Behandling af bilateral alvorlig uveitis ved IVT af regulator-T-celler: undersøgelse af dosistolerance (UVEREG)

Arsenal og begrænsninger i behandlingen af ​​uveitis Uveitis er en væsentlig årsag til alvorligt synstab eller endda blindhed hos børn og unge voksne. I næsten en tredjedel af tilfældene er det forbundet med et infektionsstof, en anden tredjedel er integreret inden for autoimmune sygdomme som systemiske enheder, herunder (Behçets sygdom, sarkoidose, spondyloarthropati ...) eller begrænset til øjet (retinochoroidopati af fugleskud, sympatisk oftalmi, idiopatisk retinal vaskulitis). Den sidste tredjedel forbliver idiopatisk, hvor der trods en omhyggelig ætiologisk forskning ikke er identificeret nogen årsag. De systemiske kortikosteroider er ofte effektive, men har betydelige bivirkninger, og patientens compliance er ofte dårlig. Det er grunden til, at de nogle gange administreres direkte i øjets bagerste segment (glaslegemet), men virkningen er kun midlertidig, ofte ineffektiv og også forbundet med bivirkninger. Derudover er nogle steroidafhængige, hvilket kræver behandling med immunsuppressive midler; som også kan være ansvarlig for mange negative virkninger og ikke altid er effektive. I disse terapeutiske blindgyde-situationer foreslår efterforskerne en celleterapiindsprøjtning af CD4 + CD25 + Foxp3-regulatorer + (Tregs) direkte i glaslegemet på patienter.

En ny terapitilgang uveitis ved celleterapi Det er nu klart fastslået, at Tregs spiller en afgørende rolle i kontrollen af ​​autoimmune sygdomme. Hos mennesker eller mus er et dybt underskud i Tregs forbundet med et meget alvorligt autoimmunt syndrom, der fører til døden. Ved uveitis er det også vist, at Tregs kontrollerer denne sygdom hos mus med mangel. Tregs er blevet rapporteret hos mennesker. Derudover har vores gruppe og andre vist, at forskellige autoimmune sygdomme kan forebygges ved overførsel af Tregs i mus. Celleterapi ved injektion af Tregs vækker således håb om behandling af kroniske inflammatoriske og autoimmune sygdomme. Imidlertid har kun specifikke og ikke polyklonale Tregs et stærkt terapeutisk potentiale, når de administreres systemisk. De eneste Tregs, der kan bruges i klinikken, er polyklonale Tregs oprenset af magnetiske perler, hvortil der er adsorberet anti-CD25-antistof. Denne teknologi giver et cellepræparat beriget med Tregs for 50 til 70 %, resten består af effektor-T-celler (Teffs), B-lymfocytter og NK-celler. Et terapeutisk alternativ til den systemiske injektion af specifikke Tregs er at injicere, præaktiverede polyklonale Tregs direkte i målstedet for autoimmun sygdom, i renset klinisk tilstand.

Beskrivelse af undersøgelsespopulationen. Patienter med bilateral svær steroidafhængig ikke-infektiøs uveitis. Infektiøse eller tumorale ætiologier er blevet udelukket efter afslutning af en omfattende gennemgang af systemer. Alle patienter havde en negativ Quantiferon-test og en normal Mantoux-test. Biologiske test sendt til specialiserede laboratorier vil eliminere en aktiv infektion. I nogle tilfælde vil kammervand opnået efter AC tap og/eller glaslegemebiopsi opnået efter vitrektomi blive analyseret for diagnostisk assay IL-10, immunbelastningsfaktor eller PCR-analyse (toksoplasmose, herpesvirus).

Patofysiologi af uveitis hos mennesker. Inflammatoriske kemokiner og cytokiner, såsom IL-6, IFN-g, IL-8 og MCP-1 og nogle gange IL-1ß, IL-2 og TNF-alfa blev fundet i kammervandet og glaslegemet hos patienter med uveitis. I betragtning af det lille volumen, der er tilgængeligt i disse humane prøver (omkring 100 ml), opnås data med flere detektionsteknikker ved hjælp af flowcytometri til måling af koncentrationen af ​​tredive forskellige cytokiner og kemokiner i et 50 mikrol volumen.

