Förklaringar till negativa laparoskopiska appendektomier och normala laparoskopier

Syfte Syftet med studien är att undersöka vilka infektionssjukdomar som kan efterlikna symtomen vid akut blindtarmsinflammation i en grad som orsakar en diagnostisk laparoskopi eller laparoskopisk blindtarmsinflammation.

Primärt utfall En jämförelse av förekomsten av Yersinia spp. (enterocolitica och/eller pseudotuberculosis) infektion diagnostiserad med PCR på rektala pinnprover i de två grupperna: patienter med histopatologisk bekräftad inflammation (appendicitgrupp) och patienter med något av följande: en histopatologisk normal blindtarm utan inflammation, mesenterisk lymfadenit eller en normal diagnostik laparoskopi (normal blindtarmsgrupp).

Sekundära utfall En jämförelse av förekomsten av andra mikrober: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. och Aeromonas spp. hittas genom PCR av rektala pinnprover i de två grupperna: normal blindtarm kontra blindtarmsinflammation.

Patienter positiva för Yersinia spp. kommer att utvärderas individuellt i undergrupper av de två grupperna: blindtarmsinflammation och normal blindtarmsgrupp. Serologisk undersökning för Yersinia kommer att genomföras om finansiering uppnås.

En jämförelse av förekomsten av Enterobius vermicularis som hittades i den histopatologiska undersökningen i de två grupperna.

Design En prospektiv, observerande kohortstudie. Försöksdeltagare Inklusionskriterier

• ≥18 år gammal
• Misstanke om akut blindtarmsinflammation och planerad för diagnostisk laparoskopi
• Skriftligt informerat samtycke efter skriftlig och muntlig information Uteslutningskriterier
• Kan inte förstå, läsa eller tala danska
• Känd med inflammatorisk tarmsjukdom
• Annan intraabdominal patologi än blindtarmsinflammation som kräver annan kirurgisk ingrepp eller behandling (diagnostiseras antingen perioperativt, vid en preoperativ CT-skanning eller kort efter operationen i den histopatologiska undersökningen)
• Genomgår inte diagnostisk laparoskopi, laparoskopisk appendektomi eller öppen blindtarmsoperation
• Användning av antimikrobiella medel inom två veckor före inkludering fram till faktisk inläggning för akut buksmärta

Provförlopp Patienter tas in på Kirurgiska avdelningen, Herlev sjukhus, med misstänkt akut blindtarmsinflammation. En kirurg från avdelningen kommer antingen att planera för en akut operation eller behålla patienter för vidare observation. Utredarna av försöket eller forskningsassistenter kommer att kontakta dessa patienter för att ge information om studien. Därmed säkerställer utredarna att patienten får så mycket tid som möjligt för övervägande i denna akuta miljö. Patienter, som uppfyller inklusionskriterierna och inget av uteslutningskriterierna (förutom de kriterier som endast kan klargöras vid eller efter operation), inkluderas i prövningen efter informerat samtycke. Baslinjeegenskaper för de inskrivna patienterna inklusive deras sjukdomshistoria, resehistorik och gastrointestinala symtom kommer att registreras i de elektroniska fallrapportformulären (eCRF) i RedCAP. Blodprover och en ändtarmspinn tas före operationen. En anteckning om patientens inkludering i prövningen kommer att läggas till patientens journal. Inkluderade patienter kommer att genomgå en diagnostisk laparoskopi utförd i enlighet med standard klinisk praxis. Om blindtarmen avlägsnas under operationen kommer en pinne från den borttagna blindtarmen att samlas in postoperativt. Blindtarmspinnen kommer endast att samlas in om utseendet på den borttagna blindtarmen inte är misstänkt för malign sjukdom (SOP_Appendixpodning). Detta i samförstånd med patologiska avdelningen, Herlev sjukhus, för att inte äventyra den histopatologiska undersökningen och för att förhindra spridning av maligna celler i det sällsynta fallet med en blindtarmstumör. Om det finns några tvivel om utseendet på bilagan kommer ingen pinne att samlas in. En uppföljning av patientens journal med avseende på patologirapporten kommer att göras tio dagar efter operationen. Dessa resultat noteras i patientens eCRF.

Kriterier för tillbakadragande och avhopp Deltagarna kan när som helst under prövningen återkalla sitt samtycke. De insamlade blodproverna, ändtarmspinnen och eventuell appendixpinne kommer att förstöras om en deltagare återkallar samtycke. En deltagare har avslutat prövningen tio dagar efter operationen när både slutrapporten för operationen och patologirapporten är tillgänglig. Patienter, som under eller kort efter operationen uppfyller något uteslutningskriterium avseende annan intraabdominal patologi, tillstånd som kräver annan behandling, eller som inte genomgår den planerade operationen, kommer att hoppa av studien och kommer därmed att uteslutas från studien och det insamlade blodet. prov, rektalpinne och eventuell appendixpinne kommer att förstöras. En deltagare har avslutat studien när den 10-dagars postoperativa uppföljningen har genomförts.

