Частота полиморфизмов генов MCP-1 и CCR2 и их влияние на экспрессию генов у пациентов с AgP

Различия в структуре генов или негенетические факторы, такие как питание/факторы окружающей среды, могут изменить функциональный генный продукт: мРНК/белок, которые играют решающую роль в иммунной системе. Это может привести к развитию дефектных иммунных реакций, обострению текущего воспаления и повышенной восприимчивости хозяина к воспалительным заболеваниям. Функции моноцитов могут иметь решающее значение в отношении восприимчивости людей к пародонтиту. Точно так же Garrison и Nichols (1989) сообщили, что гипервоспалительный фенотип моноцитов может быть детерминированным при деструкции периодонта. По этой причине регуляция экспрессии MCP-1 и CCR2, которые играют важную роль в системе защиты, может быть важным шагом для лечения воспалительных заболеваний, а также пародонтита.

Из-за сложной генетической природы заболеваний пародонта мы предположили, что полиморфизмы генов MCP-1 и CCR2 могут быть связаны с AgP и могут изменять продукцию функциональных белков, что в результате может влиять на восприимчивость. Таким образом, основной целью этого исследования было оценить генетическое влияние полиморфизма MCP-1 и его рецептора CCR2 на пациентов с AgP среди турецких лиц, а вторичным результатом было то, влияет ли генотип MCP-1 на уровни мРНК PBML.

В общей сложности 215 турецких субъектов из внутренней Анатолии, в том числе 108 пациентов с агрессивным пародонтитом (AgP) и 107 человек из контрольной группы, соответствующих возрасту, полу и этнической принадлежности пародонта, здоровых (H), были набраны в этом перекрестном исследовании случай-контроль. В контрольную группу вошли здоровые пародонтологи добровольцы из числа сотрудников и других субъектов, относящихся к Школе стоматологии. Диагноз испытуемым устанавливали на основании клинического и рентгенологического обследования. Контрольная группа пародонта H (n:107) имела глубину зондирования (PD) <3 мм, индекс десны <2 (GI) и отсутствие признаков потери интерпроксимального прикрепления и заболеваний пародонта в анамнезе. Пациенты с AgP (n: 108) были диагностированы на Международном всемирном семинаре 1999 г. по классификации заболеваний и состояний пародонта. Группа AgP включала людей с диагнозом локализованный AgP (LAgP) или генерализованный AgP (GAgP), которые в остальном были здоровы. Потеря пародонтального прикрепления ≥4 мм, не затрагивающая более двух постоянных зубов, за исключением первых моляров и резцов, была диагностирована с LAgP (n: 43); у пациентов с поражением не менее трех зубов, кроме первых моляров и резцов с потерей прикрепления ≥4 мм, был диагностирован GAgP (n: 65). Геномная ДНК была выделена из образца периферической крови, полученного от каждого субъекта. Генные полиморфизмы MCP-1-2518 A/G и CCR2-190 G/A анализировали с помощью стандартного анализа полиморфизма длины рестрикционных фрагментов полимеразной цепной реакции (ПЦР-ПДРФ). Уровни экспрессии генов были количественно определены в лейкоцитах периферической крови от 25 AgP и 15 контрольных пародонтальных H с помощью количественной ПЦР в реальном времени. Значения пороговых циклов (Ct), полученные из анализа RT-PCR на основе обнаружения SYBR Green, и данные были нормализованы через ΔC t .

Размер выборки определялся анализом мощности перед исследованием. Согласно этому; ожидаемая разница в частотах аллелей 20% с мощностью 80% и доверительным интервалом 95%. Было рассчитано, что минимум 102 пациента необходимы в каждой группе с уровнем значимости 0,05. (⃰ Г. Мощность: 3.1.2). При сравнении числовых характеристик между группами H и AgP используется непараметрический U-критерий Манна-Уитни; между группами H, LAgP и GAgP, затем рассчитывали Крускала-Уоллиса с поправкой Бонферрони.

Отклонения от равновесия Харди-Вайнберга оценивали в группах H и AgP на основе распределения генотипов для MCP-1-2518 и CCR2-190 с использованием критерия хи-квадрат. Различия в частотах генотипов и аллелей между группами также выявляли с помощью критерия хи-квадрат. Мы использовали t-критерий независимых выборок для сравнения уровней экспрессии генов между группами, и один из способов ANOVA был использован для определения влияния генотипа MCP-1-2518 на экспрессию генов на основе логарифмически преобразованных данных. Уровень значимости Р = 0,05.