Léčba oboustranné těžké uveitidy IVT regulačních T-buněk: Studie tolerance dávky (UVEREG)

Arzenál a omezení v léčbě uveitidy Uveitida je hlavní příčinou vážné ztráty zraku nebo dokonce slepoty u dětí a mladých dospělých. Téměř v jedné třetině případů je spojena s infekčním agens, další třetina je integrována do oblasti autoimunitních onemocnění jako systémové jednotky včetně (Behçetova choroba, sarkoidóza, spondyloartropatie...) nebo omezené na oko (retinochoroidopatie typu Birdshot, sympatická oftalmie, idiopatická retinální vaskulitida). Poslední třetina zůstává idiopatická, kde přes pečlivý etiologický výzkum není identifikována žádná příčina. Systémové kortikosteroidy jsou často účinné, ale mají významné vedlejší účinky a kompliance pacientů je často špatná. Proto se někdy podávají přímo do zadního segmentu oka (sklivce), ale účinek je pouze dočasný, často neúčinný a spojený i s nežádoucími účinky. Některé jsou navíc závislé na steroidech a vyžadují léčbu imunosupresivy; které také mohou být zodpovědné za mnoho nepříznivých účinků a nejsou vždy účinné. V těchto terapeutických slepých situacích výzkumníci navrhují přístup k buněčné terapii injekcí CD4 + CD25 + Foxp3 regulátorů + (Tregs) přímo do sklivce pacientů.

Nový terapeutický přístup k uveitidě buněčnou terapií Nyní je jasně prokázáno, že Tregs hrají kritickou roli při kontrole autoimunitních onemocnění. U člověka nebo myši je hluboký deficit Tregs spojen s velmi těžkým autoimunitním syndromem, který vede ke smrti. U uveitidy se také ukazuje, že Tregs kontrolují toto onemocnění u myší s deficitem. Tregs byly hlášeny u lidí. Navíc naše skupina a další prokázali, že přenosem Tregs u myší lze předejít různým autoimunitním onemocněním. Buněčná terapie injekcí Tregs tedy vzbuzuje naděje na léčbu chronických zánětlivých a autoimunitních onemocnění. Avšak pouze specifické a nikoli polyklonální Tregs mají silný terapeutický potenciál, jsou-li podávány systémově. Jediné Tregs, které lze použít v klinice, jsou polyklonální Tregs purifikované magnetickými kuličkami, na které jsou adsorbovány protilátky anti-CD25. Tato technologie poskytuje buněčný přípravek obohacený o Tregs na 50 až 70 %, zbytek tvoří efektorové T buňky (Teffs ), B lymfocyty a NK buňky. Terapeutická alternativa k systémové injekci specifických Tregs je injekce předaktivovaných polyklonálních Tregs přímo do cílového místa autoimunitního onemocnění v purifikovaném stavu klinického stupně.

Popis studované populace. Pacienti s bilaterální těžkou neinfekční uveitidou závislou na steroidech. Po dokončení komplexního přehledu systémů byly vyloučeny infekční nebo nádorové etiologie. Všichni pacienti měli negativní test Quantiferon a normální test Mantoux. Biologické testy zaslané do specializovaných laboratoří eliminují aktivní infekci. V některých případech bude komorová voda získaná po AC tap a/nebo biopsii sklivce získané po vitrektomii analyzována pro diagnostický test IL-10, imunitní zátěžový faktor nebo PCR analýzu (toxoplazmóza, herpetické viry).

Patofyziologie uveitidy u lidí. Zánětlivé chemokiny a cytokiny, jako je IL-6, IFN-g, IL-8 a MCP-1 a někdy IL-1ß, IL-2 a TNF-alfa, byly nalezeny v komorové vodě a sklivci pacientů s uveitidou. Vzhledem k malému objemu, který je k dispozici v těchto lidských vzorcích (kolem 100 ml), jsou data získávána více detekčními technikami pomocí průtokové cytometrie pro měření koncentrace třiceti různých cytokinů a chemokinů v objemu 50 mikrol.

Aby se studie rozšířila na další cytokiny a chemokiny, výzkumníci také použili semikvantitativní techniku ​​nazvanou „"pole protilátek"", která umožňuje analýzu řady různých molekul v rozmezí od 30 do 170. Tyto předběžné výsledky, hodnocené u některých pacientů, potvrzují přítomnost zánětlivého profilu Th1 v oku pacientů trpících uveitidou (nezobrazeno) a potvrzují naši strategii

Rizika spojená s injikovanými buňkami. V preklinickém myším modelu nebyly pozorovány žádné vedlejší účinky injekce Tregs. V našich zařízeních Bioterapie bude produkce Tregs, jak je uvedeno v této eseji, obsahovat 50 až 70 % Tregs definovaných fenotypem CD4 + Foxp3 + CD25 +. Výzkumníci proto testovali účinek leukocytárních kontaminantů na terapeutický účinek u uveitidy u myší. Přítomnost takových kontaminantů efektorových T buněk, B buněk, NK buněk, dendritických buněk nebo makrofágů nezpůsobila viditelné vedlejší účinky na klinické nebo histologické úrovni. Druhým potenciálním rizikem je, že injikované polyklonální Tregs byly diferencovány na jiný buněčný typ. Předchozí studie ukázala, že přirozené lidské Tregs se mohou v přítomnosti IL-2 nebo IL-15 diferencovat na lymfocyty Th17 typu T. Tato diferenciace je zdůrazněna přidáním IL-1B, IL-6, IL-21 nebo IL-23. Ačkoli výzkumníci nemohou formálně vyloučit možnost, že se IVT injikovaný Tregs může diferencovat na buňky Th17, protože tato událost pravděpodobně nebyla detekována u uveitidy oka (data nejsou uvedena).

Další potenciální riziko diseminace injikovaných buněk z oka v důsledku refluxu na spojivce během IVT. Posledním rizikem, o kterém lze uvažovat, je vznik non-Hodgkinova lymfomu vytvořením tolerogenního prostředí v důsledku regulačních T buněk. Toto riziko je totožné s rizikem spojeným se současnou referenční léčbou uveitidy: imunosupresiva a kortikosteroidy. Tato rizika nebyla nikdy plně popsána v literatuře jak u zvířat, tak u lidí.

Dávkování a počet pacientů. 3 úrovně dávek Tregs budou 0,4, 1,2 a 3,6 milionu. Nejnižší dávka 0,4 milionu Tregs odpovídající dvojnásobku účinné dávky u myší.

Do této studie bude zařazeno 2 až 18 pacientů. Finanční prostředky jsou poskytovány pro 12 pacientů.

Správná klinická praxe (GCP) Výzkum bude veden v souladu s GCP a aktuální legislativou a nařízením. Vyšetřovatelé potvrzují, že výzkum bude veden v souladu s protokolem GCP Zařízení Bioterapie provádějí výrobní činnosti, kontrolu kvality podle aktuálních předpisů pro buněčnou terapii a dodržování správných postupů buněčné terapie (BPTC) a také podle standardních operačních postupů ( ÚPLATEK). Pro realizaci této eseje je vyžadováno zvláštní povolení od ANSM. Závěrem lze říci, že nyní je jasně prokázáno, že přístup k buněčné terapii regulátorů CD4 + CD25 + Foxp3 (Tregs) hraje klíčovou roli při kontrole autoimunitních onemocnění v klinických testech na lidech nebo myších . Proto tato klinická studie hodnotí účinek dávky Tolerance u pacientů léčených přípravkem Tregs pro bilaterální těžkou neinfekční uveitidu závislou na steroidech.