Behandlung der bilateralen schweren Uveitis durch IVT von Regulator-T-Zellen: Studie zur Toleranz der Dosis (UVEREG)

Arsenal und Grenzen bei der Behandlung von Uveitis Uveitis ist eine der Hauptursachen für schweren Sehverlust oder sogar Erblindung bei Kindern und jungen Erwachsenen. In fast einem Drittel der Fälle ist sie mit einem Infektionserreger assoziiert, ein weiteres Drittel ist im Bereich der Autoimmunerkrankungen als systemische Entitäten integriert (Morbus Behçet, Sarkoidose, Spondyloarthropathie ...) oder auf das Auge beschränkt (Retinochoroidopathie vom Birdshot-Typ, sympathische Ophthalmie, idiopathische retinale Vaskulitis). Das letzte Drittel bleibt idiopathisch, wo trotz sorgfältiger ätiologischer Forschung keine Ursache identifiziert werden kann. Die systemischen Kortikosteroide sind oft wirksam, haben aber erhebliche Nebenwirkungen und die Patienten-Compliance ist oft schlecht. Deshalb werden sie manchmal direkt in den hinteren Augenabschnitt (Glaskörper) verabreicht, die Wirkung ist jedoch nur vorübergehend, oft wirkungslos und auch mit Nebenwirkungen verbunden. Darüber hinaus sind einige steroidabhängig und erfordern eine Behandlung mit Immunsuppressiva; die auch für viele Nebenwirkungen verantwortlich sein können und nicht immer wirksam sind. In diesen therapeutischen Sackgassen schlagen Forscher einen zelltherapeutischen Ansatz vor, indem CD4 + CD25 + Foxp3-Regulatoren + (Tregs) direkt in den Glaskörper der Patienten injiziert werden.

Ein neuer Therapieansatz Uveitis durch Zelltherapie Es ist nun eindeutig erwiesen, dass Tregs eine entscheidende Rolle bei der Bekämpfung von Autoimmunerkrankungen spielen. Bei Menschen oder Mäusen ist ein tiefes Treg-Defizit mit einem sehr schweren Autoimmunsyndrom verbunden, das zum Tod führt. Bei Uveitis wurde auch gezeigt, dass Tregs diese Krankheit bei defizienten Mäusen kontrollieren. Beim Menschen wurde über Tregs berichtet. Darüber hinaus haben unsere Gruppe und andere gezeigt, dass verschiedene Autoimmunerkrankungen durch die Übertragung von Tregs in Mäusen verhindert werden können . Daher weckt die Zelltherapie durch Injektion von Tregs Hoffnungen für die Behandlung von chronischen Entzündungs- und Autoimmunerkrankungen . Jedoch haben nur spezifische und nicht polyklonale Tregs ein starkes therapeutisches Potential, wenn sie systemisch verabreicht werden. Die einzigen Tregs, die in der Klinik verwendet werden können, sind polyklonale Tregs, die durch magnetische Kügelchen gereinigt wurden, an denen Anti-CD25-Antikörper adsorbiert sind. Diese Technologie liefert ein Zellpräparat, das zu 50 bis 70 % mit Tregs angereichert ist, wobei der Rest aus Effektor-T-Zellen (Teffs), B-Lymphozyten und NK-Zellen besteht. Eine therapeutische Alternative zur systemischen Injektion spezifischer Tregs ist die Injektion von voraktivierten polyklonalen Tregs direkt in den Zielort der Autoimmunerkrankung in gereinigtem, klinischem Zustand.

Beschreibung der Studienpopulation. Patienten mit bilateraler schwerer Steroid-abhängiger nicht-infektiöser Uveitis. Infektiöse oder tumorale Ätiologien wurden nach Abschluss einer umfassenden Überprüfung der Systeme ausgeschlossen. Alle Patienten hatten einen negativen Quantiferon-Test und einen normalen Mantoux-Test. Biologische Tests, die an spezialisierte Labors gesendet werden, beseitigen eine aktive Infektion. In einigen Fällen wird Kammerwasser, das nach AC-Punktion und / oder Glaskörperbiopsie nach Vitrektomie gewonnen wurde, für den diagnostischen Assay IL-10, den Immunlastfaktor oder die PCR-Analyse (Toxoplasmose, Herpesviren) analysiert.

Pathophysiologie der Uveitis beim Menschen. Im Kammerwasser und im Glaskörper von Patienten mit Uveitis wurden entzündliche Chemokine und Zytokine wie IL-6, IFN-g, IL-8 und MCP-1 und manchmal IL-1ß, IL-2 und TNF-alpha gefunden. Angesichts des geringen Volumens, das in diesen menschlichen Proben verfügbar ist (ca. 100 ml), werden Daten mit mehreren Nachweistechniken unter Verwendung von Durchflusszytometrie erhalten, um die Konzentration von dreißig verschiedenen Zytokinen und Chemokinen in einem Volumen von 50 Mikrolitern zu messen.

