Hyppighed af MCP-1- og CCR2-genpolymorfier og dens effekt på genekspression hos patienter med AgP

Forskelle i struktur af gen eller ikke-genetiske faktorer såsom ernæring/miljøfaktorer kan ændre funktionelt genprodukt: mRNA/protein, som spiller en afgørende rolle i immunsystemet. Dette kan føre til udvikling af defekte immunresponser, forværring af nuværende inflammation og øget værtsfølsomhed over for inflammatoriske sygdomme. Monocytfunktioner kan være kritiske med hensyn til at få individer modtagelige for paradentose. Tilsvarende rapporterede Garrison og Nichols (1989), at hyperinflammatorisk monocyt-fænotype kan være deterministisk i periodontal ødelæggelse. Af denne grund kan regulering af MCP-1- og CCR2-ekspression, som har en væsentlig rolle i forsvarssystemet, være et afgørende skridt til at håndtere inflammatoriske sygdomme såvel som parodontitis.

På grund af kompleks genetisk karakter af periodontal sygdom antog vi, at genpolymorfismer af MCP-1 og CCR2 kunne være forbundet med AgP og kunne ændre produktionen af ​​funktionelle proteiner, som et resultat kunne påvirke modtageligheden. Derfor var det primære formål med denne undersøgelse at estimere den genetiske indvirkning af MCP-1 og dets receptor CCR2 polymorfismer på AgP-patienter blandt tyrkiske individer, og det sekundære resultat var, om MCP-1 genotype påvirker mRNA-niveauer af PBML.

I alt 215 tyrkiske forsøgspersoner fra indre Anatolien inklusive 108 Aggressiv parodontitis (AgP) og 107 alders-, køn og etnisk matchede parodontalt sunde (H) kontroller blev rekrutteret i dette tværsnits-casekontrolstudie. Kontrolgruppen omfattede parodontalt raske frivillige fra personale og andre fag med henvisning til Tandlægeskolen. Diagnosen af ​​forsøgspersoner blev etableret på grundlag af klinisk og radiografisk undersøgelse. Periodontalt H-kontrolgruppe (n:107) havde <3 mm sonderingsdybde (PD), <2 gingivalindeks (GI) og ingen tegn på interproksimalt tilknytningstab og en historie med periodontal sygdom. Patienter med AgP (n:108) blev diagnosticeret af 1999 International World Workshop for a Classification of Periodontal Diseases and Conditions. AgP-gruppen inkluderede individer diagnosticeret med lokaliseret AgP (LAgP) eller generaliseret AgP (GAgP), som ellers var raske. Periodontalt tilknytningstab ≥4 mm, der ikke involverede mere end to permanente tænder, bortset fra de første kindtænder og fortænder blev diagnosticeret med LAgP (n: 43); patienter med involvering af mindst tre tænder, bortset fra de første kindtænder og fortænder med et vedhæftningstab ≥4 mm, blev diagnosticeret med GAgP (n: 65). Genomisk DNA blev isoleret fra en perifer blodprøve opnået fra hvert individ. Genpolymorfismer af MCP-1 -2518 A/G og CCR2 -190 G/A blev analyseret ved en standard polymerasekædereaktion-restriktionsfragmentlængde polymorfi (PCR-RFLP) assay. Genekspressionsniveauer blev kvantificeret i perifere blodleukocytter fra 25 AgP og 15 periodontale H-kontroller ved kvantitativ realtids-PCR. Tærskelcyklusser (Ct)-værdier opnået fra RT-PCR-analysen baseret på SYBR Green-detektion og data blev normaliseret via ACt.

Prøvestørrelse blev bestemt ved effektanalyse før undersøgelse. Ifølge denne; en forventet forskel på 20 % i allelfrekvenser med 80 % power og % 95 konfidensinterval blev det beregnet, at minimum 102 patienter var nødvendige i hver gruppe med et signifikansniveau på 0,05. ( ⃰ G. Effekt: 3.1.2). Ved sammenligning af de numeriske karakteristika mellem H- og AgP-grupper, ikke-parametrisk Mann-Whitney U-test; mellem H-, LAgP- og GAgP-grupperne blev Kruskal Wallis med Bonferroni-korrektion beregnet.

Afvigelser fra Hardy-Weinberg-ligevægt blev vurderet i H- og AgP-grupperne baseret på genotypefordeling for MCP-1 -2518 og CCR2 -190 ved at bruge en chi-kvadrattest. Forskellene i genotype og allelfrekvenser mellem grupper blev også påvist ved chi-kvadrat-testen. Vi brugte uafhængige prøver t-test til sammenligning af genekspressionsniveauer mellem grupper og en måde ANOVA blev brugt til at bestemme effekten af ​​MCP-1 -2518 genotypen på genekspression, baseret på log-transformerede data. Signifikansniveauet var P = 0,05.