A kétoldali súlyos uveitis kezelése szabályozó T-sejtek IVT-vel: A dózis toleranciájának vizsgálata (UVEREG)

Arzenál és korlátok az uveitis kezelésében Az uveitis a súlyos látásvesztés vagy akár vakság fő oka gyermekeknél és fiatal felnőtteknél. Az esetek csaknem egyharmadában valamilyen fertőző ágenshez köthető, másik harmadában az autoimmun betegségek területére integrálódnak szisztémás entitásokként (Behçet-kór, szarkoidózis, spondyloarthropathia stb.) vagy a szemre korlátozódnak (Birdshot típusú retinochoroidopathia, szimpatikus ophthalmia, idiopátiás retina vasculitis). Az utolsó harmada idiopátiás marad, ahol a gondos etiológiai kutatás ellenére sem azonosítják az okot. A szisztémás kortikoszteroidok gyakran hatásosak, de jelentős mellékhatásaik vannak, és a betegek együttműködése gyakran gyenge. Ezért néha közvetlenül a szem hátsó szegmensébe (üvegtestbe) adják be, de a hatás csak átmeneti, gyakran hatástalan, és mellékhatásokkal is jár. Ezenkívül néhányuk szteroidfüggő, és immunszuppresszív szerekkel történő kezelést igényel; amelyek szintén számos káros hatásért felelősek, és nem mindig hatékonyak. Ezekben a terápiás zsákutcákban a kutatók sejtterápiás megközelítést javasolnak CD4 + CD25 + Foxp3 regulátorok + (Tregs) injekció formájában közvetlenül a betegek üvegtestébe.

Az uveitis új terápiás megközelítése sejtterápiával Mára egyértelműen bebizonyosodott, hogy a Treg-ek kritikus szerepet játszanak az autoimmun betegségek kezelésében. Emberben vagy egérben a Tregs mély hiánya nagyon súlyos autoimmun szindrómával jár, ami halálhoz vezet. Az uveitisben azt is kimutatták, hogy a Treg-ek kontrollálják ezt a betegséget hiányos egerekben. Tregeket jelentettek emberekben. Ezen túlmenően csoportunk és mások kimutatták, hogy különböző autoimmun betegségek megelőzhetők a Treg egerekben történő átvitelével. Így a Treg injekciós sejtterápia reményt kelt a krónikus gyulladásos és autoimmun betegségek kezelésében. Azonban csak a specifikus és nem a poliklonális Treg-eknek van erős terápiás potenciálja szisztémás beadás esetén. A klinikán csak poliklonális Treg-ek használhatók, amelyeket mágneses gyöngyökkel tisztítanak, amelyekhez adszorbeálódnak az anti-CD25 antitestek. Ez a technológia Tregekben 50-70%-ban dúsított sejtkészítményt biztosít, a fennmaradó rész effektor T-sejtekből (Teffs), B-limfocitákból és NK-sejtekből áll. A specifikus Treg-ek szisztémás injekciójának terápiás alternatívája az előaktivált poliklonális Treg-ek közvetlenül az autoimmun betegség célhelyére fecskendezve, tisztított klinikai állapotú állapotban.

A vizsgált populáció leírása. Kétoldali, súlyos szteroidfüggő, nem fertőző uveitisben szenvedő betegek. A fertőző vagy daganatos etiológiákat a rendszerek átfogó felülvizsgálatának befejezése után kizárták. Minden betegnél negatív Quantiferon teszt és normál Mantoux teszt volt. A speciális laboratóriumokba küldött biológiai tesztek megszüntetik az aktív fertőzést. Egyes esetekben az AC tapintás és/vagy a vitrectomia után kapott üvegtest biopszia után kapott vizes humort elemezni kell az IL-10 diagnosztikai vizsgálatához, az immunterhelési faktorhoz vagy a PCR analízishez (toxoplazmózis, herpeszvírusok).

Az uveitis patofiziológiája emberekben. Gyulladásos kemokinek és citokinek, például IL-6, IFN-g, IL-8 és MCP-1, és néha IL-1ß, IL-2 és TNF-alfa is megtalálhatók az uveitisben szenvedő betegek üregében és üvegtestében. Tekintettel az ezekben az emberi mintákban rendelkezésre álló kis térfogatra (körülbelül 100 ml), több kimutatási technikával, áramlási citometriával nyerhetők adatok, harminc különböző citokin és kemokin koncentrációjának mérésére 50 mikroliteres térfogatban.

