肠易激综合征的粪便微生物群移植

1. 背景

   肠易激综合症 (IBS) 是一种慢性、使人衰弱的功能性胃肠病症，估计欧洲人口患病率在 10 -15% 之间（Ford 等人）。 这些症状可能会使人虚弱，并导致生活质量显着下降，尤其是受影响更严重的人。

   肠道微生物群功能和组成的改变越来越多地被认为是潜在的病因学因素。 （柯林斯等人）。 这一概念最有力的指标之一是急性胃肠炎发作后患 IBS 的风险显着增加。 前瞻性研究表明，3-36% 的肠道感染会导致新的、持续的 IBS 症状。 （Gwee 等人，Neal 等人）许多研究表明，与健康个体相比，IBS 患者肠道微生物群的多样性、稳定性和代谢活动发生了变化（Jeffrey 等人）。 尽管尚未确定 IBS 的独特微生物特征，但多项研究表明，肠道微生物组成富含厚壁菌门，同时拟杆菌属的丰度降低（Jeffery 等人，Rajilic-Stojanovic 等人）。

   粪便微生物移植 (FMT) 已被证明是一种安全、廉价且有效的治疗复发性艰难梭菌感染的方法，在一些研究中治愈率高达 90%，并且具有非常好的副作用和不良事件特征（van. Nood 等人）。 在这项研究中，研究人员希望调查使用健康供体的粪便来恢复健康的肠道微生物群特征是否会改善 IBS 患者的临床结果。

   使用参与者自己的粪便重新输注的自体粪便微生物群移植以前曾在使用 FMT 的研究中用作安慰剂（Vrieze 等人）

2. 学习规划

   该研究的设计是一项前瞻性随机安慰剂对照研究，将在单一地点进行。 该研究将在 8 周的时间内总共进行四次访问。 第一次访问将是筛选访问，以评估研究的资格。 第二次访问将是治疗访问，患者将使用来自健康供体或安慰剂的粪便接受 FMT。 自体粪便微生物群移植将用作本研究的安慰剂。 随访将在治疗后 4 周和 8 周进行。

   该研究将招募多达 50 名 IBS 患者。 根据罗马 III 标准，所有患者都将确诊为 IBS。 受试者将从参加科克胃肠病学门诊的 IBS 患者群体中招募。 受试者将被随机分配到治疗组或安慰剂对照组。

3. 捐助者选择：

   供体粪便将从健康供体获得。 捐赠者将接受面谈以确保他们身体健康，并将接受筛查问卷以确定可能通过粪便传播的潜在感染风险。 某些排除标准将适用，捐赠者将接受粪便和血清检测。 捐赠过程对捐赠者来说是安全的（Bakken 等人）。 选定的具有不同微生物组成的健康个体将优先用作供体候选者，除非接受者希望指定使用指定的供体。

   3.1 供体排除标准

   感染因子的风险 已知的人类免疫缺陷病毒、乙型或丙型肝炎。 已知的 HIV 或病毒性肝炎暴露 已知的当前传染病 高危生活方式因素 增加克雅氏病风险的因素。 胃肠道合并症 炎症性肠病病史 IBS 病史 胃肠道恶性肿瘤或息肉病病史 主要胃肠手术史 可能或确实影响肠道微生物群组成的因素。 前 3 个月内使用抗生素 主要免疫抑制药物 全身性抗肿瘤药物 其他接受者特定注意事项 最近摄入潜在过敏原，接受者已知过敏。 全身性自身免疫 特应性疾病 慢性疼痛综合征 肥胖。

   3.2 供体测试

   将对所有潜在捐赠者进行以下筛选测试：

   粪便检测 艰难梭菌 通过聚合酶链反应 (PCR) PCR 检测志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌维罗毒素、弯曲杆菌隐孢子虫卵和寄生虫 血清学检测 HIV、1 型和 2 型甲型肝炎 IgM 乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎核心抗体和乙型肝炎表面抗体。

