Behandeling van de bilaterale ernstige uveïtis door IVT van regulator-T-cellen: studie van de tolerantie van de dosis (UVEREG)

Arsenaal en beperkingen bij de behandeling van uveïtis Uveïtis is een belangrijke oorzaak van ernstig gezichtsverlies of zelfs blindheid bij kinderen en jonge volwassenen. In bijna een derde van de gevallen wordt het geassocieerd met een infectieus agens, een ander derde is geïntegreerd op het gebied van auto-immuunziekten als systemische entiteiten waaronder (ziekte van Behçet, sarcoïdose, spondyloarthropathie ...) of beperkt tot het oog (Birdshot-type retinochoroidopathie, sympathische oftalmie, idiopathische retinale vasculitis). Het laatste derde deel blijft idiopathisch, waarbij ondanks zorgvuldig etiologisch onderzoek geen oorzaak wordt gevonden. De systemische corticosteroïden zijn vaak effectief, maar hebben aanzienlijke bijwerkingen en de therapietrouw van de patiënt is vaak slecht. Daarom worden ze soms rechtstreeks in het achterste deel van het oog (glasachtig lichaam) toegediend, maar het effect is slechts tijdelijk, vaak niet effectief en gaat ook gepaard met bijwerkingen. Sommige zijn bovendien afhankelijk van steroïden en vereisen behandeling met immunosuppressiva; die ook verantwoordelijk kunnen zijn voor veel nadelige effecten en niet altijd effectief zijn. In deze therapeutische impasse-situaties stellen onderzoekers een celtherapiebenadering voor, injectie van CD4 + CD25 + Foxp3-regulatoren + (Tregs), rechtstreeks in het glasvocht van patiënten.

Een nieuwe therapiebenadering uveïtis door celtherapie Het is nu duidelijk vastgesteld dat Tregs een cruciale rol spelen bij de beheersing van auto-immuunziekten. Bij mens of muis wordt een groot tekort aan Tregs in verband gebracht met een zeer ernstig auto-immuunsyndroom, dat tot de dood leidt. Bij uveïtis is ook aangetoond dat Tregs deze ziekte onder controle houdt bij deficiënte muizen. Tregs zijn gemeld bij mensen. Bovendien hebben onze groep en anderen aangetoond dat verschillende auto-immuunziekten kunnen worden voorkomen door overdracht van Tregs bij muizen. Celtherapie door injectie van Tregs wekt dus hoop op de behandeling van chronische ontstekings- en auto-immuunziekten. Alleen specifieke en niet polyklonale Tregs hebben echter een sterk therapeutisch potentieel wanneer ze systemisch worden toegediend. De enige Tregs die in de kliniek kunnen worden gebruikt, zijn polyklonale Tregs die zijn gezuiverd door magnetische bolletjes waaraan anti-CD25-antilichaam is geadsorbeerd. Deze technologie zorgt voor een celpreparaat verrijkt met Tregs voor 50 tot 70%, waarbij de balans bestaat uit effector T-cellen (Teffs), B-lymfocyten en NK-cellen. Een therapeutisch alternatief voor de systemische injectie van specifieke Tregs is het rechtstreeks injecteren van gepreactiveerde polyklonale Tregs in de doelplaats van de auto-immuunziekte, in gezuiverde toestand van klinische kwaliteit.

Beschrijving van de onderzoekspopulatie. Patiënten met bilaterale ernstige steroïde-afhankelijke niet-infectieuze uveïtis. Infectieuze of tumorale etiologieën zijn uitgesloten na voltooiing van een uitgebreide beoordeling van systemen. Alle patiënten hadden een negatieve Quantiferon-test en een normale Mantoux-test. Biologische tests die naar gespecialiseerde laboratoria worden gestuurd, zullen een actieve infectie elimineren. In sommige gevallen zal kamervocht verkregen na AC tap en/of glasvochtbiopsie verkregen na vitrectomie worden geanalyseerd voor diagnostische assay IL-10, immuunbelastingsfactor of PCR-analyse (toxoplasmose, herpesvirussen).

