调节性 T 细胞 IVT 治疗双侧重度葡萄膜炎：剂量耐受性研究 (UVEREG)

葡萄膜炎治疗的优势和局限性 葡萄膜炎是儿童和年轻人严重视力丧失甚至失明的主要原因。 在几乎三分之一的病例中，它与传染原有关，另外三分之一作为系统实体整合在自身免疫性疾病领域，包括（白塞氏病、结节病、脊椎关节病......）或局限于眼睛（Birdshot 型视网膜脉络膜病，交感性眼炎、特发性视网膜血管炎）。 最后三分之一仍然是特发性的，尽管进行了仔细的病因学研究，但仍未确定病因。 全身性皮质类固醇通常有效但具有显着的副作用并且患者依从性通常较差。 这就是为什么有时将它们直接施用于眼后段（玻璃体），但效果只是暂时的，通常无效，并且还伴有副作用。 此外，有些是类固醇依赖性的，需要用免疫抑制剂治疗；这也可能导致许多不利影响并且并不总是有效。 在这些治疗僵局的情况下，研究人员提出了一种细胞疗法，将 CD4 + CD25 + Foxp3 调节剂 + (Tregs) 直接注射到患者的玻璃体中。

一种通过细胞疗法治疗葡萄膜炎的新方法 现在已经清楚地确定，Tregs 在自身免疫性疾病的控制中起着关键作用。 在人或小鼠中，Tregs 的严重缺陷与非常严重的自身免疫综合征有关，会导致死亡。在葡萄膜炎中，还表明 Tregs 可以控制缺陷小鼠的这种疾病。 Tregs 在人类中已有报道。 此外，我们小组和其他人已经表明，可以通过在小鼠中转移 Tregs 来预防各种自身免疫性疾病。因此，通过注射 Tregs 进行细胞治疗为治疗慢性炎症和自身免疫性疾病带来了希望。 然而，只有特异性而非多克隆 Treg 在全身给药时具有强大的治疗潜力。 唯一可用于临床的 Tregs 是通过磁珠纯化的多克隆 Tregs，其上吸附有抗 CD25 抗体。 该技术提供了富含 50% 至 70% Tregs 的细胞制剂，其余部分由效应 T 细胞 (Teffs)、B 淋巴细胞和 NK 细胞组成。 全身注射特定 Tregs 的一种治疗替代方法是在纯化的临床级条件下将预激活的多克隆 Tregs 直接注射到自身免疫性疾病的目标部位。

研究人群的描述。 双侧重度类固醇依赖性非感染性葡萄膜炎患者。 在完成对系统的全面审查后，已排除感染或肿瘤病因。 所有患者的 Quantiferon 试验均呈阴性，Mantoux 试验正常。 送往专门实验室的生物测试将消除活动性感染。 在某些情况下，将分析 AC tap 后获得的房水和/或玻璃体切除术后获得的玻璃体活检，用于诊断测定 IL-10、免疫负荷因子或 PCR 分析（弓形虫病、疱疹病毒）。

人类葡萄膜炎的病理生理学。 在葡萄膜炎患者的房水和玻璃体中发现了炎症趋化因子和细胞因子，例如 IL-6、IFN-g、IL-8 和 MCP-1，有时还有 IL-1ß、IL-2 和 TNF-α。 鉴于这些人类样本中可用的体积很小（约 100 毫升），数据是通过使用流式细胞术的多种检测技术获得的，用于测量 50 微升体积中三十种不同细胞因子和趋化因子的浓度。

为了将研究扩展到其他细胞因子和趋化因子，研究人员还使用了一种名为“抗体阵列”的半定量技术，可以分析 30 到 170 种不同的分子。 这些初步结果在一些患者中进行了评估，证实了患有葡萄膜炎（未显示）的患者眼中存在 Th1 炎症特征，并证实了我们的策略

与注射细胞相关的风险。 在临床前小鼠模型中未观察到 Tregs 注射的副作用。 在我们的生物疗法设施中，如本文所述，Tregs 的生产将包含 50% 至 70% 的 Tregs，由表型 CD4 + Foxp3 + CD25 + 定义。 因此，研究人员测试了白细胞污染物对小鼠葡萄膜炎治疗效果的影响。 此类污染物效应 T 细胞、B 细胞、NK 细胞、树突细胞或巨噬细胞的存在不会在临床或组织学水平上引起可见的副作用。 第二个潜在风险是注射的多克隆 Treg 已分化为不同的细胞类型。 前期研究表明，天然人Tregs在IL-2或IL-15存在下可分化为Th17型T淋巴细胞。 添加 IL-1ß、IL-6、IL-21 或 IL-23 会加强这种分化。 尽管研究人员不能正式排除注射 IVT 的 Treg 可能分化为 Th17 细胞的可能性，因为这种事件可能未在葡萄膜炎眼中检测到（数据未显示）。

由于 IVT 期间结膜回流，注射细胞从眼睛传播的另一个潜在风险。 可以考虑的最后一个风险是由于调节性 T 细胞产生致耐受性环境而导致非霍奇金淋巴瘤的发展。 这种风险与当前葡萄膜炎参考治疗相关的风险相同：免疫抑制剂和皮质类固醇。 这些风险从未在动物和人类的文献中得到充分描述。

剂量和患者人数。 3个水平的Tregs剂量将分别为0.4、1.2和360万。 最低剂量为 40 万个 Treg，相当于小鼠有效剂量的 2 倍。

将有 2 至 18 名患者参加该试验。 为 12 名患者提供了资金。

临床试验质量管理规范（GCP） 研究将按照 GCP 和现行法律法规进行。 研究人员证明，该研究将按照 GCP 的协议进行。生物疗法设施根据细胞疗法的现行法规进行生产活动、质量控制，并遵守细胞疗法 (BPTC) 的良好实践以及标准操作程序（标准作业程序）。 这篇文章的实现需要 ANSM 的具体授权总而言之，现在已经明确 CD4 + CD25 + Foxp3 调节剂 (Tregs) 的细胞治疗方法在人类或小鼠临床试验中控制自身免疫性疾病方面发挥着关键作用. 因此，该临床试验评估了 Tregs 治疗双侧严重类固醇依赖性非感染性葡萄膜炎患者的耐受剂量的影响。