   丙型肝炎筛查人 T 细胞白血病病毒 (HTLV) 快速血浆反应素和荧光密螺旋体抗体被吸收。

4. FMT 程序协议：

在供体和受体准备以及供体粪便的准备和管理方面，应遵循以下程序。

1. 供体准备 可以在手术前一晚使用温和的渗透性泻药。 在手术当天早上提供粪便样本。
2. 接受者准备 在 FMT 前一天进行标准的结肠镜检查前肠道准备。

3. 粪便准备 供体粪便通过后，将立即转移到厌氧通风橱中进行处理。

   粪便将被稀释和过滤，产生液体浆液稠度。然后将液体粪便放入厌氧瓶中并转移到给药部位。

4. 大便管理。 粪便准备好后应尽快给药，最多 2 小时。

   FMT 将通过内窥镜进行。 所有患者都将接受结肠镜检查，粪便液将通过内窥镜注入。

   理想情况下，所有患者还将在同一疗程中通过食胃十二指肠镜检查进行十二指肠粪便输注。 但是，如果患者不同意，则不会被视为违反协议。

5. 学习程序：

   研究将按照本方案的概述并根据 ICH 良好临床实践指南和赫尔辛基宣言 [附录 A] 进行。 在进行任何与研究相关的程序之前，将获得知情同意。

   5.1.1 筛选访问（访问 1）

   将向所有潜在受试者解释研究的目的和要进行的程序。 然后将要求受试者阅读受试者信息表并阅读并签署知情同意书，并将收到一份签名副本。 以下评估将在第 1 次访视时进行 知情同意 人口统计学 医疗和用药史 罗马 III 调查问卷 资格标准评估 生命体征 身体检查、体重、身高和 BMI 评估 食物频率问卷 IBS 症状评估分数 医院焦虑和抑郁量表 国际身体活动索引 血液样本 粪便样本

   如果患者符合资格标准，他们将在 28 天内返回接受粪便微生物群移植。

   5.1.2 治疗访问（访问 2）

   在访问 2 时，患者将接受粪便微生物移植。 在手术之前，所有患者都应进行标准的肠道准备。 在第 2 次访问时，将在执行 FMT 之前对所有患者执行以下评估 关于前几周生命体征和身体检查的简短访谈。 资格评估 内窥镜检查的知情同意书。

   将通过内窥镜将供体粪便施用于患者。 所有患者都将接受结肠镜检查，并通过结肠镜注入供体粪便。 执行十二指肠输注以及结肠输注的决定将由患者偏好决定。 如果患者同意，他们还将接受食胃十二指肠镜检查，供体粪便将通过胃镜注入患者的十二指肠。

   按照标准内窥镜检查指南，将按照程序对专利进行恢复管理。

   5.1.3 访问 3 和 4 - 后续访问。

   在第 3 次和第 4 次访视时，患者将在前几周接受以下访谈。 生命体征和身体检查，包括 BMI 伴随用药 不良事件监测 用于临床和研究的血液样本。 粪便样本（访问前在家中收集）。 食物频率问卷 IBS 症状评估分数 整体评估问题。 医院焦虑抑郁量表国际身体活动指数

   5.2 从研究中移除受试者

   受试者将退出研究，如果受试者；自主选择退出研究；如果他/她出现任何违反原始标准的情况；根据研究者的判断，在任何时候被认为不适合继续研究。

   5.3 合并用药

   受试者将被问及他们的用药史。 服用的任何药物的详细信息将记录在患者病例记录和病例报告表中

   5.4 终点评估

   受试者将进行以下终点评估：评估自基线/治疗访视以来的医疗和手术史变化、IBS 严重程度/QOL 评分、粪便样本评估/分析、血液样本分析、身体评估、合并用药和不良事件。

   为确保受试者安全，研究期间将进行以下评估：生命体征、不良事件监测、身体检查和实验室评估

6. 生物样本收集和分析：

6.1 血液

每次就诊时将采集血液用于临床血液学和生化分析以及细胞因子分析。

血液学和生物化学面板将按照护理标准进行 - 全血细胞计数（包括血红蛋白、白细胞计数、血小板计数、血细胞比容和白细胞分类计数）、红细胞沉降率 (ESR)、钠、钾、氯、尿素、肌酐、蛋白质、白蛋白、crp、肝功能检查和定量免疫球蛋白（IgA、Immunoglobulin G、IgM）。 参与者还将在访问 1 时进行 HIV、乙型肝炎、丙型肝炎、HTLV 和梅毒筛查。 该分析将在科克大学医院 (CUH) 实验室进行。 将审查所有实验室结果，并由研究人员签署报告并记录在患者病例报告表 (CRF) 中。

将进行用于炎症免疫标记物（包括细胞因子）血清分析的研究血液，这些血液将在科克大学学院 (UCC) 消化药物中心的实验室进行处理。

6.2 粪便样本

每次访问都会收集粪便样本。 将从每个受试者的粪便样本中提取细菌 DNA，并在进行粪便微生物群移植之前和之后通过对扩增的细菌核糖体核糖核酸 (RNA) 基因进行测序来确定微生物群的组成。 还将对粪便样本进行病毒颗粒分析和噬菌体研究。

6.3 活检/肠组织收集、储存和分析

如果患者同意，将在进行 FMT 肠道组织活检时进行内窥镜检查。 组织样本将收集在培养基中并储存在 4 0C 下，直到送到 UCC 的实验室。 微生物群组成分析将通过对每个受试者 20,000-40,000 个 16S rRNA 基因扩增子进行直接焦磷酸测序来进行（Pubmed：20571116）。 UCC 生物信息学团队进行的序列生成和分析将确定个体微生物群的组成。

6.4 分析

收集的所有样本的分析将在 CUH 和/或 UCC/Teagasc 实验室进行。 在某些情况下，分析可能会与 UCC 以外的第三方合作完成，包括制药公司，这可能需要将样品运送到该组织。 这些样本将仅使用匿名样本标识符编号进行编码和识别。 此外，样本可能会被储存并用于未来研究中的分析。 同样，样本将仅使用匿名样本标识符编号进行编码和识别。

