Frekvens av MCP-1 og CCR2 genpolymorfismer og dens effekt på genekspresjon hos pasienter med AgP

Forskjeller i strukturen til genet eller ikke-genetiske faktorer som ernæring/miljøfaktorer kan endre funksjonelt genprodukt: mRNA/protein som spiller avgjørende roller i immunsystemet. Dette kan føre til utvikling av defekte immunresponser, forverring av nåværende betennelse og økt vertsfølsomhet for inflammatoriske sykdommer. Monocyttfunksjoner kan være kritiske med hensyn til å få individer som er mottakelige for periodontitt. Tilsvarende rapporterte Garrison og Nichols (1989) at hyperinflammatorisk monocyttfenotype kan være deterministisk i periodontal ødeleggelse. Av denne grunn kan regulering av MCP-1- og CCR2-ekspresjon, som har en viktig rolle i forsvarssystemet, være et avgjørende skritt for å håndtere inflammatoriske sykdommer så vel som periodontitt.

På grunn av kompleks genetisk natur av periodontal sykdom, antok vi at genpolymorfismer av MCP-1 og CCR2 kunne være assosiert med AgP og kunne endre produksjonen av funksjonelle proteiner, som et resultat kan påvirke følsomheten. Derfor var hovedmålet med denne studien å estimere genetisk påvirkning av MCP-1 og dens reseptor CCR2 polymorfismer på AgP-pasienter blant tyrkiske individer, og sekundært utfall var om MCP-1 genotype påvirker mRNA-nivåer av PBML.

Totalt 215 tyrkiske forsøkspersoner fra indre Anatolia, inkludert 108 Aggressiv periodontitt (AgP) og 107 alders-, kjønns- og etnisk matchede periodontalt sunne (H) kontroller ble rekruttert i denne tverrsnitts-casekontrollstudien. Kontrollgruppen inkluderte periodontalt friske frivillige fra ansatte og andre fag som refererte til Tannlegeskolen. Diagnosen av forsøkspersoner ble etablert på grunnlag av klinisk og radiografisk undersøkelse. Periodontalt H-kontrollgruppe (n:107) hadde <3 mm sonderingsdybde (PD), <2 gingival indeks (GI) og ingen tegn på tap av interproksimalt feste og en historie med periodontal sykdom. Pasienter med AgP (n:108) ble diagnostisert av 1999 International World Workshop for a Classification of Periodontal Diseases and Conditions. AgP-gruppen inkluderte individer diagnostisert med lokalisert AgP (LAgP) eller generalisert AgP (GAgP) som ellers var friske. Periodontalt festetap ≥4 mm som ikke involverer mer enn to permanente tenner, bortsett fra de første molarene og fortennene ble diagnostisert med LAgP (n: 43); Pasienter med involvering av minst tre tenner, bortsett fra de første jekslene og fortennene med et festetap ≥4 mm, ble diagnostisert med GAgP (n: 65). Genomisk DNA ble isolert fra en perifer blodprøve hentet fra hvert individ. Genpolymorfismer av MCP-1 -2518 A/G og CCR2 -190 G/A ble analysert ved en standard polymerasekjedereaksjon-restriksjonsfragmentlengde polymorfisme (PCR-RFLP) analyse. Genekspresjonsnivåer ble kvantifisert i perifere blodleukocytter fra 25 AgP og 15 periodontale H-kontroller ved kvantitativ sanntids-PCR. Terskelsyklusverdier (Ct) oppnådd fra RT-PCR-analysen basert på SYBR Green-deteksjon og data ble normalisert via ΔCt.

Prøvestørrelsen ble bestemt ved kraftanalyse før studien. I følge dette; en forventet forskjell på 20 % i allelfrekvenser med 80 % kraft, og % 95 konfidensintervall ble det beregnet at minimum 102 pasienter var nødvendig i hver gruppe med et signifikansnivå på 0,05. ( ⃰ G. Effekt: 3.1.2). Ved sammenligning av de numeriske egenskapene mellom H- og AgP-grupper, ikke-parametrisk Mann-Whitney U-test; mellom H-, LAgP- og GAgP-gruppene ble Kruskal Wallis med Bonferroni-korreksjon beregnet.

Avvik fra Hardy-Weinberg-likevekt ble vurdert i H- og AgP-gruppene basert på genotypefordeling for MCP-1 -2518 og CCR2 -190 ved å bruke en kjikvadrattest. Forskjellene i genotype og allelfrekvenser mellom grupper ble også oppdaget ved kjikvadrattesten. Vi brukte uavhengige prøver t-test for sammenligning av genekspresjonsnivåer mellom grupper og en måte ANOVA ble brukt for å bestemme effekten av MCP-1 -2518 genotype på genuttrykk, basert på log-transformerte data. Signifikansnivået var P = 0,05.