老年居民的口腔卫生护理和微生物区系

伦理声明 本研究经瑞典哥德堡大学伦理委员会批准（许可证号 039/00）。

研究组和对照组 在受试者本人或亲属或监护人给予参与的知情和书面同意后，从两家养老院招募了 68 名受试者。 属于同一机构、具有相同领导的养老院位于城市的同一区域。 该研究小组是从其中一家疗养院招募的，由 21 名女性和 12 名男性组成。 从第二疗养院招募的对照组由 23 名女性和 12 名男性组成。 要被纳入研究，受试者必须拥有至少 10 颗天然牙齿且没有可移动的假牙，并且能够遵循简单的指令，例如张开和闭上嘴巴。 受试者按照他们给予知情同意并满足纳入标准的顺序被纳入研究。 在整个研究期间，两组受试者都有资格按照瑞典法律规定接受受抚养人的牙科护理，包括免费的口腔保健评估、补贴的基本牙科护理以及接受过口腔护理培训的疗养院工作人员卫生保健。

干预 在 12 个月的研究期间，研究组每周一次由两名牙科保健员中的任何一名进行专业口腔护理。 口腔护理在居民的私人房间内进行，参与者坐在他/她自己的椅子上或躺在床上。 治疗包括使用电动牙刷（Oral-B Professional Care 7000）和 1100 ppm 氟化钠牙膏（Zendium Classic，Opus Health Care AB/Zendium）刷牙，在唇侧和舌侧刷牙。 使用牙间刷 (TePe: TePe, Malmö, Sweden) 和牙签 (TePe Birch: TePe, Malmö, Sweden) 进行牙间清洁。 向研究组中能够理解说明的人员提供了口腔卫生程序方面的信息和培训。

在干预开始时，研究组中的每个受试者，以及他们的主要负责护理人员，都收到了一把与两位牙科保健员 (Oral-B Professional Care 7000) 相同类型的电动牙刷，以及使用说明以及如何使用刷子的培训。 在对照组中，口腔保健程序遵循该部门的常规程序。

收集用于微生物分析的临床数据和样本 临床检查、唇小腺唾液分泌率测量和微生物采样在上午 9 点到 12 点之间进行（作者 KL K），并在居民的私人房间进行。 所有微生物取样一式两份，间隔一周。 临床检查在两次重复取样的第一次进行。 依次在四个位点进行牙菌斑登记，然后收集牙龈上牙菌斑用于微生物分析。 选择的位置是右上第一和第二磨牙、左下第一和第二磨牙、右上第二门牙和尖牙以及左下第二门牙和尖牙的邻间。 如果这些牙齿中的一颗或多颗缺失，则选择最近的可用位置。 测量唇小腺唾液分泌率，然后从舌头进行微生物取样，按照该顺序并在登记和取样会议结束时进行。

在研究组和对照组中，在基线和 12 个月研究期结束时收集了临床数据、处方药数据、唇小腺唾液分泌率和微生物样本。 在研究组中，在距基线 3、6 和 9 个月后进行了额外的菌斑登记和取样以进行微生物分析。

临床检查 临床检查是在可调头灯的光照下，使用牙镜和牙科探针进行的。 记录天然牙齿、临床上可见的龋齿病变和牙菌斑的数量。 斑块记录为无可见斑块（0 分）、可见但较薄的斑块（1 分）或可见的厚斑块（2 分）。 计算在选择登记的四个邻间位点记录的斑块分数的平均值。

处方药 处方药数据是从居民的医疗记录中收集的。

唇小腺唾液分泌率 对于唇小腺唾液分泌率的测量，如 Eliasson 等人所述，用化妆棉轻轻擦干下唇粘膜区域。 然后将一块预切好的标准滤纸放在距离粘膜外缘约 3 毫米的中线附近 15 秒。 使用校准的 Periotron®（8000，ProFlow™ Inc.，Amityville，NY，USA）测量滤纸吸收的液体体积。 在每次检查中，从每个受试者收集四个样本并计算个体平均值。

微生物取样和分析 从龈上菌斑和舌背收集微生物样品。 有经验的实验室助理对样本是从哪组受试者、研究或对照组以及从哪个检查场合收集的不知情，分析样本。

使用无菌牙签 (TePe Birch) 收集龈上菌斑样本并合并。 使用无菌镊子、棉球和塑料刮刀收集舌头样本。 将带有直径 1.5 厘米圆孔的抹刀放在背部的背部。 将浸入采样液中的棉球扫过孔内的区域。 将两个样品各自转移到 3.5 ml 运输介质 VMGA III 中并在四小时内处理。

如前所述使用富集血琼脂平板和选择性琼脂平板进行样品分析。 厌氧条件下生长的微生物总数、链球菌总数和比例以及血链球菌/口腔链球菌和唾液链球菌的数量和比例，两者都与良好的口腔健康有关，变形链球菌、乳酸杆菌和放线菌属与龋齿有关, F. nucleatum, 和 P. intermedia/nigrescens，与牙龈炎症相关，P. gingivalis 和 A. actinomycetemcomitans，与牙周炎相关，白色念珠菌，金黄色葡萄球菌和肠杆菌，与粘膜和呼吸道感染相关。 除 A. actinomycetemcomitans 外，所有物种的检测限均为 100 个菌落形成单位，其中检测限为 10 个菌落形成单位。 如果可能的话，微生物的数量是根据它们在平板上的数量计算的，该平板有 30 - 300 个菌落。 计算重复取样结果的平均值。

统计方法为了标准化微生物数据，对数字进行对数转换。 零计数被视为一个菌落形成单位/ml。 计算平均值和中值以及标准偏差。 单因素方差分析用于分析研究组和对照组之间的差异。 采用双因素方差分析对两组内不同时间点的差异进行统计分析。 在 p 值 < 0.05 时，结果被认为具有统计学意义。 由于多重影响方面，孤立的意义应谨慎解释。