A szabályozó B-sejtek eloszlásának elemzése sclerosis multiplexben szenvedő betegek vérében (B-MS)

A sclerosis multiplex (MS) a központi idegrendszer (CNS) progresszív immun-gyulladásos és degeneratív betegsége, és a fiatalok rokkantságának második leggyakoribb oka. Az érintett patofiziológiai mechanizmusok összetettek, és a hatékony terápiás stratégiákat még nem határozták meg. Ráadásul ma már nyilvánvaló, hogy a kezelési megközelítéseket személyre szabott szemszögből kell végrehajtani. Ebben az összefüggésben a betegség lefolyását értékelő, de a terápia hatékonyságát előrejelző biomarkerekre különösen nagy szükség van SM-ben.

A legújabb adatok alátámasztják a B-sejtek közvetlen szerepét az SM-ben. Az ilyen átfogó adatok új terápiás stratégiákhoz vezettek, amelyek bioterápiákat alkalmaznak a perifériás B-sejtek funkcióinak kimerítésére vagy modulálására. Az ilyen megközelítések egymásnak ellentmondó eredményekhez vezettek a hatékonyság tekintetében. Ma még mindig nem világos, hogy a B-sejtek csökkent szabályozó hatást fejtenek-e ki, vagy inkább fokozzák a T-sejtek patogén válaszát. Az ilyen kettős tulajdonságok függhetnek a gátló anyagok felszabadulásától (pl. interleukin-10) vagy gyulladást elősegítő citokinek (pl. interleukin-6) és/vagy közvetlen kölcsönhatások más sejtekkel, különösen T-sejtekkel.

A kutatók célja, hogy longitudinálisan értékeljék a perifériás vér B-sejt-alcsoportjainak (1) mennyiségi és funkcionális változásait az SM kezdeti szakaszában, azaz a radiológiailag izolált szindrómában (RIS) és a klinikailag izolált szindrómában (CIS) (2) az SM progressziója során és ( 3) az SM két klinikai formája között naiv kezelt betegeknél: Relapszus-remittens MS (RRMS) és Primer Progressive MS (PPMS). A B-sejt alcsoportokat a membránmarkerek kombinációja határozza meg, és különböző időpontokban (a kezelés előtt) és a kezelés megkezdése után 3, 6, 12, 24 hónapos teljes véráramlási citometriás (FCM) elemzésben felsorolják. Az átmeneti, naiv, memória és marginális zónaszerű B-sejt alcsoportok abszolút számát és relatív arányát prospektíven követik nyomon radiológiailag izolált szindrómában (RIS, n=20), klinikailag izolált szindrómában (CIS, n) szenvedő betegeknél. = 20), a relapszusban remittáló formában (RRMS, n = 20) szenvedő SM-es betegeknél és a betegség elsődleges progresszív evolúciójával rendelkező SM-es betegeknél (PPMS, n = 20). Kontrollmintákat vesznek más, neurológiai tünetekkel járó gyulladásos betegségben (Devic-szindróma, Neurobehcet, neurosarcoidosis n = 20) vagy neurológiai tünetekkel (szisztémás sclerosis, SSc, n = 20) és véradóktól (n = 40) szenvedő betegektől. A B-sejtek funkcionális tulajdonságainak értékelése érdekében a betegek minden csoportjából a perifériás vér mononukleáris sejtjeit (PBMC) aktiválják CD40 ligandummal és CpG oligodezoxinukleotidokkal (CpG ODN), és az IL-10-et termelő B-sejteket az FCM számba veszi, miután rövid inkubáció forbol-mirisztát-acetáttal, ionomicinnel és brefeldin A-val, mint fehérjetranszport-gátló szerrel. Kiválasztott CIS- és MS-betegeknél, akiknél a B-sejt-alpopulációkban a betegség kialakulásával vagy progressziójával kapcsolatos változások reprezentatívak, a B-sejt-alpopulációkat megtisztítják és aktiválják CD40 ligandumokkal és CpG ODN-ekkel, hogy együtt tenyésztsék anti-CD3-aktiválttal. autológ T-sejtek a gyulladást elősegítő citokinek (pl. IFN-gamma, IL-17).

Minden fenotípusos analízist és sejttenyészetet korábban validált protokollok alkalmazásával végeznek. Végső célunk, hogy a szisztémás B-sejtpopulációt alkotó részhalmazok mennyiségi és funkcionális változásait összefüggésbe hozzuk az SM besorolásával és evolúciójával. Egy ilyen stratégia elvezethet annak meghatározásához, hogy mely SM-es betegeknek kell B-sejteket célzó kezelést kapniuk, és mikor. Ezenkívül a sejtterápia alternatív formáinak indoklása lehet, amelyek például autológ tisztított B-szabályozó sejteket vezethetnek be depléciós stratégiák után.