7 .Statistics and Study Powering：

预计该研究人群的安慰剂反应率为 40%。 与安慰剂相比，该研究将具有适当的功效以检测治疗组至少 15% 的额外益处。

主要和次要目标将使用标准参数和非参数统计技术进行分析，以测试 FMT 的有效性。 将使用复杂的生物统计分析来评估探索性目标，以确定预测对 FMT 反应的微生物群概况。

8. 研究实施或计划分析的变化：

除紧急情况外，方案的任何重大变更（即影响受试者安全、调查范围、研究科学质量的变更）在独立伦理委员会 (IEC) 批准之前不会实施以书面形式审查、批准和记录方案修正案。 修改内容包括变更研究者和研究者或站点地址等。

当为消除或降低对受试者的风险而进行更改时，可以在 IEC 审查和批准之前实施。 研究者应在实施后 5 个工作日内将上述变更书面通知 IEC。

在紧急情况下，研究者应采取任何适当的医疗程序，但是所有此类程序（轻微或不重要）、变化（例如 统计学家、印刷错误、拼写错误等）在上述更改得到独立伦理委员会审查和批准并且研究人员提供了一份传达更改的备忘录之前不会进行。

九、研究者的义务：

该研究将根据适用的联邦法规 50、56 和 312 的良好临床实践 21 代码进行；国际协调会议 (ICH) 在联邦公报上发布的良好临床实践； 97 年 5 月 9 日（第 62 卷，第 90 期，第 25691-25709 页）。

研究者将根据医学和临床研究实践的最高标准执行或直接监督此处描述的所有服务或此处描述的附带服务的执行。 任何研究责任的委派都将以书面形式记录。

研究者和任何合作研究者有责任了解并遵守方案，并确保协助人员的所有成员也理解并遵守方案。

10.广告：

所有主题广告，无论是专业或消费者出版物、广播、电视或任何其他方式，都将在启动前获得独立伦理委员会的批准。

11.机构审查：

本研究的地点、研究者、方案、知情同意书和任何其他相关文件将由以下机构批准：

科克教学医院科克研究伦理委员会，科克小汉诺威街 6 号兰开斯特大厅。

在 IEC 批准协议和受试者同意书以及对受试者的任何广告、日记和说明（如果适用）之前，研究不会开始。 IEC 批准将以书面形式提交给研究者。

12. 主体同意：

将在使用前获得独立伦理委员会对书面知情同意书的批准。

该同意书将遵守所有关于保护人类受试者的规定。

每个受试者将签署知情同意书并注明日期以作为研究的参与者。 将向受试者提供一份签署的同意书副本，并且调查员将在患者的病例记录中保留一份签署的副本。

受试者可以在任何时候退出研究而不会受到损害。 此外，如果符合受试者的最大利益，研究者可以将受试者从研究中撤出。 受试者退出研究的原因将记录在受试者的病例记录中。

13. 数据收集：

收集到的所有数据将输入受试者病例报告表和计算机数据库，将在保密条件下安全处理和存储。 研究记录将存储在科克大学医院上锁办公室的上锁金属文件柜中和需要输入密码的计算机数据库中。

研究者有责任确保所有源文件（即 研究和/或医疗记录）根据研究方案和良好临床实践完成和维护，并可在现场获得。

本研究的源文件将包括医院记录和程序报告以及数据收集表。 这些文件将用于在 CRF 上输入数据。

将保留所有常规预防措施，以确保文件在机密条件下安全存储。 除签署的同意书外，所有患者样本和研究记录的身份都将被编码，计算机数据库将采用代码而不是患者姓名。 此外，计算机访问将需要输入密码。

如果出于任何原因，受试者没有完成研究，将在案例说明中输入解释。

数据输入/管理方法将符合研究方案和良好临床实践。 所有研究对象的身份将由单独的研究编号表示。 受试者的姓名或任何其他识别细节将不会包含在任何研究数据电子文件或 CRF 中

14.机构审查：

本研究的地点、研究者、方案、知情同意书和任何其他相关文件将由以下机构批准：

科克教学医院科克研究伦理委员会，科克小汉诺威街 6 号兰开斯特大厅。

在 IEC 批准协议和受试者同意书以及对受试者的任何广告、日记和说明（如果适用）之前，研究不会开始。 IEC 批准将以书面形式提交给研究者。

15. 金融保险政策：

本研究由科克大学消化药物中心赞助，并将由科克大学人类研究责任保险进行赔偿。

16.不良和严重不良事件：

在整个研究过程中将监测和记录不良事件和严重不良事件，以确保患者安全。

每次访问时，将询问受试者自上次访问以来他们可能经历的任何不良事件。

报告的所有不良事件 (AE) 将使用 COSTART5 词典进行编码，并列出记录持续时间、严重程度、与研究治疗的关系、受试者结果以及是否需要任何治疗。