Pathofysiologie van uveïtis bij de mens. Inflammatoire chemokines en cytokines, zoals IL-6, IFN-g, IL-8 en MCP-1 en soms IL-1ß, IL-2 en TNF-alpha werden gevonden in het kamerwater en het glasvocht van patiënten met uveïtis. Gezien het kleine volume dat beschikbaar is in deze menselijke monsters (ongeveer 100 ml), worden gegevens verkregen met meerdere detectietechnieken met behulp van flowcytometrie, voor het meten van de concentratie van dertig verschillende cytokines en chemokines in een volume van 50 microl.

Om de studie uit te breiden naar andere cytokines en chemokines, gebruikten onderzoekers ook een semi-kwantitatieve techniek genaamd ""antibody array"" die de analyse van een aantal verschillende moleculen mogelijk maakt, variërend van 30 tot 170. Deze voorlopige resultaten, geëvalueerd bij sommige patiënten, bevestigen de aanwezigheid van een Th1-ontstekingsprofiel in het oog van patiënten die lijden aan uveïtis (niet afgebeeld) en bevestigen onze strategie

Risico's verbonden aan geïnjecteerde cellen. Er zijn geen bijwerkingen van Tregs-injectie waargenomen in een preklinisch muismodel. In onze Biotherapie-faciliteiten zal de productie van Tregs, zoals voorzien in dit essay, 50 tot 70% Tregs bevatten, gedefinieerd door het fenotype CD4 + Foxp3 + CD25 +. Daarom testten onderzoekers het effect van leukocytenverontreinigingen op het therapeutische effect bij uveïtis bij muizen. De aanwezigheid van dergelijke verontreinigingen effector T-cellen, B-cellen, NK-cellen, dendritische cellen of macrofagen veroorzaakte geen zichtbare bijwerkingen op klinisch of histologisch niveau. Een tweede potentieel risico is dat de geïnjecteerde polyklonale Tregs zijn gedifferentieerd in een ander celtype. Voorafgaande studie toonde aan dat natuurlijke menselijke Tregs kunnen differentiëren tot Th17 type T-lymfocyten in aanwezigheid van IL-2 of IL-15. Deze differentiatie wordt geaccentueerd door de toevoeging van IL-1ß, IL-6, IL-21 of IL-23. Hoewel onderzoekers de mogelijkheid niet formeel kunnen uitsluiten dat door Tregs geïnjecteerde IVT kan differentiëren tot Th17-cellen, aangezien deze gebeurtenis waarschijnlijk niet wordt gedetecteerd in uveïtis-oog (gegevens niet getoond).

Een ander potentieel risico van verspreiding van de geïnjecteerde cellen uit het oog als gevolg van reflux bij conjunctiva tijdens de IVT. Het laatste risico dat kan worden overwogen, is de ontwikkeling van non-Hodgkin-lymfoom door het creëren van een tolerogene omgeving als gevolg van regulerende T-cellen. Dit risico is identiek aan dat van de huidige referentiebehandeling van uveïtis: immunosuppressiva en corticosteroïden. Deze risico's zijn nooit volledig beschreven in de literatuur bij zowel dieren als mensen.

Dosering en aantal patiënten. De 3 niveaus van Tregs-doses zijn respectievelijk 0,4, 1,2 en 3,6 miljoen. De laagste dosis van 0,4 miljoen Tregs komt overeen met 2 keer de effectieve dosis bij muizen.

Twee tot 18 patiënten zullen deelnemen aan deze studie. Financiering is voorzien voor 12 patiënten.

Good clinical practice (GCP) Het onderzoek wordt uitgevoerd in overeenstemming met GCP en de huidige wet- en regelgeving. Onderzoekers verklaren dat het onderzoek zal worden uitgevoerd in overeenstemming met het protocol van GCP. De faciliteiten van Biotherapies voeren productieactiviteiten uit, kwaliteitscontrole volgens de huidige regelgeving voor celtherapie en naleving van goede praktijken van cellulaire therapie (BPTC) en ook volgens standaard operationele procedures ( ZOP). Specifieke toestemming is vereist van ANSM voor de realisatie van dit essay Tot slot is het nu duidelijk vastgesteld dat de celtherapiebenadering van CD4 + CD25 + Foxp3-regulatoren (Tregs) een cruciale rol speelt bij de beheersing van auto-immuunziekten bij klinische tests bij mens of muis . Daarom beoordeelt deze klinische studie het effect van tolerantiedosis van bij patiënten die met Tregs worden behandeld voor bilaterale ernstige steroïde-afhankelijke niet-infectieuze uveïtis.