For at udvide undersøgelsen til andre cytokiner og kemokiner, brugte efterforskerne også en semikvantitativ teknik kaldet ""antistofarray"", som tillader analyse af en række forskellige molekyler fra 30 til 170. Disse foreløbige resultater, evalueret hos nogle patienter, bekræfter tilstedeværelsen af ​​Th1 inflammatorisk profil i øjet hos patienter, der lider af uveitis (ikke vist) og bekræfter vores strategi

Risici forbundet med injicerede celler. Ingen bivirkninger af Tregs-injektion er blevet observeret i prækliniske musemodeller. I vores bioterapifaciliteter vil produktionen af ​​Tregs, som angivet i dette essay, indeholde 50 til 70 % af Tregs, defineret af fænotypen CD4 + Foxp3 + CD25+. Derfor testede efterforskere virkningen af ​​leukocytkontaminanter på den terapeutiske virkning i uveitis hos mus. Tilstedeværelsen af ​​sådanne kontaminanter effektor-T-celler, B-celler, NK-celler, dendritiske celler eller makrofager forårsagede ikke synlige bivirkninger på det kliniske eller histologiske niveau. En anden potentiel risiko er, at de injicerede polyklonale Tregs er blevet differentieret til en anden celletype. Anterior undersøgelse viste, at naturlige menneskelige Tregs kan differentiere til Th17 type T-lymfocytter i nærvær af IL-2 eller IL-15. Denne differentiering accentueres ved tilsætning af IL-1ß, IL-6, IL-21 eller IL-23. Selvom efterforskere ikke formelt kan udelukke muligheden for, at Tregs-injiceret IVT kan differentiere til Th17-celler, da denne hændelse sandsynligvis ikke er blevet påvist i uveitis øje (data ikke vist).

En anden potentiel risiko for spredning af de injicerede celler fra øjet på grund af refluks ved bindehinden under IVT. Den sidste risiko, der kan overvejes, er udviklingen af ​​non-Hodgkin-lymfom ved at skabe et tolerogent miljø på grund af regulatoriske T-celler. Denne risiko er identisk med den, der er forbundet med den nuværende referencebehandling af uveitis: immunsuppressiva og kortikosteroider. Disse risici er aldrig blevet fuldstændigt beskrevet i litteraturen hos både dyr og mennesker.

Dosering og antal patienter. De 3 niveauer af Tregs-doser vil være henholdsvis 0,4, 1,2 og 3,6 mio. Den laveste dosis på 0,4 millioner Tregs svarende til 2 gange den effektive dosis hos mus.

To til 18 patienter vil blive indskrevet i dette forsøg. Der ydes midler til 12 patienter.

God klinisk praksis (GCP) Forskningen vil blive udført i overensstemmelse med GCP og den nuværende lovgivning og regulering. Efterforskere bekræfter, at forskningen vil blive udført i overensstemmelse med protokollen fra GCP. Biotherapies faciliteter udfører produktionsaktiviteter, kvalitetskontrol i henhold til gældende regler for celleterapi og overholdelse af god praksis for cellulær terapi (BPTC) og også i henhold til standard operationelle procedurer ( SOP). Specifik autorisation er påkrævet fra ANSM til realiseringen af ​​dette essay. Som konklusion er det nu klart fastslået, at celleterapitilgang af CD4 + CD25 + Foxp3 regulatorer (Tregs) spiller en afgørende rolle i kontrollen af ​​autoimmune sygdomme i kliniske tests hos mennesker eller mus. . Derfor vurderer dette kliniske forsøg effekten af ​​Tolerance-dosis hos patienter behandlet af Tregs for bilateral svær steroidafhængig ikke-infektiøs uveitis.