Fréquence des polymorphismes des gènes MCP-1 et CCR2 et son effet sur l'expression des gènes chez les patients atteints d'AgP

Les différences dans la structure des gènes ou des facteurs non génétiques tels que les facteurs nutritionnels/environnementaux peuvent altérer le produit génique fonctionnel : ARNm/protéine qui jouent un rôle crucial dans le système immunitaire. Cela peut entraîner le développement de réponses immunitaires défectueuses, l'exacerbation de l'inflammation actuelle et une sensibilité accrue de l'hôte aux maladies inflammatoires. Les fonctions des monocytes peuvent être essentielles pour rendre les individus sensibles à la parodontite. De même, Garrison et Nichols (1989) ont rapporté que le phénotype des monocytes hyper-inflammatoires peut être déterminant dans la destruction parodontale. Pour cette raison, la régulation de l'expression de MCP-1 et CCR2, qui ont un rôle essentiel dans le système de défense, peut être une étape cruciale pour la gestion des maladies inflammatoires ainsi que de la parodontite.

En raison de la nature génétique complexe de la maladie parodontale, nous avons émis l'hypothèse que les polymorphismes des gènes MCP-1 et CCR2 pourraient être associés à AgP et pourraient altérer la production de protéines fonctionnelles, ce qui pourrait influencer la susceptibilité. Par conséquent, l'objectif principal de cette étude était d'estimer l'impact génétique de MCP-1 et de ses polymorphismes du récepteur CCR2 sur les patients AgP chez les individus turcs et le résultat secondaire était de savoir si le génotype MCP-1 avait un effet sur les niveaux d'ARNm de PBML.

Un total de 215 sujets turcs d'Anatolie intérieure, dont 108 parodontites agressives (AgP) et 107 témoins en bonne santé parodontale (H) appariés selon l'âge, le sexe et l'ethnie, ont été recrutés dans cette étude cas-témoins transversale. Le groupe témoin comprenait des volontaires en bonne santé parodontale du personnel et d'autres sujets se référant à l'École de médecine dentaire. Le diagnostic des sujets a été établi sur la base de l'examen clinique et radiographique. Le groupe témoin H parodontal (n : 107) avait une profondeur de sondage (PD) < 3 mm, un index gingival (IG) < 2 et aucun signe de perte d'attache interproximale et des antécédents de maladie parodontale. Les patients atteints d'AgP (n : 108) ont été diagnostiqués par l'Atelier mondial international de 1999 pour une classification des maladies et affections parodontales. Le groupe AgP comprenait des personnes diagnostiquées avec AgP localisée (LAgP) ou AgP généralisée (GAgP) qui étaient par ailleurs en bonne santé. Une perte d'attache parodontale ≥ 4 mm n'impliquant pas plus de deux dents permanentes, autres que les premières molaires et incisives, a été diagnostiquée avec LAgP (n : 43) ; les patients présentant une atteinte d'au moins trois dents, autres que les premières molaires et les incisives avec une perte d'attache ≥ 4 mm, ont reçu un diagnostic de GAgP (n : 65). L'ADN génomique a été isolé à partir d'un échantillon de sang périphérique prélevé sur chaque sujet. Les polymorphismes géniques de MCP-1 -2518 A/G et CCR2 -190 G/A ont été analysés par un essai standard de réaction en chaîne par polymérase-polymorphisme de longueur de fragment de restriction (PCR-RFLP). Les niveaux d'expression génique ont été quantifiés dans les leucocytes du sang périphérique à partir de 25 contrôles AgP et 15 contrôles H parodontaux par PCR quantitative en temps réel. Les valeurs de cycles de seuil (Ct) obtenues à partir de l'analyse RT-PCR basée sur la détection de SYBR Green et les données ont été normalisées via ΔC t .

La taille de l'échantillon a été déterminée par analyse de puissance avant l'étude. Selon ce; une différence attendue de 20 % dans les fréquences alléliques avec une puissance de 80 % et un intervalle de confiance de 95 %, il a été calculé qu'un minimum de 102 patients était nécessaire dans chaque groupe avec un niveau de signification de 0,05. ( ⃰ G.Puissance : 3.1.2). Lors de la comparaison des caractéristiques numériques entre les groupes H et AgP, test non paramétrique de Mann-Whitney U ; entre les groupes H, LAgP et GAgP, puis Kruskal Wallis avec correction de Bonferroni ont été calculés.

Les écarts par rapport à l'équilibre de Hardy-Weinberg ont été évalués dans les groupes H et AgP sur la base de la distribution des génotypes pour MCP-1 -2518 et CCR2 -190 en utilisant un test du chi carré. Les différences de fréquence des génotypes et des allèles entre les groupes ont également été détectées par le test du chi carré. Nous avons utilisé un test t d'échantillons indépendants pour comparer les niveaux d'expression génique entre les groupes et une méthode ANOVA a été utilisée pour déterminer l'effet du génotype MCP-1 -2518 sur l'expression génique, sur la base de données transformées en log. Le niveau de signification était P = 0,05.