多发性硬化症患者血液中调节性B细胞分布分析 (B-MS)

多发性硬化症 (MS) 是一种进行性免疫炎症和中枢神经系统 (CNS) 退行性疾病，是导致年轻人残疾的第二大常见原因。 所涉及的病理生理机制复杂，有效的治疗策略尚未确定。 此外，今天很明显，必须从个性化的角度来执行治疗方法。 在这种情况下，MS 尤其需要评估疾病进程以及预测治疗效果的生物标志物。

最近的数据强调了 B 细胞在 MS 中的直接作用。 如此全面的数据导致了使用生物疗法的新治疗策略，以耗尽或调节外周 B 细胞的功能。 这些方法导致了相互矛盾的功效结果。 今天，尚不清楚 B 细胞是否发挥了减弱的调节作用，或者反而加强了 T 细胞的致病反应。 这种双重特性可能取决于抑制的释放（例如 interleukin-10）或促炎细胞因子（例如 interleukin-6) 和/或与其他细胞（尤其是 T 细胞）的直接相互作用。

研究人员旨在纵向评估 MS 起始阶段外周血 B 细胞亚群 (1) 的定量和功能变化，即 MS 进展期间的放射学孤立综合征 (RIS) 和临床孤立综合征 (CIS) (2) 和 ( 3) 初治患者 MS 的两种临床形式之间：复发缓解型 MS (RRMS) 和原发性进展型 MS (PPMS)。 B 细胞亚群由膜标记物的组合定义，并在全血流式细胞术 (FCM) 分析中的不同时间点（纳入（治疗前）和治疗开始后 3、6、12、24 个月）进行计数。 在患有放射学孤立综合征（RIS，n = 20）和临床孤立综合征（CIS，n = 20），在复发缓解型 MS 患者（RRMS，n = 20）和原发性进行性进展的 MS 患者（PPMS，n = 20）中。 正在从受其他炎症性疾病影响的具有神经系统症状（Devic 综合征、Neurobehcet、神经结节病 n = 20）或没有神经系统症状（系统性硬化症、SSc、n = 20）和献血者（n = 40）的患者中收集对照样本。 为了评估 B 细胞的功能特性，来自每组患者的外周血单核细胞 (PBMC) 用 CD40 配体和 CpG 寡脱氧核苷酸 (CpG ODN) 激活，并在经过 FCM 计数后产生 IL-10 的 B 细胞。与佛波醇肉豆蔻酸酯乙酸盐、离子霉素和布雷菲德菌素 A 作为蛋白质转运抑制剂进行短暂孵育。 在与疾病发作或进展相关的 B 细胞亚群变化具有代表性的选定 CIS 和 MS 患者中，B 细胞亚群将被纯化并用 CD40 配体和 CpG ODN 激活，以与抗 CD3 激活的共培养自体 T 细胞以评估对 T 细胞产生促炎细胞因子（例如 干扰素-γ、IL-17）。

所有表型分析和细胞培养均使用先前验证的方案进行。 我们的最终目标是将构成全身 B 细胞群的亚群的数量和功能变化与 MS 的分级和演变相关联。 这种策略可能会导致确定哪些 MS 患者应该接受针对 B 细胞的治疗以及何时接受治疗。 此外，它可能为替代形式的细胞疗法提供基本原理，这些细胞疗法可以在耗尽策略后引入例如自体纯化的 B 调节细胞。