阴性腹腔镜阑尾切除术和正常腹腔镜检查的解释

目的 该研究的目的是调查哪些传染病可能模仿急性阑尾炎的症状，达到一定程度，从而导致诊断性腹腔镜检查或腹腔镜阑尾切除术。

主要结果 耶尔森氏菌属发病率的比较。 （小肠结肠炎和/或假结核）感染通过直肠拭子的 PCR 诊断为两组：组织病理学证实有炎症的患者（阑尾炎组）和具有以下情况之一的患者：组织病理学正常的无炎症阑尾、肠系膜淋巴结炎或正常诊断腹腔镜检查（正常阑尾组）。

次要结果 比较其他微生物的发生率：弯曲杆菌属、沙门氏菌属、志贺氏菌属和气单胞菌属。 通过直肠拭子 PCR 发现两组：正常阑尾与阑尾炎组。

耶尔森氏菌呈阳性的患者。 将在两组的亚组中单独评估：阑尾炎组和正常阑尾组。 如果资金到位，将对耶尔森氏菌进行血清学调查。

比较两组组织病理学检查蛲虫的发生率。

设计一项前瞻性、观察性队列研究。 试验参与者纳入标准

• ≥18岁
• 怀疑急性阑尾炎并计划进行诊断性腹腔镜检查
• 书面和口头信息后的书面知情同意 排除标准
• 无法理解、阅读或说丹麦语
• 已知患有炎症性肠病
• 除阑尾炎外需要其他手术干预或治疗的其他腹腔内病理（围手术期、术前 CT 扫描或手术后不久的组织病理学检查诊断）
• 未接受诊断性腹腔镜检查、腹腔镜阑尾切除术或开腹阑尾切除术
• 纳入前两周内使用抗菌药物直至因急性腹痛实际入院

试用课程 患者因疑似急性阑尾炎被收入 Herlev 医院外科。 该部门的外科医生将计划进行急性手术或让患者接受进一步观察。 试验的研究者或研究助理将接近这些患者，提供有关该研究的信息。 因此，研究人员确保患者在这种急性环境中有尽可能多的时间进行考虑。 符合纳入标准但不符合任何排除标准（除了那些只能在手术时或手术后明确的标准）的患者在知情同意后被纳入试验。 入组患者的基线特征，包括他们的病史、旅行史和胃肠道症状，将登记在 RedCAP 的电子病例报告表 (eCRF) 中。 手术前收集血样和直肠拭子。 患者参与试验的记录将添加到患者的医疗记录中。 包括的患者将接受根据标准临床实践进行的诊断性腹腔镜检查。 如果在手术过程中切除了阑尾，术后将采集切除的阑尾拭子。 仅当切除的阑尾外观不怀疑恶性疾病时才会收集阑尾拭子 (SOP_Appendixpodning)。 这与 Herlev 医院病理科达成一致，不影响组织病理学检查，并防止恶性细胞在罕见的阑尾肿瘤病例中扩散。 如果对阑尾的外观有任何疑问，则不会收集拭子。 手术后十天将根据病理报告对患者的医疗记录进行跟进。 这些结果记录在患者的 eCRF 中。

退出和退出标准 参与者可以在试验期间的任何时候撤回他们的同意。 如果参与者撤回同意，收集的血样、直肠拭子和可能的阑尾拭子将被销毁。 当手术的最终记录和病理报告都可用时，参与者在手术后十天结束了试验。 在手术期间或手术后不久满足任何关于其他腹腔内病理学、需要其他治疗的病症或未接受计划手术的排除标准的患者将退出研究，因此将被排除在研究和采集的血液之外样本、直肠拭子和可能的阑尾拭子将被销毁。 当进行了 10 天的术后随访时，参与者结束了研究。