Primärt resultat

Det primära resultatet kommer att baseras på de kumulativa resultaten från båda metoderna:

• Detektering av infektion med Yersinia spp. (enterocolitica och/eller pseudotuberkulos) genom mikrobiologisk undersökning av rektal pinnprover: Prover (rektal pinnprover) som tagits före operation fryses omedelbart vid -80°C och förvaras på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. När den sista patienten har avslutat prövningen skickas en bråkdel av de insamlade proverna från varje patient till avdelningen för klinisk mikrobiologi, Hvidovre sjukhus och utreds därefter med en realtids-PCR för Yersinia spp. Dessa resultat noteras i patientens eCRF, men inte i patientens journal. Prover med ett positivt PCR-resultat kommer att odlas för Yersinia spp. och vid positiva odlingsresultat kommer känslighetstestning att utföras (sekundärt utfall). Härefter kommer det insamlade humana materialet och den odlade Yersinia enterocolitica att frysas vid -80°C och lagras i tio år på Hvidovre sjukhus som en biobank för framtida forskning.

Sekundära resultat

• Serology of Yersinia enterocolitica: Detta resultat kommer att rapporteras om i den planerade publikationen om tillräcklig finansiering uppnås, annars kommer det att presenteras i en senare publikation. Sex ml blod som samlats in före operationen fryses omedelbart vid -80°C och förvaras på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. När den sista patienten har avslutat prövningen skickas blodprovet för serologi från varje patient till Statens Serum Institut. Här undersöks blodproverna så snart som möjligt efter ankomst med ett internt ELISA-test för Yersinia enterocolitica IgM, IgA, och IgG. Efter analysen kommer serumproverna att frysas vid -80°C och förvaras i tio år på Statens Serum Institut som biobank för framtida forskning. Därefter kommer proverna att anonymiseras och överföras till biobanken för framtida forskning tillhörande Statens Serum Institut.

• Detektering av andra bakteriella patogener: De prover (rektala pinnprover) som tagits före operation fryses omedelbart vid -80°C och förvaras på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. När den sista patienten har avslutat prövningen skickas en bråkdel av de insamlade proverna från varje patient till avdelningen för klinisk mikrobiologi, Hvidovre sjukhus och utreds därefter med en multiplex realtids-PCR för:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonella spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Prover med positiva PCR-resultat för bakteriella patogener kommer att odlas (inklusive Yersinia spp.) och vid positiv odling kommer känslighetstestning att utföras. Därefter kommer det insamlade humana materialet och de odlade bakterierna att frysas vid -80°C och lagras i tio år på den platsen som en forskningsbiobank, därefter anonymiseras proverna.
• Kombinerat resultat av serologi och PCR för Yersinia spp.: Se beskrivning ovan. Detta resultat kommer endast att rapporteras om finansiering uppnås.
• Plasma och fullt blod förvaras för senare analys. 12 ml blod kommer att samlas in per patient: 6 ml kommer att användas för att göra EDTA-plasmaprover och buffycoat och 6 ml kommer att lagras som serumprover. En forskningsbiobank ska upprättas för de insamlade proverna som ska frysas och förvaras vid -80°C i tio år. Därefter förstörs plasma- och helblodsproverna. Den lokala hälsoforskningsetiska kommittén (huvudstadsregionen i Danmark) kommer att kontaktas angående användningen av denna forskningsbiobank innan ytterligare undersökningar inleds. Deltagarna kommer att tillfrågas om samtycke specifikt avseende det biologiska materialet för biobanken för framtida forskning.
• De återstående fraktionerna av prover från de rektala pinnproverna och proverna från appendixproverna lagras för senare analys. En forskningsbiobank ska upprättas för de insamlade proverna på Herlev Hospital, som ska frysas och förvaras vid -80°C i tio år. Därefter förstörs exemplaren. Den lokala hälsoforskningsetiska kommittén (Danmarks huvudstadsregion) kommer att kontaktas angående användningen av forskningsbiobanken innan ytterligare undersökningar inleds. Deltagarna kommer att tillfrågas om samtycke specifikt avseende det biologiska materialet för biobanken för framtida forskning.

Statistik Kontinuerlig numerisk data kommer att rapporteras som medelvärde och standardavvikelse om normalfördelning. Om den inte är normalfördelad kommer kontinuerliga numeriska data att rapporteras som median och percentiler. Utredarna kommer att analysera data med både parametrisk och icke-parametrisk statistik beroende på fördelningen av data. Ett p-värde <0,05 anses signifikant.

Effektberäkningen är som följer. Hastigheten för Yersinia spp. i blindtarmsinflammationsgruppen förväntas vara 13 %. Storleken på grupperna förväntas vara olika. Cirka 80 % av de inkluderade patienterna kommer att vara i blindtarmsinflammationsgruppen och 20 % kommer att vara i den normala blindtarmsgruppen.

När alfa är satt till 0,05, beta sätts till 0,80, och den minst intressanta skillnaden mellan grupperna är satt till 20 %, krävs totalt 225 patienter: 45 patienter i normal blindtarmsgruppen och 180 patienter i blindtarmsinflammationsgruppen.