一项测试 FLU-v 疫苗的随机、双盲、安慰剂对照的 IIb 期试验

理由：目前的季节性流感疫苗主要诱导针对病毒膜糖蛋白的免疫反应。 然而，这些蛋白质通过称为抗原漂移的过程经历连续突变。 为了防止免疫逃逸，采用了每年用最新预测的病毒株接种疫苗。 这种疫苗接种策略不仅带来不便和成本低效，而且当接种的菌株与实际流行的菌株不匹配时，还会导致保护效果差。 后一点在大流行爆发期间尤其令人担忧，当时大片地理区域受到影响，并且由于抗原转移，一般人群对新重新分类的病毒株是天真的。

目的：评估针对健康成人甲型和乙型流感病毒保守免疫原性区域的流感疫苗（FLU-v，作为悬浮液或佐剂乳剂）的安全性和免疫原性，特别是显示 42 岁时的 TH1 细胞因子反应第一次注射后 180 天，佐剂 FLU-v 和无佐剂 FLU-v 比安慰剂大。

研究设计：共招募 222 名研究参与者。 该研究遵循析因设计，其中两个因素是治疗（FLU-v/安慰剂）和制剂（无佐剂/悬浮液、佐剂/乳剂）。 受试者将被随机分为两个阶层（18 至 40 岁，41 至 60 岁）接受以下治疗方案之一：

• 第 1 组 (n=74)：第 0 天和第 21 天 FLU-v（无佐剂）悬浮于 pH 中性 HCl/NaOH (0.5mL) 中
• 第 2 组 (n=74)：第 0 天用注射用水 (WFI) 乳化 (0.5mL) ISA-51 佐剂 FLU-v，第 21 天用生理盐水 (0.5mL)
• 第 3 组 (n=37)：第 0 天和第 21 天生理盐水 (0.5mL)
• 第 4 组 (n=37)：第 0 天使用注射用水和 ISA-51 乳液 (0.5mL)，第 21 天使用生理盐水 (0.5mL)

每次给药都是皮下给药。 在第 42 天之前，将通过 AE 问卷/日记卡收集主动和主动提供的不良事件 (AE)。 将在整个研究期间收集不良事件 (AE) 和严重不良事件 (SAE)。 这些治疗将于 2016 年第三季度开始实施，以便为 2016 年 12 月开始的下一个流感季节提供保护。 将在第 0 天（FLU-v 疫苗接种前）、第 42 天（第二次给药后 21 天）和第 180 天（第二次给药后 159 天）采集所有受试者的血样，以评估 FLU-v 特异性细胞和体液免疫反应。 将在随后的流感季节（2016 年 12 月至 2017 年 3 月）记录确定严重程度的临床症状评分和 RT-PCR 确认的甲型和/或乙型流感感染的发生率，以确定受试疫苗的临床疗效。

研究人群：18-60岁的健康志愿者。 干预：FLU-v 研究性流感疫苗冻干产品含有 500 微克总肽，在 0.01M HCl（0.25ml）和 0.01M NaOH（0.25ml）中重构以达到 0.5ml 的体积，或在 WFI（注射用水）中乳化, 0.25ml) 和 ISA-51 (0.25ml) 以达到 0.5ml 的体积。

主要研究参数/终点： 对于免疫原性：比较 FLU-v 疫苗接种后 42 天和 180 天所有组中细胞免疫反应（特别是 TH1 细胞因子）治疗之间相对于基线（第 0 天）的变化。 为安全起见：(1) 评估研究疫苗 (FLU-v) 最后一次给药后 21 天内所有受试者的征集 AE； (2) 评估首次 FLU-v 给药后整个研究期间所有受试者的主动 AE 和 SAE。

次要研究参数/终点：评估所有组在接种 FLU-v 疫苗后 42 天和 180 天时对 FLU-v 和 TH2 细胞因子的特异性体液免疫反应。

探索性研究参数/终点： 对于免疫原性：在 FLU-v 疫苗接种后第 42 天和第 180 天，基于额外的 CMI 测定（例如 ELISPOT（酶联免疫点））评估细胞免疫反应相对于基线的变化，在一个子集中随机选择的科目。

临床疗效：(1) 评估 FLU-v 疫苗在 2016-2017 流感季节期间降低所有受试者经 RT-PCR 证实的甲型和/或乙型流感感染发病率的疗效。 (2) 评估 FLU-v 疫苗在 2016-2017 流感季节期间 RT-PCR 确诊的甲型和/或乙型流感感染病例症状评分降低的功效。 如果可能，将探讨功效与细胞和体液反应之间的关系。

先前接种流感疫苗对 FLU-v 免疫原性的影响将在根据过去 24 个月或更长时间接触流感疫苗对数据进行分层后的事后探索性分析中进行评估。

与参与、利益和群体相关性相关的负担和风险的性质和程度：

IMP 的预期应用是作为预防性疫苗，通过诱导增强的流感特异性免疫反应来预防流感病毒感染。 FLU-v 疫苗设计为以天然微粒悬浮液（即 无佐剂）或在佐剂中乳化。 颗粒状和乳化的蛋白质制剂优先被吞噬细胞（例如，吞噬细胞）吸收。 树突状细胞）负责诱导初级免疫反应。

FLU-v 最多四剂 263 μg/次或最多两剂 553 μg/次，有或没有佐剂，在动物中耐受性良好，没有全身毒性迹象。 在临床前研究中，ISA 51 的皮下给药没有导致全身毒性。 在注射部位和偶尔在邻近组织中，注射的物质仍然被轻微的慢性炎症反应所包围。 由于 IMP 以冻干形式提供（500 μg 组合肽），用于悬浮在密封的一次性小瓶中，因此极不可能出现过量。

在一项针对 FLU-v 的安全性、耐受性和免疫原性的单中心、随机、双盲 I 期研究中，在该临床试验中向受试者施用的剂量（250 μg 和 500 μg FLU-v）未发现安全性或耐受性问题研究，并且在向受试者施用佐剂后未发现安全性或耐受性问题 (1)。 FLU-v 候选疫苗被证明在人体中具有免疫原性，如通过离体 γ-干扰素产生所测量的 (1)。

Montanide ISA 51 的临床经验可以追溯到 1990 年代，大多数试验都与癌症和获得性免疫缺陷综合症（AIDS）有关。 目前，黑色素瘤、结直肠癌、前列腺癌、宫颈癌、脑癌和白血病的癌症试验正在进行中。 接种频率常在2-4周之间，注射次数可达40次。 免疫途径通常是皮下注射，注射量可达 3 毫升。 最常见的局部反应是注射部位的局部疼痛、压痛、红斑和肉芽肿。 不太常见的是，描述了轻度至中度的短暂性硬结和肿胀。 一般反应主要是寒战、发热、头痛等“流感样症状”。 还观察到嗜睡和恶心。 强度通常是轻度或中度。 通常没有观察到生物学变化。 由于安慰剂疫苗是在密封的一次性小瓶中提供的，因此服用过量的可能性很小（流感病毒 (FLU-v) 疫苗调查员手册，2.0 版，2015 年 9 月 7 日）。