Behandling av bilateral alvorlig uveitt ved IVT av regulator T-celler: Studie av dosetoleranse (UVEREG)

Arsenal og begrensninger i behandlingen av uveitt Uveitt er en viktig årsak til alvorlig synstap eller til og med blindhet hos barn og unge voksne. I nesten en tredjedel av tilfellene er det assosiert med et smittestoff, en annen tredjedel er integrert innen autoimmune sykdommer som systemiske enheter inkludert (Behçets sykdom, sarkoidose, spondyloartropati ...) eller begrenset til øyet (retinochoroidopati av fugleskudd, sympatisk oftalmi, idiopatisk retinal vaskulitt). Den siste tredjedelen forblir idiopatisk, hvor til tross for en nøye etiologisk forskning, ingen årsak er identifisert. De systemiske kortikosteroidene er ofte effektive, men har betydelige bivirkninger og pasientens etterlevelse er ofte dårlig. Det er derfor de noen ganger administreres direkte inn i det bakre segmentet av øyet (glasslegemet), men effekten er bare midlertidig, ofte ineffektiv, og også forbundet med bivirkninger. I tillegg er noen steroidavhengige, og krever behandling med immunsuppressive midler; som også kan være ansvarlig for mange uønskede effekter og ikke alltid er effektive. I disse terapeutiske blindgatesituasjonene foreslår etterforskere en celleterapitilnærmingsinjeksjon av CD4 + CD25 + Foxp3-regulatorer + (Tregs), direkte inn i glasslegemet til pasienter.

En ny terapitilnærming uveitt ved celleterapi Det er nå klart fastslått at Tregs spiller en kritisk rolle i kontrollen av autoimmune sykdommer. Hos mennesker eller mus er et dypt underskudd i Tregs assosiert med et svært alvorlig autoimmunt syndrom, som fører til døden. Ved uveitt er det også vist at Tregs kontrollerer denne sykdommen hos mus med mangel. Tregs er rapportert hos mennesker. I tillegg har vår gruppe og andre vist at ulike autoimmune sykdommer kan forebygges ved overføring av Tregs i mus. Dermed vekker celleterapi ved injeksjon av Tregs håp om behandling av kroniske inflammatoriske og autoimmune sykdommer. Imidlertid har bare spesifikke og ikke polyklonale Tregs et sterkt terapeutisk potensial når de administreres systemisk. De eneste tregene som kan brukes i klinikken er polyklonale tregs renset av magnetiske perler som er adsorbert anti-CD25-antistoff. Denne teknologien gir et cellepreparat beriket med Tregs for 50 til 70 %, resten består av effektor T-celler (Teffs), B-lymfocytter og NK-celler. Et terapeutisk alternativ til systemisk injeksjon av spesifikke Tregs er å injisere, preaktiverte polyklonale Tregs direkte inn i målstedet for autoimmun sykdom, i renset klinisk tilstand.

Beskrivelse av studiepopulasjonen. Pasienter med bilateral alvorlig steroidavhengig ikke-infeksiøs uveitt. Infeksiøse eller tumorale etiologier har blitt ekskludert etter fullføring av en omfattende gjennomgang av systemer. Alle pasientene hadde en negativ Quantiferon-test og en normal Mantoux-test. Biologiske tester sendt til spesialiserte laboratorier vil eliminere en aktiv infeksjon. I noen tilfeller vil kammervæske oppnådd etter AC tap og/eller glasslegemebiopsi oppnådd etter vitrektomi bli analysert for diagnostisk analyse IL-10, immunbelastningsfaktor eller PCR-analyse (toksoplasmose, herpesvirus).

