조절인자 T 세포의 IVT에 의한 양측 중증 포도막염의 치료: 용량의 내성에 관한 연구 (UVEREG)

포도막염 치료의 병기와 한계 포도막염은 어린이와 젊은 성인의 심각한 시력 상실 또는 심지어 실명의 주요 원인입니다. 거의 1/3의 사례에서 감염원과 관련이 있고, 또 다른 1/3은 (베체트병, 유육종증, 척추관절병증 ...) 또는 눈에 국한된(버드샷형 망막맥락막병증, 교감신경 안염, 특발성 망막혈관염). 마지막 1/3은 특발성으로 남아있어 신중한 병인 연구에도 불구하고 원인이 확인되지 않았습니다. 전신 코르티코스테로이드는 종종 효과적이지만 심각한 부작용이 있고 환자의 순응도가 좋지 않은 경우가 많습니다. 그렇기 때문에 그들은 때때로 눈의 후안부(유리체)에 직접 투여되지만 그 효과는 일시적이고 종종 효과가 없으며 또한 부작용과 관련이 있습니다. 또한 일부는 스테로이드에 의존하여 면역억제제로 치료해야 합니다. 이는 또한 많은 부작용의 원인이 될 수 있으며 항상 효과적인 것은 아닙니다. 이러한 치료적 막다른 상황에서 조사자들은 CD4 + CD25 + Foxp3 조절인자 + (Tregs)를 환자의 유리체에 직접 주사하는 세포 치료 접근법을 제안합니다.

세포 요법에 의한 포도막염에 대한 새로운 치료법 접근 Treg가 자가면역 질환의 제어에 중요한 역할을 한다는 것이 이제 명확하게 확립되었습니다. 인간 또는 마우스에서 Treg의 깊은 결핍은 사망으로 이어지는 매우 심각한 자가면역 증후군과 관련이 있습니다. Treg는 인간에서 보고되었습니다. 또한 우리 그룹과 다른 사람들은 Treg를 마우스에 전달함으로써 다양한 자가 면역 질환을 예방할 수 있음을 보여주었습니다. 따라서 Treg 주입에 의한 세포 치료는 만성 염증 및 자가 면역 질환 치료에 대한 희망을 높입니다. 그러나 다클론성 Treg가 아닌 특이적 Treg만이 전신적으로 투여될 때 강력한 치료 잠재력을 가지고 있습니다. 임상에서 사용할 수 있는 유일한 Treg는 항-CD25 항체가 흡착된 자기 비드에 의해 정제된 다클론성 Treg입니다. 이 기술은 이펙터 T 세포(Teffs), B 림프구 및 NK 세포로 구성된 균형을 50~70%로 Treg가 풍부한 세포 준비를 제공합니다. 특정 Treg의 전신 주입에 대한 치료적 대안은 사전 활성화된 다클론성 Treg를 정제된 임상 등급 조건에서 자가면역 질환의 표적 부위에 직접 주입하는 것입니다.

연구 모집단에 대한 설명. 양측 중증의 스테로이드 의존성 비감염성 포도막염 환자. 감염성 또는 종양성 병인은 시스템의 포괄적인 검토가 완료된 후 제외되었습니다. 모든 환자는 Quantiferon 검사 음성과 정상 Mantoux 검사를 받았습니다. 전문 실험실로 보내는 생물학적 검사는 활동성 감염을 제거합니다. 어떤 경우에는 AC 탭 후 얻은 방수 및/또는 유리체 절제 후 얻은 유리체 생검을 진단 분석 IL-10, 면역 부하 인자 또는 PCR 분석(톡소플라스마증, 헤르페스 바이러스)을 위해 분석합니다.

인간의 포도막염의 병태생리학. IL-6, IFN-g, IL-8 및 MCP-1, 때로는 IL-1β, IL-2 및 TNF-알파와 같은 염증성 케모카인 및 사이토카인이 포도막염 환자의 방수 및 유리체에서 발견되었습니다. 이러한 인간 샘플에서 이용 가능한 작은 부피(약 100ml)를 감안할 때, 데이터는 50μl 부피에서 30개의 서로 다른 사이토카인 및 케모카인의 농도를 측정하기 위해 유세포 분석을 사용하는 다중 검출 기술로 얻습니다.

