Vaikean kahdenvälisen uveiitin hoito säätelevien T-solujen IVT:llä: annoksen sietokyky (UVEREG)

Arsenaali ja rajoitukset uveiitin hoidossa Uveiitti on lasten ja nuorten aikuisten vakavan näönmenetyksen tai jopa sokeuden tärkein syy. Lähes kolmanneksessa tapauksista se liittyy tartuntatautiin, toinen kolmasosa on integroitunut autoimmuunisairauksiin systeemisinä kokonaisuuksina, mukaan lukien (Behçetin tauti, sarkoidoosi, spondyloartropatia...) tai rajoittuen silmään (Birdshot-tyyppinen retinochoroidopatia, sympaattinen oftalmia, idiopaattinen verkkokalvon vaskuliitti). Viimeinen kolmannes jää idiopaattiseksi, jolloin huolellisesta etiologisesta tutkimuksesta huolimatta syytä ei tunnisteta. Systeemiset kortikosteroidit ovat usein tehokkaita, mutta niillä on merkittäviä sivuvaikutuksia ja potilaiden hoitomyöntyvyys on usein huono. Siksi niitä joskus annetaan suoraan silmän takaosaan (lasiaiseen), mutta vaikutus on vain väliaikainen, usein tehoton ja siihen liittyy myös sivuvaikutuksia. Lisäksi jotkut ovat steroidiriippuvaisia ​​ja vaativat hoitoa immunosuppressiivisilla aineilla; jotka voivat myös aiheuttaa monia haittavaikutuksia eivätkä ole aina tehokkaita. Näissä terapeuttisissa umpikujatilanteissa tutkijat ehdottavat CD4 + CD25 + Foxp3 -säätelijöiden + (Tregs) -injektiota suoraan potilaan lasiaiseen.

Uusi terapialähestymistapa uveiittiin soluterapialla Nyt on selvästi osoitettu, että Tregeillä on ratkaiseva rooli autoimmuunisairauksien hallinnassa. Ihmisellä tai hiirellä Tregien syvä puute liittyy erittäin vakavaan autoimmuunioireyhtymään, joka johtaa kuolemaan. Uveiitissa on myös osoitettu, että Tregit hallitsevat tätä tautia puutteellisissa hiirissä. Tregejä on raportoitu ihmisillä. Lisäksi ryhmämme ja muut ovat osoittaneet, että erilaisia ​​autoimmuunisairauksia voidaan ehkäistä siirtämällä hiiriin Tregiä. Siten soluterapia Treg-injektiolla herättää toiveita kroonisten tulehdus- ja autoimmuunisairauksien hoidossa. Kuitenkin vain spesifisillä eikä polyklonaalisilla Tregeillä on vahva terapeuttinen potentiaali, kun niitä annetaan systeemisesti. Ainoat Tregit, joita voidaan käyttää klinikalla, ovat polyklonaaliset Tregit, jotka on puhdistettu magneettisilla helmillä, joihin adsorboituvat anti-CD25-vasta-aineet. Tämä teknologia tarjoaa soluvalmisteen, joka on rikastettu Tregeillä 50-70 %, loppuosa koostuu efektori-T-soluista (Teffs), B-lymfosyyteistä ja NK-soluista. Terapeuttinen vaihtoehto spesifisten Tregien systeemiselle injektiolle on ruiskuttaa esiaktivoituja polyklonaalisia Tregejä suoraan autoimmuunisairauden kohdekohtaan puhdistetun kliinisen tason tilassa.

Kuvaus tutkimuspopulaatiosta. Potilaat, joilla on molemminpuolinen vaikea steroideista riippuvainen ei-tarttuva uveiitti. Infektio- tai kasvainperäiset etiologiat on suljettu pois järjestelmien kattavan tarkastelun jälkeen. Kaikilla potilailla oli negatiivinen Quantiferon-testi ja normaali Mantoux-testi. Erikoislaboratorioihin lähetetyt biologiset testit poistavat aktiivisen infektion. Joissakin tapauksissa nestemäinen neste, joka on saatu AC-näppäimen ja/tai vitrektomian jälkeen saadun lasiaisen biopsian jälkeen, analysoidaan diagnostisen IL-10-määrityksen, immuunilataustekijän tai PCR-analyysin (toksoplasmoosi, herpesvirukset) varalta.