Annak érdekében, hogy a vizsgálatot más citokinekre és kemokinekre is kiterjesszék, a kutatók egy félkvantitatív technikát is alkalmaztak, az "antitest array"-t, amely lehetővé teszi számos, 30-tól 170-ig terjedő molekula elemzését. Ezek az előzetes eredmények, amelyeket néhány betegnél értékeltek, megerősítik a Th1 gyulladásos profil jelenlétét az uveitisben szenvedő betegek szemében (nincs ábrázolva), és megerősítik stratégiánkat.

Az injektált sejtekkel kapcsolatos kockázatok. Preklinikai egérmodellben a Tregs injekció mellékhatásait nem figyelték meg. Bioterápiás létesítményeinkben a Treg-ek előállítása, amint azt ebben az esszében ismertetjük, 50-70%-ban tartalmazzák a CD4 + Foxp3 + CD25 + fenotípus által meghatározott Tregeket. Ezért a kutatók tesztelték a leukocita szennyeződések hatását az uveitis terápiás hatására egerekben. Az ilyen szennyező anyagok, effektor T-sejtek, B-sejtek, NK-sejtek, dendritikus sejtek vagy makrofágok jelenléte sem klinikai, sem szövettani szinten nem okozott látható mellékhatásokat. A másik lehetséges kockázat az, hogy a beadott poliklonális Treg-ek más sejttípusba differenciálódnak. Az elülső vizsgálat kimutatta, hogy a természetes humán Treg sejtek Th17 típusú T limfocitákká differenciálódhatnak IL-2 vagy IL-15 jelenlétében. Ezt a differenciálódást erősíti az IL-1ß, IL-6, IL-21 vagy IL-23 hozzáadása. Bár a kutatók formálisan nem zárhatják ki annak lehetőségét, hogy a Tregekkel beinjektált IVT Th17 sejtekké differenciálódjon, mivel ezt az eseményt valószínűleg nem mutatták ki az uveitis szemében (az adatokat nem mutatjuk be).

Az injektált sejtek szemből való szétszóródásának egy másik lehetséges kockázata a kötőhártya reflux miatt az IVT során. Az utolsó figyelembe vehető kockázat a non-Hodgkin limfóma kialakulása a szabályozó T-sejtek miatt tolerogén környezet kialakítása révén. Ez a kockázat megegyezik az uveitis jelenlegi referenciakezelésével kapcsolatos kockázattal: immunszuppresszív szerek és kortikoszteroidok. Ezeket a kockázatokat az irodalomban soha nem írták le teljes körűen sem állatokra, sem emberekre vonatkozóan.

Adagolás és a betegek száma. A Tregs dózisok három szintje 0,4, 1,2 és 3,6 millió lesz. A legalacsonyabb, 0,4 millió Treg dózis, amely az egereknél alkalmazott hatékony dózis kétszeresének felel meg.

2-18 beteget vonnak be ebbe a vizsgálatba. A finanszírozás 12 beteg számára biztosított.

Helyes klinikai gyakorlat (GCP) A kutatás a GCP-vel és a hatályos jogszabályokkal és rendeletekkel összhangban történik. A nyomozók tanúsítják, hogy a kutatás a GCP protokollja szerint zajlik. A Bioterápiás létesítmények termelési tevékenységet végeznek, minőségellenőrzést végeznek a jelenlegi sejtterápiás előírásoknak és a sejtterápia (BPTC) jó gyakorlatának, valamint a szabványos működési eljárásoknak megfelelően ( SOP). Ennek az esszének az elkészítéséhez külön engedély szükséges az ANSM-től. Összefoglalva, most már egyértelműen bebizonyosodott, hogy a CD4 + CD25 + Foxp3 szabályozók (Tregek) sejtterápiás megközelítése kritikus szerepet játszik az autoimmun betegségek kontrollálásában emberi vagy egér klinikai tesztekben. . Ezért ez a klinikai vizsgálat értékeli a tolerancia-dózis hatását olyan betegeknél, akiket Tregs-szel kezeltek kétoldali, súlyos szteroidfüggő, nem fertőző uveitis miatt.