연구를 다른 사이토카인 및 케모카인으로 확장하기 위해 연구자들은 ""항체 배열""이라는 반정량적 기술을 사용하여 30에서 170개에 이르는 다양한 분자를 분석할 수 있습니다. 일부 환자에서 평가된 이러한 예비 결과는 포도막염을 앓고 있는 환자의 눈에서 Th1 염증 프로필의 존재를 확인하고(표시되지 않음) 우리의 전략을 확인합니다.

주입된 세포와 관련된 위험. 전임상 마우스 모델에서 Treg 주입의 부작용은 관찰되지 않았습니다. 당사의 바이오테라피 시설에서 Treg 생산은 이 에세이에 제공된 대로 표현형 CD4 + Foxp3 + CD25 +로 정의되는 Treg의 50~70%를 포함합니다. 따라서 연구자들은 생쥐의 포도막염 치료 효과에 대한 백혈구 오염 물질의 효과를 테스트했습니다. T 세포, B 세포, NK 세포, 수지상 세포 또는 대식세포와 같은 오염 물질의 존재는 임상적 또는 조직학적 수준에서 눈에 띄는 부작용을 일으키지 않았습니다. 두 번째 잠재적 위험은 주입된 다클론 Treg가 다른 세포 유형으로 분화되었다는 것입니다. 이전 연구에서는 자연 인간 Treg가 IL-2 또는 IL-15의 존재 하에서 Th17 유형 T 림프구로 분화할 수 있음을 보여주었습니다. 이러한 차별화는 IL-1ß, IL-6, IL-21 또는 IL-23의 추가로 강조됩니다. 연구자들은 IVT를 주입한 Treg가 Th17 세포로 분화할 수 있는 가능성을 공식적으로 배제할 수는 없지만, 이 사건은 아마도 포도막염 눈에서 검출되지 않았기 때문입니다(데이터는 표시되지 않음).

IVT 동안 결막에서 역류로 인해 눈에서 주입된 세포의 전파의 또 다른 잠재적 위험. 마지막으로 고려할 수 있는 위험은 조절 T 세포로 인해 관용 환경을 조성하여 비호지킨 림프종으로 발전하는 것입니다. 이 위험은 현재 포도막염의 참조 치료인 면역억제제 및 코르티코스테로이드와 관련된 위험과 동일합니다. 이러한 위험은 동물과 인간 모두에서 문헌에 완전히 설명된 적이 없습니다.

복용량 및 환자 수. Treg 용량의 3단계는 각각 0.4, 1.2 및 3.6백만입니다. 마우스에서 유효 용량의 2배에 해당하는 40만 Treg의 최저 용량.

2명에서 18명의 환자가 이 실험에 등록됩니다. 자금은 12명의 환자에게 제공됩니다.

좋은 임상 실습( GCP) 연구는 GCP 및 현행 입법 및 규정에 따라 수행됩니다. 조사자는 GCP의 프로토콜에 따라 연구가 수행될 것임을 인증합니다. 바이오테라피 시설은 생산 활동, 세포 치료에 대한 현행 규정에 따른 품질 관리, 세포 치료 우수 사례(BPTC) 준수 및 표준 운영 절차에 따라 수행합니다( 예규). 이 에세이의 실현을 위해 ANSM의 특정 승인이 필요합니다. 결론적으로, 이제 CD4 + CD25 + Foxp3 조절인자(Tregs)의 세포 치료 접근법이 인간 또는 마우스 임상 시험에서 자가면역 질환 제어에 중요한 역할을 한다는 것이 명확하게 확립되었습니다. . 따라서 이 임상 시험은 양측 중증 스테로이드 의존성 비감염성 포도막염에 대해 Treg로 치료받은 환자에서 내성 용량의 효과를 평가합니다.