Frecuencia de los polimorfismos de los genes MCP-1 y CCR2 y su efecto sobre la expresión génica en pacientes con AgP

Las diferencias en la estructura del gen o los factores no genéticos, como la nutrición o los factores ambientales, pueden alterar el producto génico funcional: ARNm/proteína que desempeña un papel crucial en el sistema inmunitario. Esto puede provocar el desarrollo de respuestas inmunitarias defectuosas, la exacerbación de la inflamación actual y una mayor susceptibilidad del huésped a las enfermedades inflamatorias. Las funciones de los monocitos pueden ser críticas para que las personas sean susceptibles a la periodontitis. De manera similar, Garrison y Nichols (1989) informaron que el fenotipo de monocitos hiperinflamatorios puede ser determinante en la destrucción periodontal. Por esta razón, la regulación de la expresión de MCP-1 y CCR2, que tienen un papel esencial en el sistema de defensa, puede ser un paso crucial para el manejo de enfermedades inflamatorias y periodontitis.

Debido a la compleja naturaleza genética de la enfermedad periodontal, planteamos la hipótesis de que los polimorfismos genéticos de MCP-1 y CCR2 podrían estar asociados con AgP y podrían alterar la producción de proteínas funcionales, por lo que podrían influir en la susceptibilidad. Por lo tanto, el objetivo principal de este estudio fue estimar el impacto genético de MCP-1 y los polimorfismos de su receptor CCR2 en pacientes con AgP entre individuos turcos y el resultado secundario fue si el genotipo de MCP-1 afecta los niveles de ARNm de PBML.

En este estudio transversal de casos y controles se reclutaron un total de 215 sujetos turcos del interior de Anatolia, incluidos 108 periodontitis agresiva (AgP) y 107 controles periodontalmente sanos (H) emparejados por edad, sexo y etnia. El grupo control incluyó voluntarios sanos periodontalmente del personal y otros sujetos referentes a la Facultad de Odontología. El diagnóstico de los sujetos se estableció sobre la base del examen clínico y radiográfico. El grupo de control periodontalmente H (n: 107) tenía una profundidad de sondaje (PD) <3 mm, un índice gingival (GI) <2 y sin signos de pérdida de inserción interproximal ni antecedentes de enfermedad periodontal. Los pacientes con AgP (n: 108) fueron diagnosticados por el Taller Mundial Internacional de 1999 para una Clasificación de Enfermedades y Condiciones Periodontales. El grupo AgP incluyó a personas diagnosticadas con AgP localizada (LAgP) o AgP generalizada (GAgP) que por lo demás estaban sanas. La pérdida de inserción periodontal ≥4 mm que no afectaba a más de dos dientes permanentes, además de los primeros molares e incisivos, se diagnosticó con LAgP (n: 43); los pacientes con afectación de al menos tres dientes, distintos de los primeros molares e incisivos con una pérdida de inserción ≥4 mm fueron diagnosticados con GAgP (n: 65) El ADN genómico se aisló de una muestra de sangre periférica obtenida de cada sujeto. Los polimorfismos génicos de MCP-1 -2518 A/G y CCR2 -190 G/A se analizaron mediante un ensayo de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción de reacción en cadena de polimerasa estándar (PCR-RFLP). Los niveles de expresión génica se cuantificaron en leucocitos de sangre periférica de 25 AgP y 15 controles periodontales H mediante PCR cuantitativa en tiempo real. Los valores de los ciclos de umbral (Ct) obtenidos del análisis de RT-PCR basado en la detección de SYBR Green y los datos se normalizaron a través de ΔC t.

El tamaño de la muestra se determinó mediante análisis de potencia antes del estudio. De acuerdo a esto; una diferencia esperada del 20% en las frecuencias alélicas con una potencia del 80% y un intervalo de confianza del 95% se calculó que eran necesarios un mínimo de 102 pacientes en cada grupo con un nivel de significación de 0,05. ( ⃰ G. Potencia: 3.1.2). Al comparar las características numéricas entre los grupos H y AgP, se utilizó la prueba no paramétrica U de Mann-Whitney; entre los grupos H, LAgP y GAgP, luego se calcularon Kruskal Wallis con corrección de Bonferroni.

Las desviaciones del equilibrio de Hardy-Weinberg se evaluaron en los grupos H y AgP en función de la distribución del genotipo para MCP-1 -2518 y CCR2 -190 mediante una prueba de chi-cuadrado. Las diferencias en las frecuencias de genotipos y alelos entre los grupos también se detectaron mediante la prueba de chi-cuadrado. Usamos la prueba t de muestras independientes para comparar los niveles de expresión génica entre grupos y se usó ANOVA de una vía para determinar el efecto del genotipo MCP-1 -2518 en la expresión génica, según los datos transformados logarítmicamente. El nivel de significación fue P = 0,05.