Uveiitin patofysiologia ihmisillä. Tulehduksellisia kemokiineja ja sytokiinejä, kuten IL-6, IFN-g, IL-8 ja MCP-1 ja joskus IL-1ß, IL-2 ja TNF-alfa, löydettiin uveiittipotilaiden kammionnesteestä ja lasiaisesta. Kun otetaan huomioon näissä ihmisnäytteissä käytettävissä oleva pieni tilavuus (noin 100 ml), tiedot saadaan useilla havaitsemistekniikoilla käyttämällä virtaussytometriaa kolmenkymmenen eri sytokiinin ja kemokiinin pitoisuuden mittaamiseksi 50 mikrolitran tilavuudessa.

Laajentaakseen tutkimuksen muihin sytokiineihin ja kemokiineihin tutkijat käyttivät myös semikvantitatiivista tekniikkaa nimeltä ""vasta-ainejoukko"", joka mahdollistaa useiden eri molekyylien analysoinnin välillä 30-170. Nämä alustavat tulokset, jotka on arvioitu joillakin potilailla, vahvistavat Th1-tulehdusprofiilin esiintymisen uveiitista kärsivien potilaiden silmässä (ei esitetty) ja vahvistavat strategiamme

Injektoituihin soluihin liittyvät riskit. Tregs-injektion sivuvaikutuksia ei ole havaittu prekliinisessä hiirimallissa. Bioterapiatiloissamme Tregien tuotanto, kuten tässä esseessä tarjotaan, sisältää 50–70 % Tregejä, jotka määritellään fenotyypin CD4 + Foxp3 + CD25 + perusteella. Siksi tutkijat testasivat leukosyyttikontaminanttien vaikutusta terapeuttiseen vaikutukseen uveiitissa hiirillä. Tällaisten kontaminanttien, efektori-T-solujen, B-solujen, NK-solujen, dendriittisolujen tai makrofagien läsnäolo ei aiheuttanut näkyviä sivuvaikutuksia kliinisellä tai histologisella tasolla. Toinen mahdollinen riski on, että injektoidut polyklonaaliset Tregit ovat erilaistuneet eri solutyypeiksi. Anterior-tutkimus osoitti, että ihmisen luonnolliset Tregit voivat erilaistua Th17-tyypin T-lymfosyyteiksi IL-2:n tai IL-15:n läsnä ollessa. Tätä erilaistumista korostaa IL-1ß:n, IL-6:n, IL-21:n tai IL-23:n lisääminen. Vaikka tutkijat eivät voi muodollisesti sulkea pois sitä mahdollisuutta, että Treg-injektoitu IVT voi erilaistua Th17-soluiksi, koska tätä tapahtumaa ei todennäköisesti ole havaittu silmän uveiitissa (tietoja ei näytetä).

Toinen mahdollinen riski injektoitujen solujen leviämisestä silmästä johtuen sidekalvon refluksista IVT:n aikana. Viimeinen riski, joka voidaan ottaa huomioon, on non-Hodgkin-lymfooman kehittyminen luomalla tolerogeeninen ympäristö säätelevien T-solujen vuoksi. Tämä riski on sama kuin nykyiseen uveiitin vertailuhoitoon liittyvä riski: immunosuppressiiviset aineet ja kortikosteroidit. Näitä riskejä ei ole koskaan kuvattu täysin kirjallisuudessa sekä eläimille että ihmisille.

Annostus ja potilaiden lukumäärä. Tregs-annosten kolme tasoa ovat vastaavasti 0,4, 1,2 ja 3,6 miljoonaa. Pienin annos, 0,4 miljoonaa Tregiä, vastaa 2 kertaa tehokkaampaa annosta hiirillä.

Tähän tutkimukseen otetaan mukaan 2–18 potilasta. Rahoitusta myönnetään 12 potilaalle.

Hyvä kliininen käytäntö (GCP) Tutkimus tehdään GCP:n ja voimassa olevan lainsäädännön ja määräysten mukaisesti. Tutkijat vakuuttavat, että tutkimus suoritetaan GCP:n protokollan mukaisesti Bioterapialaitokset suorittavat tuotantotoimintaa, laadunvalvontaa nykyisten soluterapiamääräysten ja soluterapian hyvien käytäntöjen (BPTC) mukaisesti sekä standarditoimintamenettelyjen mukaisesti ( SOP). Tämän esseen toteuttamiseen vaaditaan ANSM:ltä erityinen lupa. Johtopäätöksenä on nyt selvästi osoitettu, että CD4 + CD25 + Foxp3-säätelijöiden (Tregs) soluterapialla on ratkaiseva rooli autoimmuunisairauksien hallinnassa ihmisen tai hiiren kliinisissä testeissä. . Siksi tässä kliinisessä tutkimuksessa arvioidaan toleranssiannoksen vaikutusta potilailla, joita hoidetaan Tregsillä kahdenvälisen vaikean steroidiriippuvaisen ei-tarttuvan uveiitin vuoksi.