MCP-1- ja CCR2-geenipolymorfismien esiintymistiheys ja sen vaikutus geenien ilmentymiseen potilailla, joilla on AgP

Erot geenien rakenteessa tai ei-geneettiset tekijät, kuten ravitsemus/ympäristötekijät, voivat muuttaa toiminnallista geenituotetta: mRNA:ta/proteiinia, jolla on ratkaiseva rooli immuunijärjestelmässä. Tämä voi johtaa puutteellisten immuunivasteiden kehittymiseen, nykyisen tulehduksen pahenemiseen ja isännän lisääntyneeseen herkkyyteen tulehdustaudeille. Monosyyttien toiminnot voivat olla kriittisiä pyrittäessä saamaan yksilöt alttiiksi parodontiittille. Samalla tavalla Garrison ja Nichols (1989) raportoivat, että hyperinflammatorinen monosyyttifenotyyppi voi olla deterministinen periodontaalin tuhoutumisessa. Tästä syystä MCP-1:n ja CCR2:n ilmentymisen säätely, joilla on olennainen rooli puolustusjärjestelmässä, voi olla ratkaiseva askel tulehdussairauksien ja parodontiitin hoidossa.

Parodontiittisairauden monimutkaisen geneettisen luonteen vuoksi oletimme, että MCP-1:n ja CCR2:n geenipolymorfismit voivat liittyä AgP:hen ja voivat muuttaa toiminnallisten proteiinien tuotantoa, minkä seurauksena voisi vaikuttaa herkkyyteen. Siksi tämän tutkimuksen ensisijaisena tavoitteena oli arvioida MCP-1:n ja sen reseptorin CCR2-polymorfismien geneettistä vaikutusta AgP-potilaisiin turkkilaisten yksilöiden keskuudessa, ja toissijainen tulos oli, vaikuttaako MCP-1 genotyyppi PBML:n mRNA-tasoihin.

Kaikkiaan 215 turkkilaista koehenkilöä sisä-Anatoliasta, mukaan lukien 108 aggressiivista parodontiittia (AgP) ja 107 ikää, sukupuolta ja etnisesti vastaavaa periodontaalisesti tervettä (H) verrokkia, otettiin mukaan tähän poikkileikkaustapauskontrollitutkimukseen. Kontrolliryhmään kuului hammaslääketieteen korkeakouluun viittaavia parodontologisesti terveitä vapaaehtoisia henkilökunnasta ja muista koehenkilöistä. Koehenkilöiden diagnoosi määritettiin kliinisen ja röntgentutkimuksen perusteella. Parodontaalisen H-kontrolliryhmän (n: 107) mittaussyvyys (PD) oli <3 mm, ienindeksi (GI) <2, eikä merkkejä interproksimaalisen kiinnittymisen katoamisesta ja parodontaalisairaudesta. Potilaat, joilla oli AgP (n:108), diagnosoitiin vuoden 1999 kansainvälisessä parodontaalisairauksien ja -tilojen luokittelua käsittelevässä työpajassa. AgP-ryhmään kuului henkilöitä, joilla oli diagnosoitu paikallinen AgP (LAgP) tai yleinen AgP (GAgP), jotka olivat muuten terveitä. Parodontaalin kiinnittymisen menetys ≥ 4 mm, ei enempää kuin kaksi pysyvää hammasta, lukuun ottamatta ensimmäisiä poskihampaat ja etuhampaat, joilla diagnosoitiin LAgP (n: 43); potilailla, joilla oli ainakin kolme hammasta, paitsi ensimmäiset poskihampaat ja etuhampaat, joiden kiinnittymisen menetys oli ≥4 mm, diagnosoitiin GAgP (n: 65). Genominen DNA eristettiin jokaiselta koehenkilöltä otetun perifeerisen veren näytteestä. MCP-1-2518 A/G:n ja CCR2-190 G/A:n geenipolymorfismit analysoitiin standardinmukaisella polymeraasiketjureaktio-fragmentin pituuspolymorfismi (PCR-RFLP) -määrityksellä. Geenien ilmentymistasot määritettiin perifeerisen veren leukosyyteissä 25 AgP:stä ja 15 periodontaalisesta H-kontrollista kvantitatiivisella reaaliaikaisella PCR:llä. Kynnysjaksojen (Ct) arvot, jotka saatiin SYBR Green -detektioon perustuvasta RT-PCR-analyysistä, ja tiedot normalisoitiin ΔCt:n avulla.

Näytteen koko määritettiin tehoanalyysillä ennen tutkimusta. Tämän perusteella; odotettu ero alleelifrekvenssissä 20 % 80 % teholla ja % 95 luottamusvälillä laskettiin, että kussakin ryhmässä tarvittiin vähintään 102 potilasta merkitsevyystasolla 0,05. (⃰ G. Teho: 3.1.2). Kun verrataan H- ja AgP-ryhmien numeerisia ominaisuuksia, ei-parametrinen Mann-Whitney U -testi; H-, LAgP- ja GAgP-ryhmien välillä laskettiin sitten Kruskal Wallis Bonferroni-korjauksella.

Poikkeamat Hardy-Weinberg-tasapainosta arvioitiin H- ja AgP-ryhmissä MCP-1 -2518:n ja CCR2 -190:n genotyyppijakauman perusteella käyttämällä chi-neliötestiä. Erot genotyypin ja alleelien esiintymistiheydissä ryhmien välillä havaittiin myös khin neliötestillä. Käytimme riippumattomien näytteiden t-testiä geenien ilmentymistasojen vertailuun ryhmien välillä ja yksi tapa ANOVA:a käytettiin määrittämään MCP-1 -2518-genotyypin vaikutus geenin ilmentymiseen log-transformoitujen tietojen perusteella. Merkitystaso oli P = 0,05.