Frekvens av MCP-1 och CCR2 genpolymorfismer och dess effekt på genuttryck hos patienter med AgP

Skillnader i struktur av gen eller icke-genetiska faktorer såsom näring/miljöfaktorer kan förändra funktionell genprodukt: mRNA/protein som spelar avgörande roller i immunsystemet. Detta kan leda till utveckling av defekta immunsvar, exacerbation av nuvarande inflammation och ökad värdmottaglighet för inflammatoriska sjukdomar. Monocytfunktioner kan vara avgörande för att få individer mottagliga för parodontit. På liknande sätt rapporterade Garrison och Nichols (1989) att hyperinflammatorisk monocytfenotyp kan vara deterministisk vid periodontal destruktion. Av denna anledning kan reglering av MCP-1- och CCR2-uttryck, som har en viktig roll i försvarssystemet, vara ett avgörande steg för att hantera inflammatoriska sjukdomar såväl som parodontit.

På grund av den komplexa genetiska naturen av parodontit sjukdom antog vi att genpolymorfismer av MCP-1 och CCR2 kunde associeras med AgP och kunde förändra produktionen av funktionella proteiner, som ett resultat kan påverka känsligheten. Därför var det primära syftet med denna studie att uppskatta genetisk påverkan av MCP-1 och dess receptor CCR2-polymorfismer på AgP-patienter bland turkiska individer och sekundärt resultat var om MCP-1 genotyp påverkar mRNA-nivåer av PBML.

Totalt 215 turkiska försökspersoner från inre Anatolien inklusive 108 Aggressiv parodontit (AgP) och 107 ålders-, köns- och etniskt matchade parodontalt friska (H) kontroller rekryterades i denna tvärsnittsfallskontrollstudie. Kontrollgruppen inkluderade parodontalt friska frivilliga från personal och andra ämnen som hänvisade till Tandläkarhögskolan. Diagnosen av försökspersoner fastställdes på grundval av klinisk och röntgenundersökning. Periodontalt H-kontrollgrupp (n:107) hade <3 mm sonderingsdjup (PD), <2 gingivalindex (GI) och inga tecken på interproximal anknytningsförlust och en historia av periodontal sjukdom. Patienter med AgP (n:108) diagnostiserades av 1999 års internationella världsverkstad för en klassificering av periodontala sjukdomar och tillstånd. AgP-gruppen inkluderade individer med diagnosen lokaliserad AgP (LAgP) eller generaliserad AgP (GAgP) som annars var friska. Parodontal fästförlust ≥4 mm som inte involverade mer än två permanenta tänder, förutom de första molarerna och framtänderna diagnostiserades med LAgP (n: 43); patienter med involvering av minst tre tänder, förutom de första molarerna och framtänderna med en fästförlust ≥4 mm, diagnostiserades med GAgP (n: 65). Genomiskt DNA isolerades från ett perifert blodprov från varje individ. Genpolymorfismer av MCP-1 -2518 A/G och CCR2 -190 G/A analyserades med en standardanalys av polymeraskedjereaktion-restriktionsfragmentlängdpolymorfism (PCR-RFLP). Genuttrycksnivåer kvantifierades i perifera blodleukocyter från 25 AgP och 15 periodontala H-kontroller genom kvantitativ realtids-PCR. Tröskelcykelvärden (Ct) erhållna från RT-PCR-analysen baserad på SYBR Green-detektion och data normaliserades via ACt.

Provstorleken bestämdes genom effektanalys före studien. Enligt det här; en förväntad skillnad på 20 % i allelfrekvenser med 80 % kraft och % 95 konfidensintervall beräknades att minst 102 patienter var nödvändiga i varje grupp med en signifikansnivå på 0,05. ( ⃰ G. Effekt: 3.1.2). När man jämför de numeriska egenskaperna mellan H- och AgP-grupper, icke-parametriskt Mann-Whitney U-test; mellan H-, LAgP- och GAgP-grupperna beräknades Kruskal Wallis med Bonferroni-korrigering.

Avvikelser från Hardy-Weinberg-jämvikten bedömdes i H- och AgP-grupperna baserat på genotypfördelning för MCP-1 -2518 och CCR2 -190 genom att använda ett chi-kvadrattest. Skillnaderna i genotyp och allelfrekvenser mellan grupperna upptäcktes också med chi-kvadrattestet. Vi använde oberoende prover t-test för jämförelse av genuttrycksnivåer mellan grupper och ett sätt ANOVA användes för att bestämma effekten av MCP-1 -2518 genotyp på genuttryck, baserat på log-transformerade data. Signifikansnivån var P = 0,05.