Um die Studie auf andere Zytokine und Chemokine auszudehnen, verwendeten die Forscher auch eine halbquantitative Technik namens „Antikörper-Array“, die die Analyse einer Reihe verschiedener Moleküle im Bereich von 30 bis 170 ermöglicht. Diese vorläufigen Ergebnisse, die bei einigen Patienten ausgewertet wurden, bestätigen das Vorhandensein eines Th1-Entzündungsprofils im Auge von Patienten, die an Uveitis leiden (nicht gezeigt) und bestätigen unsere Strategie

Risiken im Zusammenhang mit injizierten Zellen. Im präklinischen Mausmodell wurden keine Nebenwirkungen der Tregs-Injektion beobachtet. In unseren Biotherapie-Einrichtungen wird die Produktion von Tregs, wie in diesem Aufsatz beschrieben, 50 bis 70 % Tregs enthalten, die durch den Phänotyp CD4 + Foxp3 + CD25 + definiert sind. Daher testeten die Forscher die Wirkung von Leukozyten-Kontaminanten auf die therapeutische Wirkung bei Uveitis bei Mäusen. Das Vorhandensein solcher Verunreinigungen Effektor-T-Zellen, B-Zellen, NK-Zellen, dendritische Zellen oder Makrophagen verursachte keine sichtbaren Nebenwirkungen auf klinischer oder histologischer Ebene. Ein zweites potenzielles Risiko besteht darin, dass die injizierten polyklonalen Tregs in einen anderen Zelltyp differenziert wurden. Eine anteriore Studie zeigte, dass natürliche humane Tregs in Anwesenheit von IL-2 oder IL-15 zu T-Lymphozyten vom Typ Th17 differenzieren können. Diese Differenzierung wird durch die Zugabe von IL-1ß, IL-6, IL-21 oder IL-23 verstärkt. Obwohl Forscher die Möglichkeit nicht formell ausschließen können, dass Tregs, denen IVT injiziert wurde, zu Th17-Zellen differenzieren können, da dieses Ereignis wahrscheinlich nicht im Uveitis-Auge nachgewiesen wurde (Daten nicht gezeigt).

Ein weiteres potenzielles Risiko der Ausbreitung der injizierten Zellen aus dem Auge aufgrund von Reflux an der Bindehaut während der IVT. Als letztes Risiko kann die Entwicklung eines Non-Hodgkin-Lymphoms durch Schaffung eines tolerogenen Milieus durch regulatorische T-Zellen in Betracht gezogen werden. Dieses Risiko ist identisch mit demjenigen, das mit der derzeitigen Referenzbehandlung der Uveitis verbunden ist: Immunsuppressiva und Kortikosteroide. Diese Risiken wurden in der Literatur weder für Tiere noch für Menschen vollständig beschrieben.

Dosierung und Anzahl der Patienten. Die 3 Stufen der Tregs-Dosen betragen jeweils 0,4, 1,2 und 3,6 Millionen. Die niedrigste Dosis von 0,4 Millionen Tregs entspricht dem Zweifachen der wirksamen Dosis bei Mäusen.

Zwei bis 18 Patienten werden in diese Studie aufgenommen. Gefördert werden 12 Patienten.

Gute klinische Praxis (GCP) Die Forschung wird in Übereinstimmung mit GCP und den aktuellen Gesetzen und Vorschriften durchgeführt. Die Prüfärzte bescheinigen, dass die Forschung in Übereinstimmung mit dem Protokoll von GCP durchgeführt wird. Die Biotherapie-Einrichtungen führen Produktionsaktivitäten, Qualitätskontrollen gemäß den geltenden Vorschriften für die Zelltherapie und die Einhaltung bewährter Praktiken der Zelltherapie (BPTC) sowie gemäß Standardarbeitsanweisungen durch ( SOP). Für die Realisierung dieses Essays ist eine spezifische Autorisierung von ANSM erforderlich. Abschließend lässt sich sagen, dass nun klar nachgewiesen ist, dass der zelltherapeutische Ansatz von CD4 + CD25 + Foxp3-Regulatoren (Tregs) eine entscheidende Rolle bei der Kontrolle von Autoimmunerkrankungen in klinischen Tests an Menschen oder Mäusen spielt . Daher bewertet diese klinische Studie die Wirkung der Tolerance-Dosis von bei Patienten, die mit Tregs wegen bilateraler schwerer steroidabhängiger nicht-infektiöser Uveitis behandelt wurden.