Лечение двустороннего тяжелого увеита с помощью IVT регуляторных Т-клеток: исследование переносимости дозы (UVEREG)

Арсенал и ограничения в лечении увеита Увеит является основной причиной тяжелой потери зрения или даже слепоты у детей и молодых людей. Почти в одной трети случаев она связана с инфекционным агентом, еще треть интегрирована в область аутоиммунных заболеваний как системные образования, в том числе (болезнь Бехчета, саркоидоз, спондилоартропатия...) или ограничивается глазом (ретинохориопатия типа Бердшота, симпатическая офтальмия, идиопатический васкулит сетчатки). Последняя треть остается идиопатической, когда, несмотря на тщательное этиологическое исследование, причина не выявляется. Системные кортикостероиды часто эффективны, но имеют значительные побочные эффекты, и пациенты часто плохо соблюдают режим лечения. Именно поэтому их иногда вводят непосредственно в задний сегмент глаза (стекловидное тело), ​​но эффект лишь временный, часто неэффективный, а также связанный с побочными эффектами. Кроме того, некоторые из них являются стероидозависимыми и требуют лечения иммунодепрессантами; которые также могут быть причиной многих побочных эффектов и не всегда эффективны. В этих терапевтических тупиковых ситуациях исследователи предлагают клеточную терапию путем инъекции регуляторов CD4 + CD25 + Foxp3 + (Tregs) непосредственно в стекловидное тело пациентов.

Новый подход к терапии увеита с помощью клеточной терапии В настоящее время четко установлено, что Treg играют критическую роль в контроле аутоиммунных заболеваний. У человека или мыши глубокий дефицит Tregs связан с очень тяжелым аутоиммунным синдромом, ведущим к смерти. При увеите также показано, что Tregs контролируют это заболевание у дефицитных мышей. Сообщалось о Tregs у людей. Кроме того, наша и другие группы показали, что различные аутоиммунные заболевания можно предотвратить путем переноса Treg у мышей. Таким образом, клеточная терапия путем инъекции Treg дает надежду на лечение хронических воспалительных и аутоиммунных заболеваний. Однако только специфические, а не поликлональные Treg обладают сильным терапевтическим потенциалом при системном введении. Единственными Treg, которые можно использовать в клинике, являются поликлональные Treg, очищенные с помощью магнитных шариков, на которые адсорбированы анти-CD25-антитела. Эта технология обеспечивает получение клеточного препарата, обогащенного Treg на 50-70%, остальное состоит из эффекторных Т-клеток (Teffs), В-лимфоцитов и NK-клеток. Терапевтической альтернативой системной инъекции специфических Treg является инъекция предварительно активированных поликлональных Treg непосредственно в место-мишень аутоиммунного заболевания в очищенном состоянии клинической степени.

Описание исследуемой популяции. Пациенты с двусторонним тяжелым стероидозависимым неинфекционным увеитом. Инфекционная или опухолевая этиология была исключена после завершения всестороннего обзора систем. Все пациенты имели отрицательный квантифероновый тест и нормальную пробу Манту. Биологические тесты, отправленные в специализированные лаборатории, исключат активную инфекцию. В некоторых случаях водянистая влага, полученная после пункции АК, и/или биопсия стекловидного тела, полученная после витрэктомии, будет проанализирована на диагностический анализ ИЛ-10, фактор иммунной нагрузки или ПЦР-анализ (токсоплазмоз, вирусы герпеса).

Патофизиология увеита у человека. Воспалительные хемокины и цитокины, такие как IL-6, IFN-γ, IL-8 и MCP-1, а иногда и IL-1β, IL-2 и TNF-альфа, были обнаружены в водянистой влаге и стекловидном теле пациентов с увеитом. Учитывая небольшой объем, доступный в этих образцах человека (около 100 мл), данные получают с помощью нескольких методов обнаружения с использованием проточной цитометрии для измерения концентрации тридцати различных цитокинов и хемокинов в объеме 50 мкл.

Чтобы расширить исследование на другие цитокины и хемокины, исследователи также использовали полуколичественный метод, названный «матрицей антител», который позволяет анализировать ряд различных молекул в диапазоне от 30 до 170. Эти предварительные результаты, оцененные у некоторых пациентов, подтверждают наличие воспалительного профиля Th1 в глазах пациентов, страдающих увеитом (не показано), и подтверждают нашу стратегию.

Риски, связанные с инъекционными клетками. Никаких побочных эффектов инъекции Treg в доклинической модели на мышах не наблюдалось. В наших биотерапевтических учреждениях производство Treg, как указано в этом эссе, будет содержать от 50 до 70% Treg, определяемых фенотипом CD4 + Foxp3 + CD25 +. Поэтому исследователи проверили влияние контаминантов лейкоцитов на терапевтический эффект при увеите у мышей. Присутствие таких примесей эффекторных Т-клеток, В-клеток, NK-клеток, дендритных клеток или макрофагов не вызывало видимых побочных эффектов на клиническом или гистологическом уровнях. Второй потенциальный риск заключается в том, что введенные поликлональные Treg дифференцировались в клетки другого типа. Предварительное исследование показало, что естественные человеческие Treg могут дифференцироваться в Т-лимфоциты типа Th17 в присутствии IL-2 или IL-15. Эта дифференциация усиливается при добавлении IL-1ß, IL-6, IL-21 или IL-23. Хотя исследователи не могут формально исключить возможность того, что IVT, инъецированный Treg, может дифференцироваться в клетки Th17, поскольку это событие, вероятно, не было обнаружено при увеите глаза (данные не показаны).

Другой потенциальный риск диссеминации инъецированных клеток из глаза из-за рефлюкса в конъюнктиву во время ИВТ. Последним риском, который можно рассмотреть, является развитие неходжкинской лимфомы за счет создания толерогенной среды за счет регуляторных Т-клеток. Этот риск идентичен риску, связанному с текущим эталонным лечением увеита: иммунодепрессантами и кортикостероидами. Эти риски никогда не были полностью описаны в литературе как для животных, так и для людей.

Дозировка и количество пациентов. 3 уровня доз Tregs будут соответственно 0,4, 1,2 и 3,6 миллиона. Наименьшая доза 0,4 миллиона Treg, что в 2 раза превышает эффективную дозу для мышей.

В это исследование будут включены от двух до 18 пациентов. Финансирование предусмотрено для 12 пациентов.

Надлежащая клиническая практика (GCP) Исследование будет проводиться в соответствии с GCP и действующими законодательными и нормативными актами. Исследователи удостоверяют, что исследование будет проводиться в соответствии с протоколом GCP. Предприятия биотерапии осуществляют производственную деятельность, контроль качества в соответствии с действующими правилами клеточной терапии и соблюдением передовой практики клеточной терапии (BPTC), а также в соответствии со стандартными операционными процедурами ( СОП). Для реализации этого эссе требуется специальное разрешение от ANSM. В заключение, в настоящее время четко установлено, что подход к клеточной терапии регуляторов CD4 + CD25 + Foxp3 (Tregs) играет решающую роль в контроле аутоиммунных заболеваний в клинических испытаниях на людях или мышах. . Поэтому в этом клиническом испытании оценивается эффект переносимой дозы у пациентов, получавших Treg по поводу двустороннего тяжелого стероидозависимого неинфекционного увеита.