii (wskaźnik gromadzenia się trzewnej tkanki tłuszczowej) oraz wykonają badanie neurologiczne oceny, w tym EDSS, który jest standardowym badaniem neurologicznym stosowanym w badaniach SM, które przypisuje wynik od 0 (brak deficytu) do 10 (zgon z powodu SM), złożony test czynnościowy stwardnienia rozsianego (MSFC), który jest ilościowym testem górnych i funkcji kończyn dolnych i funkcji poznawczych uzupełnionych dodatkowym testem poznawczym zwanym Testem Modalności Symboli Cyfrowych (SDMT) oraz inwentarzem jakości życia SM (MSQLI).

Krew zostanie pobrana do rutynowych badań (CBC, CMP) oraz do analizy adipokin/cytokin, kortyzolu i limfocytów T reg przeprowadzanych przez laboratorium badaczy. Wszystkie te oceny i pobieranie próbek zostaną powtórzone w 15 dniu oraz w 3 i 6 miesiącu dla pacjentów, którzy będą uczestniczyć w fazie przewlekłej CR. Badania neurologiczne będą również wykonywane w 2., 3. dniu leczenia sterydami oraz w 15. dniu. Dodatkowe oceny zostaną przeprowadzone w 1, 3 i 6 miesiącu dla pacjentów wchodzących w fazę przewlekłej CR. Oceny te będą obejmować podczas każdej wizyty: ocenę fizyczną z ocenami neurologicznymi (badanie neurologiczne / EDSS, MSFC) i MSQLI, BMI i obwód talii w celu odzwierciedlenia zmian masy ciała spowodowanych CR. Krew zostanie pobrana w 1. dniu, 15. dniu oraz 3. i 6. miesiącu dla pacjentów w fazie przewlekłej CR. Będzie to 15 ml krwi pobranej rano po całonocnym poście. Testy CBC, CMP i całkowitego kortyzolu zostaną przeprowadzone przez laboratorium chemiczne Barnes Jewish Hospital. Reszta krwi zostanie przetworzona w ciągu godziny w laboratorium śledczych. Surowica zostanie podzielona na porcje i będzie przechowywana w temperaturze -80 ⁰C do przyszłych analiz (adiponektyna, leptyna, rezystyna, czynnik martwicy nowotworu-alfa i IL-6 w teście ELISA). Badacze zbadają również liczbę i funkcję obwodowych komórek T reg. Liczba T reg zostanie oceniona za pomocą cytometrii przepływowej po wybarwieniu świeżej krwi specyficznymi markerami, które identyfikują T reg (komórki CD4+ wykazujące wysoki poziom ekspresji CD25) i Foxp3. Funkcja Treg zostanie oceniona in vitro, jak opisano. Pokrótce, populacje komórek CD4+CD25high i CD4+CD25- będą izolowane z krwi obwodowej i współhodowane w różnych proporcjach w obecności przeciwciał przeciw różnicowaniu klastrów (CD) 3, które stymulują proliferację komórek CD4+CD25-. Proliferacja CD4+CD25- jest hamowana w różny sposób w zależności od proporcji komórek T reg w hodowli. Proliferacja komórek CD4+CD25- i poziomy cytokin w supernatantach hodowli będą odzwierciedlać zdolności hamowania Treg.

Próbka kału zostanie również pobrana na początku badania, w dniu 15, miesiącu 3 i 6. Próbki te zostaną poddane analizie w celu zbadania wpływu CR na mikroflorę jelitową.