Leczenie obustronnego ciężkiego zapalenia błony naczyniowej oka za pomocą IVT regulatorowych komórek T: badanie tolerancji dawki (UVEREG)

Arsenał i ograniczenia w leczeniu zapalenia błony naczyniowej oka Zapalenie błony naczyniowej oka jest główną przyczyną poważnej utraty wzroku, a nawet ślepoty u dzieci i młodych dorosłych. W prawie jednej trzeciej przypadków jest związana z czynnikiem zakaźnym, kolejna trzecia jest zintegrowana w dziedzinie chorób autoimmunologicznych jako jednostek ogólnoustrojowych, w tym (choroba Behçeta, sarkoidoza, spondyloartropatia ...) lub ograniczona do oka (retinochoroidopatia typu Birdshot, współczulne zapalenie oka, idiopatyczne zapalenie naczyń siatkówki). Ostatnia trzecia pozostaje idiopatyczna, gdzie pomimo dokładnych badań etiologicznych nie zidentyfikowano przyczyny. Ogólnoustrojowe kortykosteroidy są często skuteczne, ale mają znaczące skutki uboczne, a przestrzeganie zaleceń przez pacjentów jest często słabe. Dlatego czasami podaje się je bezpośrednio do tylnego odcinka oka (ciała szklistego), ale efekt jest tylko chwilowy, często nieskuteczny, a także wiąże się z działaniami niepożądanymi. Ponadto niektóre są zależne od steroidów i wymagają leczenia środkami immunosupresyjnymi; które również mogą być odpowiedzialne za wiele działań niepożądanych i nie zawsze są skuteczne. W takich sytuacjach impasu terapeutycznego badacze proponują terapię komórkową polegającą na wstrzyknięciu regulatorów CD4 + CD25 + Foxp3 + (Tregs) bezpośrednio do ciała szklistego pacjentów.

Nowe podejście do terapii zapalenie błony naczyniowej oka za pomocą terapii komórkowej Obecnie jasno ustalono, że Treg odgrywają kluczową rolę w zwalczaniu chorób autoimmunologicznych. U człowieka lub myszy głęboki deficyt Treg jest związany z bardzo ciężkim zespołem autoimmunologicznym, prowadzącym do śmierci. W zapaleniu błony naczyniowej oka wykazano również, że Treg kontrolują tę chorobę u myszy z niedoborem. Treg odnotowano u ludzi. Ponadto nasza grupa i inni wykazali, że poprzez przeniesienie Treg u myszy można zapobiegać różnym chorobom autoimmunologicznym. Tak więc terapia komórkowa przez wstrzyknięcie Treg budzi nadzieje na leczenie przewlekłych chorób zapalnych i autoimmunologicznych. Jednak tylko specyficzne, a nie poliklonalne Treg, mają silny potencjał terapeutyczny, gdy są podawane ogólnoustrojowo. Jedynymi Treg, które można stosować w praktyce klinicznej, są poliklonalne Treg oczyszczone za pomocą kulek magnetycznych, na których zaadsorbowane jest przeciwciało anty-CD25. Technologia ta zapewnia preparat komórkowy wzbogacony w Treg od 50 do 70%, resztę stanowią efektorowe limfocyty T (Teffs), limfocyty B i komórki NK. Alternatywą terapeutyczną dla ogólnoustrojowego wstrzykiwania specyficznych Treg jest wstrzykiwanie preaktywowanych poliklonalnych Treg bezpośrednio w docelowe miejsce choroby autoimmunologicznej, w oczyszczonym stanie klinicznym.

Opis badanej populacji. Pacjenci z obustronnym, ciężkim, steroidozależnym, niezakaźnym zapaleniem błony naczyniowej oka. Etiologie zakaźne lub nowotworowe zostały wykluczone po zakończeniu kompleksowego przeglądu systemów. Wszyscy pacjenci mieli ujemny wynik testu Quantiferon i prawidłowy test Mantoux. Testy biologiczne przesłane do wyspecjalizowanych laboratoriów wyeliminują aktywną infekcję. W niektórych przypadkach ciecz wodnista uzyskana po nakłuciu AC i/lub biopsja ciała szklistego uzyskana po witrektomii zostanie poddana analizie pod kątem oznaczenia diagnostycznego IL-10, współczynnika obciążenia immunologicznego lub analizy PCR (toksoplazmoza, wirusy opryszczki).

