AgP患者MCP-1和CCR2基因多态性频率及其对基因表达的影响

基因结构的差异或营养/环境因素等非遗传因素可能会改变功能基因产物：在免疫系统中起关键作用的 mRNA/蛋白质。 这可能导致免疫反应缺陷、当前炎症恶化和宿主对炎症性疾病的易感性增加。 单核细胞功能对于使个体易患牙周炎至关重要。 类似地，Garrison 和 Nichols (1989) 报告说，过度炎症的单核细胞表型在牙周破坏中可能是确定性的。 因此，调节在防御系统中具有重要作用的 MCP-1 和 CCR2 表达可能是控制炎症性疾病和牙周炎的关键步骤。

由于牙周病的复杂遗传性质，我们假设 MCP-1 和 CCR2 的基因多态性可能与 AgP 相关，并可能改变功能蛋白的产生，从而可能影响易感性。 因此，本研究的主要目的是评估 MCP-1 及其受体 CCR2 多态性对土耳其个体 AgP 患者的遗传影响，次要结果是 MCP-1 基因型是否影响 PBML 的 mRNA 水平。

在这项横断面病例对照研究中，共招募了来自安纳托利亚内部的 215 名土耳其受试者，包括 108 名侵袭性牙周炎 (AgP) 和 107 名年龄、性别和种族相匹配的牙周健康 (H) 对照。 对照组包括来自牙科学院工作人员和其他科目的牙周健康志愿者。 受试者的诊断建立在临床和放射学检查的基础上。 牙周 H 对照组 (n:107) 的探诊深度 (PD) 小于 3mm，牙龈指数 (GI) 小于 2，并且没有邻面附着丧失的迹象和牙周病史。 AgP 患者 (n:108) 由 1999 年国际牙周病和病症分类世界研讨会诊断。 AgP 组包括被诊断患有局限性 AgP (LAgP) 或全身性 AgP (GAgP) 且其他方面健康的个体。 牙周附着缺失≥4 mm，不涉及超过两颗恒牙，第一磨牙和切牙除外，被诊断为 LAgP (n: 43)；除第一磨牙和门牙外，至少有三颗牙齿受累且附着缺失≥4 mm 的患者被诊断为 GAgP (n: 65) 从每位受试者的外周血样本中分离基因组 DNA。 MCP-1 -2518 A/G 和 CCR2 -190 G/A 的基因多态性通过标准聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 (PCR-RFLP) 测定法进行分析。 通过定量实时 PCR 对来自 25 个 AgP 和 15 个牙周 H 对照的外周血白细胞的基因表达水平进行量化。 从基于 SYBR Green 检测的 RT-PCR 分析获得的阈值循环 (Ct) 值和数据通过 ΔC t 归一化。

样本大小由研究前的功效分析决定。 根据这个;等位基因频率的预期差异为 20%，功效为 80%，以及 % 95 置信区间 据计算，每组至少需要 102 名患者，显着性水平为 0.05。 ( ⃰ G. 功率：3.1.2)。 比较H组和AgP组的数值特征时，非参数Mann-Whitney U检验；在 H、LAgP 和 GAgP 组之间，然后计算 Kruskal Wallis 和 Bonferroni 校正。

通过使用卡方检验，基于 MCP-1 -2518 和 CCR2 -190 的基因型分布，在 H 和 AgP 组中评估了与 Hardy-Weinberg 平衡的偏差。 卡方检验还检测了组间基因型和等位基因频率的差异。 我们使用独立样本 t 检验来比较各组之间的基因表达水平，并使用一种方差分析方法基于对数转换数据确定 MCP-1 -2518 基因型对基因表达的影响。 显着性水平为 P = 0.05。