Analyysi säätelevien B-solujen jakautumisesta multippeliskleroosipotilaiden veressä (B-MS)

Multippeliskleroosi (MS) on etenevä immuno-inflammatorinen ja rappeuttava keskushermoston (CNS) sairaus, ja se on toiseksi yleisin nuorten vammaisuuden syy. Mukana olevat patofysiologiset mekanismit ovat monimutkaisia, ja tehokkaita terapeuttisia strategioita ei ole vielä määritelty. Lisäksi nykyään on selvää, että hoitomenetelmät on suoritettava henkilökohtaisesta näkökulmasta. Tässä yhteydessä taudin kulkua arvioivia, mutta myös hoidon tehokkuutta ennustavia biomarkkereita tarvitaan erityisesti MS-tautiin.

Viimeaikaiset tiedot korostavat B-solujen suoraa roolia MS-taudissa. Tällaiset kattavat tiedot ovat johtaneet uusiin terapeuttisiin strategioihin, joissa käytetään bioterapioita perifeeristen B-solujen toimintojen tyhjentämiseksi tai moduloimiseksi. Tällaiset lähestymistavat ovat johtaneet ristiriitaisiin tehokkuuden tuloksiin. Nykyään on edelleen epäselvää, onko B-soluilla heikentynyt säätelyvaikutus vai tehostavatko ne sen sijaan T-solujen patogeenistä vastetta. Tällaiset kaksoisominaisuudet voivat riippua estävien aineiden (esim. interleukiini-10) tai tulehdusta edistävät sytokiinit (esim. interleukiini-6) ja/tai suorat vuorovaikutukset muiden solujen, erityisesti T-solujen, kanssa.

Tutkijat pyrkivät arvioimaan pitkittäin kvantitatiivisia ja toiminnallisia muutoksia perifeerisen veren B-solujen alaryhmissä (1) MS-taudin aloitusvaiheissa, eli radiologisesti eristetty oireyhtymä (RIS) ja kliinisesti eristetty oireyhtymä (CIS) (2) MS-taudin etenemisen aikana ja ( 3) MS:n kahden kliinisen muodon välillä aiemmin hoitamattomilla potilailla: Relapsoiva-remittenttinen MS (RRMS) ja Primary Progressive MS (PPMS). B-solujen alajoukot määritellään kalvomarkkerien yhdistelmällä ja ne luetellaan eri ajankohtina (inkluusio (ennen hoitoa) ja 3, 6, 12, 24 kuukauden kuluttua hoidon aloittamisesta) kokoveren virtaussytometrisessa (FCM) analyysissä. Siirtymävaiheen, naiivien, muistin ja marginaalisen vyöhykkeen kaltaisten B-solujen alaryhmien absoluuttisia määriä ja suhteellisia osuuksia seurataan prospektiivisesti potilailla, joilla on radiologisesti eristetty oireyhtymä (RIS, n = 20) ja kliinisesti eristetty oireyhtymä (CIS, n). = 20), MS-potilailla, joilla on uusiutuva remittoiva muoto (RRMS, n = 20) ja MS-potilailla, joilla taudin primaarinen etenevä kehitys (PPMS, n = 20). Kontrollinäytteitä kerätään potilailta, joilla on muita tulehdussairauksia, joilla on neurologisia oireita (Devicin oireyhtymä, Neurobehcet, neurosarkoidoosi n = 20) tai ilman neurologisia oireita (systeeminen skleroosi, SSc, n = 20) sekä verenluovuttajilta (n = 40). B-solujen toiminnallisten ominaisuuksien arvioimiseksi kunkin potilasryhmän perifeerisen veren mononukleaariset solut (PBMC) aktivoidaan CD40-ligandilla ja CpG-oligodeoksinukleotideillä (CpG ODN:t), ja FCM laskee IL-10:tä tuottavat B-solut. lyhyt inkubaatio forbolimyristaattiasetaatin, ionomysiinin ja brefeldiini A:n kanssa proteiinin kuljetuksen estäjäaineena. Valituilla CIS- ja MS-potilailla, joiden muutokset B-solualapopulaatioissa, jotka liittyvät taudin alkamiseen tai etenemiseen, ovat edustavia, B-solualapopulaatiot puhdistetaan ja aktivoidaan CD40-ligandilla ja CpG-ODN:illä, joita viljellään yhdessä anti-CD3-aktivoitujen kanssa. autologiset T-solut arvioimaan estäviä tai tehostavia vaikutuksia tulehdusta edistävien sytokiinien T-solutuotantoon (esim. IFN-gamma, IL-17).

Kaikki fenotyyppianalyysit ja soluviljelmät suoritetaan käyttäen aiemmin validoituja protokollia. Lopullisena tavoitteemme on korreloida systeemisen B-solupopulaation muodostavien alaryhmien määrälliset ja toiminnalliset muutokset MS-taudin luokittelun ja kehityksen kanssa. Tällainen strategia voisi johtaa sen tunnistamiseen, ketkä MS-potilaat saavat B-soluihin kohdistuvaa hoitoa ja milloin. Lisäksi se voi tarjota perusteita vaihtoehtoisille soluterapiamuodoille, jotka voisivat tuoda esimerkiksi autologisia puhdistettuja B-säätelijäsoluja depletiivisten strategioiden jälkeen.