主要结果

主要结果将基于两种方法的累积结果：

• 检测耶尔森氏菌感染。 （小肠结肠炎和/或假结核）通过直肠拭子的微生物学调查：手术前收集的标本（直肠拭子）立即冷冻在 -80°C 并储存在 Herlev 医院的研究生物库中。 当最后一名患者结束试验时，从每位患者身上收集的一小部分标本被送到 Hvidovre 医院临床微生物学系，然后用实时 PCR 对耶尔森氏菌属进行调查。 这些结果会记录在患者的 eCRF 中，但不会记录在患者的病历中。 具有阳性 PCR 结果的样品将被培养用于耶尔森氏菌属。 如果培养结果呈阳性，将进行药敏试验（次要结果）。 此后，收集的人体材料和培养的小肠结肠炎耶尔森菌将在-80°C 下冷冻，并在 Hvidovre 医院储存十年，作为未来研究的生物库。

次要结果

• 小肠结肠炎耶尔森氏菌血清学：如果获得足够的资金，该结果将在计划的出版物中报告，否则将在以后的出版物中介绍。 手术前采集的 6 毫升血液立即冷冻在 -80°C，并储存在 Herlev 医院的研究生物库中。 当最后一名患者结束试验后，每位患者的血清学血液样本将被送往 Statens Serum Institut。 在这里，血液样本在到达后会尽快进行调查，并通过内部 ELISA 检测小肠结肠炎耶尔森氏菌 IgM、IgA 和 IgG。 分析完成后，血清样本将在-80°C 下冷冻，并在 Statens Serum Institut 保存十年，作为未来研究的生物样本库。 此后，样本将被匿名化并转移到属于 Statens Serum Institut 的生物样本库以供未来研究之用。

• 其他细菌病原体的检测：手术前收集的标本（直肠拭子）立即冷冻在 -80°C，并储存在 Herlev 医院的研究生物库中。 当最后一名患者结束试验时，从每位患者身上收集的一小部分标本被送到 Hvidovre 医院临床微生物学系，然后通过多重实时 PCR 对以下方面进行调查：

  • 弯曲杆菌属
  • 沙门氏菌属
  • 志贺氏菌属
  • 气单胞菌属 细菌病原体 PCR 结果呈阳性的样本将被培养（包括耶尔森氏菌属），如果培养呈阳性，将进行药敏试验。 此后，收集的人体材料和培养的细菌将在-80°C 下冷冻并作为研究生物库在该地点储存十年，此后样本将被匿名化。
• 耶尔森氏菌属血清学和 PCR 的综合结果：见上文描述。 只有在获得资金的情况下才会报告这一结果。
• 保留血浆和全血供以后分析。 每位患者将采集 12 毫升血液：6 毫升将用于制作 EDTA 血浆样本和血沉棕黄层，6 毫升将作为血清样本储存。 采集的样本将建立研究生物样本库，在-80℃冷冻保存十年。 此后血浆和全血样品被销毁。 在开始进一步调查之前，将联系当地健康研究伦理委员会（丹麦首都地区）关于使用该研究生物库的问题。 将征求参与者的同意，特别是关于生物样本库的生物材料以供未来研究之用。
• 来自直肠拭子的标本和来自阑尾拭子的标本的剩余部分被储存以供以后分析。 收集到的样本将在海莱乌医院建立研究生物样本库，在-80℃冷冻保存十年。 此后，标本被销毁。 在开始进一步调查之前，将就研究生物样本库的使用联系当地健康研究伦理委员会（丹麦首都地区）。 将征求参与者的同意，特别是关于生物样本库的生物材料以供未来研究之用。

统计如果呈正态分布，则连续数值数据将报告为平均值和标准偏差。 如果不是正态分布，连续的数值数据将报告为中位数和百分位数。 调查人员将根据数据的分布使用参数统计和非参数统计分析数据。 p 值 <0.05 被认为是重要的。

功率计算如下。 耶尔森氏菌属的比率。阑尾炎组预计为 13%。 这些组的大小预计是不相等的。 大约 80% 的纳入患者属于阑尾炎组，20% 属于正常阑尾组。

当 alfa 设置为 0.05，beta 设置为 0.80，组间最不感兴趣的差异设置为 20% 时，总共需要 225 名患者：正常阑尾组 45 名患者和阑尾炎组 180 名患者。