Patofysiologi av uveitt hos mennesker. Inflammatoriske kjemokiner og cytokiner, som IL-6, IFN-g, IL-8 og MCP-1 og noen ganger IL-1ß, IL-2 og TNF-alfa ble funnet i kammervannet og glasslegemet til pasienter med uveitt. Gitt det lille volumet som er tilgjengelig i disse menneskelige prøvene (rundt 100 ml), oppnås data med flere deteksjonsteknikker ved bruk av flowcytometri, for å måle konsentrasjonen av tretti forskjellige cytokiner og kjemokiner i et 50 mikrol volum.

For å utvide studien til andre cytokiner og kjemokiner, brukte etterforskerne også en semi-kvantitativ teknikk kalt ""antibody array"" som tillater analyse av en rekke forskjellige molekyler fra 30 til 170. Disse foreløpige resultatene, evaluert hos noen pasienter, bekrefter tilstedeværelsen av Th1 inflammatorisk profil i øyet til pasienter som lider av uveitt (ikke vist) og bekrefter vår strategi

Risiko forbundet med injiserte celler. Ingen bivirkninger av Tregs-injeksjon er observert i prekliniske musemodeller. I våre bioterapifasiliteter vil produksjonen av Tregs, som beskrevet i dette essayet, inneholde 50 til 70 % av Tregs, definert av fenotypen CD4 + Foxp3 + CD25+. Derfor testet etterforskere effekten av leukocyttforurensninger på terapeutisk effekt i uveitt hos mus. Tilstedeværelsen av slike forurensninger effektor-T-celler, B-celler, NK-celler, dendrittiske celler eller makrofager forårsaket ikke synlige bivirkninger på klinisk eller histologisk nivå. En annen potensiell risiko er at de injiserte polyklonale Tregs har blitt differensiert til en annen celletype. Anterior studie viste at naturlige menneskelige Tregs kan differensiere til Th17 type T-lymfocytter i nærvær av IL-2 eller IL-15. Denne differensieringen fremheves ved tilsetning av IL-1ß, IL-6, IL-21 eller IL-23. Selv om etterforskere ikke formelt kan utelukke muligheten for at Tregs-injisert IVT kan differensiere til Th17-celler, siden denne hendelsen sannsynligvis ikke er oppdaget i uveittøye (data ikke vist).

En annen potensiell risiko for spredning av de injiserte cellene fra øyet på grunn av refluks ved konjunktiva under IVT. Den siste risikoen som kan vurderes er utviklingen av non-Hodgkin lymfom ved å skape et tolerogent miljø på grunn av regulatoriske T-celler. Denne risikoen er identisk med den som er forbundet med dagens referansebehandling av uveitt: immunsuppressiva og kortikosteroider. Disse risikoene har aldri blitt fullstendig beskrevet i litteraturen hos både dyr og mennesker.

Dosering og antall pasienter. De 3 nivåene av Tregs-doser vil være henholdsvis 0,4, 1,2 og 3,6 millioner. Den laveste dosen på 0,4 millioner Tregs tilsvarende 2 ganger den effektive dosen hos mus.

To til 18 pasienter vil bli registrert i denne studien. Det gis midler til 12 pasienter.

God klinisk praksis (GCP) Forskningen vil bli utført i samsvar med GCP og gjeldende lover og forskrifter. Etterforskere bekrefter at forskningen vil bli utført i samsvar med protokollen til GCP. Bioterapi-fasilitetene utfører produksjonsaktiviteter, kvalitetskontroll i henhold til gjeldende forskrifter for celleterapi og overholdelse av god praksis for celleterapi (BPTC) og også i henhold til standard driftsprosedyrer ( SOP). Spesifikk autorisasjon kreves fra ANSM for realiseringen av dette essayet. For å konkludere er det nå klart fastslått at celleterapitilnærming av CD4 + CD25 + Foxp3-regulatorer (Tregs) spiller en kritisk rolle i kontrollen av autoimmune sykdommer i kliniske tester hos mennesker eller mus. . Derfor vurderer denne kliniske studien effekten av Toleransedose hos pasienter behandlet av Tregs for bilateral alvorlig steroidavhengig ikke-infeksiøs uveitt.