Patofizjologia zapalenia błony naczyniowej oka u ludzi. Chemokiny i cytokiny zapalne, takie jak IL-6, IFN-g, IL-8 i MCP-1, a czasami IL-1β, IL-2 i TNF-alfa, stwierdzono w cieczy wodnistej i ciele szklistym pacjentów z zapaleniem błony naczyniowej oka. Biorąc pod uwagę niewielką objętość dostępną w tych ludzkich próbkach (około 100 ml), dane uzyskuje się za pomocą technik wielokrotnego wykrywania przy użyciu cytometrii przepływowej, do pomiaru stężenia trzydziestu różnych cytokin i chemokin w objętości 50 mikroli.

Aby rozszerzyć badanie na inne cytokiny i chemokiny, badacze wykorzystali również półilościową technikę zwaną „macierzą przeciwciał”, która umożliwia analizę wielu różnych cząsteczek w zakresie od 30 do 170. Te wstępne wyniki, oceniane u niektórych pacjentów, potwierdzają obecność profilu zapalnego Th1 w oku pacjentów cierpiących na zapalenie błony naczyniowej oka (nie pokazano) i potwierdzają naszą strategię

Zagrożenia związane z wstrzykniętymi komórkami. W przedklinicznym modelu mysim nie zaobserwowano skutków ubocznych wstrzyknięcia Tregs. W naszych obiektach Biotherapies produkcja Treg, jak podano w tym eseju, będzie zawierała od 50 do 70% Treg, zdefiniowanych przez fenotyp CD4 + Foxp3 + CD25 +. Dlatego badacze przetestowali wpływ zanieczyszczeń leukocytami na efekt terapeutyczny zapalenia błony naczyniowej oka u myszy. Obecność takich zanieczyszczeń efektorowych komórek T, komórek B, komórek NK, komórek dendrytycznych czy makrofagów nie powodowała widocznych skutków ubocznych na poziomie klinicznym i histologicznym. Drugim potencjalnym ryzykiem jest to, że wstrzyknięte poliklonalne Treg zostały zróżnicowane w inny typ komórek. Wcześniejsze badanie wykazało, że naturalne ludzkie Treg mogą różnicować się w limfocyty T typu Th17 w obecności IL-2 lub IL-15. To zróżnicowanie jest uwydatnione przez dodanie IL-1ß, IL-6, IL-21 lub IL-23. Chociaż badacze nie mogą formalnie wykluczyć możliwości, że Treg wstrzyknięty IVT może różnicować się w komórki Th17, ponieważ zdarzenie to prawdopodobnie nie zostało wykryte w zapaleniu błony naczyniowej oka (dane nie pokazane).

Innym potencjalnym ryzykiem rozsiewu wstrzykniętych komórek z oka jest refluks w spojówce podczas IVT. Ostatnim ryzykiem, które można rozważyć, jest rozwój chłoniaka nieziarniczego poprzez tworzenie środowiska tolerogennego za sprawą regulatorowych limfocytów T. Ryzyko to jest identyczne z ryzykiem związanym z obecnym referencyjnym leczeniem zapalenia błony naczyniowej oka: lekami immunosupresyjnymi i kortykosteroidami. Zagrożenia te nigdy nie zostały w pełni opisane w literaturze zarówno u zwierząt, jak i u ludzi.

Dawkowanie i liczba pacjentów. Trzy poziomy dawek Treg wyniosą odpowiednio 0,4, 1,2 i 3,6 miliona. Najniższa dawka 0,4 miliona Treg odpowiada 2-krotności skutecznej dawki u myszy.

Do tego badania zostanie włączonych od dwóch do 18 pacjentów. Finansowanie obejmuje 12 pacjentów.

Dobra praktyka kliniczna (GCP) Badania będą prowadzone zgodnie z GCP oraz obowiązującymi przepisami prawa i regulacjami. Badacze zaświadczają, że badania będą prowadzone zgodnie z protokołem GCP Zakłady Biotherapies prowadzą działalność produkcyjną, kontrolę jakości zgodnie z obowiązującymi przepisami dotyczącymi terapii komórkowej i zgodności z dobrymi praktykami Terapii Komórkowej (BPTC), a także zgodnie ze standardowymi procedurami operacyjnymi ( MACZANKA). Do realizacji tego eseju wymagana jest specjalna zgoda ANSM. Podsumowując, obecnie wyraźnie ustalono, że podejście do terapii komórkowej regulatorów CD4 + CD25 + Foxp3 (Treg) odgrywa kluczową rolę w kontroli chorób autoimmunologicznych w teście klinicznym u ludzi lub myszy . Dlatego w tym badaniu klinicznym oceniano wpływ dawki tolerancji u pacjentów leczonych Tregs z powodu obustronnego, ciężkiego, zależnego od steroidów, niezakaźnego zapalenia błony naczyniowej oka.