Häufigkeit von MCP-1- und CCR2-Genpolymorphismen und ihre Auswirkung auf die Genexpression bei Patienten mit AgP

Unterschiede in der Struktur von Genen oder nicht genetischen Faktoren wie Ernährung/Umweltfaktoren können das funktionelle Genprodukt (mRNA/Protein) verändern, das eine entscheidende Rolle im Immunsystem spielt. Dies kann zur Entwicklung fehlerhafter Immunantworten, einer Verschlimmerung der aktuellen Entzündung und einer erhöhten Anfälligkeit des Wirts für entzündliche Erkrankungen führen. Monozytenfunktionen können entscheidend sein, wenn es darum geht, Menschen anfällig für Parodontitis zu machen. In ähnlicher Weise berichteten Garrison und Nichols (1989), dass der hyperinflammatorische Monozyten-Phänotyp für die parodontale Zerstörung von entscheidender Bedeutung sein kann. Aus diesem Grund kann die Regulierung der MCP-1- und CCR2-Expression, die eine wesentliche Rolle im Abwehrsystem spielen, ein entscheidender Schritt bei der Behandlung von entzündlichen Erkrankungen und Parodontitis sein.

Aufgrund der komplexen genetischen Natur parodontaler Erkrankungen stellten wir die Hypothese auf, dass die Genpolymorphismen von MCP-1 und CCR2 mit AgP assoziiert sein könnten und die Produktion funktioneller Proteine ​​verändern und dadurch die Anfälligkeit beeinflussen könnten. Daher bestand das Hauptziel dieser Studie darin, den genetischen Einfluss von MCP-1 und seinen Rezeptor-CCR2-Polymorphismen auf AgP-Patienten bei türkischen Personen abzuschätzen. Das sekundäre Ergebnis bestand darin, ob der MCP-1-Genotyp die mRNA-Spiegel von PBML beeinflusst.

In dieser Querschnitts-Fallkontrollstudie wurden insgesamt 215 türkische Probanden aus dem Inneren Anatoliens rekrutiert, darunter 108 Personen mit aggressiver Parodontitis (AgP) und 107 alters-, geschlechts- und ethnisch übereinstimmende parodontalgesunde (H) Personen. Die Kontrollgruppe umfasste parodontal gesunde Freiwillige aus dem Personal und anderen Probanden der School of Dentistry. Die Diagnose der Probanden wurde auf der Grundlage klinischer und radiologischer Untersuchungen gestellt. Die parodontale H-Kontrollgruppe (n: 107) hatte eine Sondierungstiefe (PD) von <3 mm, einen Gingivaindex (GI) von <2 und keine Anzeichen eines interproximalen Attachmentverlusts sowie eine Vorgeschichte von Parodontalerkrankungen. Patienten mit AgP (n: 108) wurden 1999 beim International World Workshop for a Classification of Parodontal Diseases and Conditions diagnostiziert. Die AgP-Gruppe umfasste Personen, bei denen lokalisiertes AgP (LAgP) oder generalisiertes AgP (GAgP) diagnostiziert wurde und die ansonsten gesund waren. Bei einem parodontalen Attachmentverlust von ≥ 4 mm, der nicht mehr als zwei bleibende Zähne mit Ausnahme der ersten Molaren und Schneidezähne betraf, wurde LAgP diagnostiziert (n: 43); Bei Patienten mit Beteiligung von mindestens drei Zähnen außer den ersten Molaren und Schneidezähnen und einem Attachmentverlust von ≥ 4 mm wurde GAgP diagnostiziert (n: 65). Genomische DNA wurde aus einer peripheren Blutprobe jedes Probanden isoliert. Die Genpolymorphismen von MCP-1 -2518 A/G und CCR2 -190 G/A wurden durch einen standardmäßigen PCR-RFLP-Assay (Polymerasekettenreaktion-Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus) analysiert. Die Genexpressionsniveaus wurden in peripheren Blutleukozyten von 25 AgP- und 15 parodontalen H-Kontrollen durch quantitative Echtzeit-PCR quantifiziert. Die Werte der Schwellenzyklen (Ct), die aus der RT-PCR-Analyse basierend auf dem SYBR Green-Nachweis erhalten wurden, und die Daten wurden über ΔC t normalisiert.

Die Probengröße wurde vor der Studie durch Leistungsanalyse bestimmt. Demzufolge; Bei einem erwarteten Unterschied von 20 % bei den Allelhäufigkeiten mit einer Trennschärfe von 80 % und einem Konfidenzintervall von % 95 wurde berechnet, dass in jeder Gruppe mindestens 102 Patienten mit einem Signifikanzniveau von 0,05 erforderlich waren. ( ⃰ G. Leistung: 3.1.2). Beim Vergleich der numerischen Merkmale zwischen H- und AgP-Gruppen wird der nichtparametrische Mann-Whitney-U-Test verwendet. zwischen H-, LAgP- und GAgP-Gruppen wurde dann Kruskal Wallis mit Bonferroni-Korrektur berechnet.

Abweichungen vom Hardy-Weinberg-Gleichgewicht wurden in den H- und AgP-Gruppen anhand der Genotypverteilung für MCP-1-2518 und CCR2-190 mithilfe eines Chi-Quadrat-Tests bewertet. Die Unterschiede im Genotyp und in der Allelhäufigkeit zwischen den Gruppen wurden auch durch den Chi-Quadrat-Test festgestellt. Wir verwendeten den T-Test unabhängiger Proben zum Vergleich der Genexpressionsniveaus zwischen den Gruppen und eine Einweg-ANOVA wurde verwendet, um die Auswirkung des MCP-1-2518-Genotyps auf die Genexpression auf der Grundlage logarithmisch transformierter Daten zu bestimmen. Das Signifikanzniveau betrug P = 0,05.