Magyarázatok negatív laparoszkópos vakbéleltávolításokhoz és normál laparoszkópiákhoz

Célkitűzés A tanulmány célja annak feltárása, hogy mely fertőző betegségek utánozhatják az akut vakbélgyulladás tüneteit olyan mértékben, amely diagnosztikus laparoszkópiát vagy laparoszkópos appendectomiát okoz.

Elsődleges eredmény A Yersinia spp. előfordulási gyakoriságának összehasonlítása. (enterocolitica és/vagy pszeudotuberculosis) PCR-rel diagnosztizált fertőzés rektális tamponokon a két csoportban: kórszövettanilag igazolt gyulladásos betegek (vakbélgyulladás csoport) és olyan betegek, akiknél az alábbiak egyike van: szövettanilag normál vakbél gyulladás nélkül, mesenterialis lymphadenitis vagy normál diagnosztikai laparoszkópia (normál függelék csoport).

Másodlagos eredmények Más mikrobák előfordulásának összehasonlítása: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. és Aeromonas spp. A rektális tamponok PCR-rel megállapították a két csoportban: normál vakbél kontra vakbélgyulladás csoport.

A Yersinia spp. egyénileg értékeljük a két csoport alcsoportjában: vakbélgyulladás csoport és normál vakbélcsoport. A finanszírozás megszerzése esetén Yersinia szerológiai vizsgálatára kerül sor.

A kórszövettani vizsgálat során talált Enterobius vermicularis előfordulási gyakoriságának összehasonlítása a két csoportban.

Tervezés Prospektív, megfigyeléses kohorsz vizsgálat. A próba résztvevői Bevonási kritériumok

• ≥18 éves
• Heveny vakbélgyulladás gyanúja, diagnosztikus laparoszkópia tervezett
• Írásbeli tájékoztatáson alapuló beleegyezés írásbeli és szóbeli tájékoztatást követően Kizárási kritériumok
• Nem tud dánul megérteni, olvasni vagy beszélni
• Gyulladásos bélbetegséggel ismert
• Egyéb műtéti beavatkozást vagy kezelést igénylő vakbélgyulladástól eltérő intraabdominalis patológia (vagy perioperatívan, preoperatív CT-vizsgálattal, vagy röviddel a műtét után a kórszövettani vizsgálat során diagnosztizálva)
• Nem esik át diagnosztikai laparoszkópiára, laparoszkópos vakbéleltávolításra vagy nyílt vakbélműtésre
• Antimikrobiális szerek használata a felvételt megelőző két héten belül az akut hasi fájdalom miatti tényleges felvételig

Próbatanfolyam A betegeket akut vakbélgyulladás gyanújával a Herlev Kórház Sebészeti Osztályára veszik. Az osztály sebésze vagy akut műtétet tervez, vagy további megfigyelésre tartja a betegeket. A vizsgálatot végzők vagy a kutatási asszisztensek felkeresik ezeket a betegeket, hogy tájékoztatást adjanak a vizsgálatról. Ezáltal a vizsgálók biztosítják, hogy a páciensnek a lehető legtöbb ideje legyen a mérlegelésre ebben az akut helyzetben. Azok a betegek, akik megfelelnek a beválasztási kritériumoknak, és egyik kizárási kritériumnak sem (eltekintve azoktól a kritériumoktól, amelyeket csak műtétkor vagy után lehet tisztázni), tájékozott beleegyezésük után vesznek részt a vizsgálatban. A bevont betegek kiindulási jellemzőit, beleértve a kórtörténetüket, az utazási előzményeket és a gyomor-bélrendszeri tüneteket, a RedCAP elektronikus esetjelentési űrlapjain (eCRF) rögzítik. A műtét előtt vérmintát és végbéltamponot vesznek. A páciensnek a vizsgálatba való bevonásáról szóló megjegyzés a beteg kórlapjához kerül. A bevont betegek diagnosztikus laparoszkópián esnek át a szokásos klinikai gyakorlat szerint. Ha a vakbelet a műtét során eltávolítják, a műtét után az eltávolított vakbélből egy tampont vesznek. A vakbélkenet csak akkor kerül levételre, ha az eltávolított vakbél megjelenése nem gyanús rosszindulatú betegségre (SOP_Appendixpodning). Ez megegyezik a Herlev Kórház Patológiai Osztályával, hogy ne veszélyeztesse a kórszövettani vizsgálatot és megakadályozza a rosszindulatú sejtek terjedését a vakbéldaganat ritka esetekben. Ha bármilyen kétség merül fel a függelék megjelenésével kapcsolatban, nem veszünk tampont. A műtét után tíz nappal a beteg kórlapjának nyomon követésére a patológiai jelentésre tekintettel kerül sor. Ezeket az eredményeket a páciens eCRF-je feljegyzi.

Elállási és lemorzsolódási feltételek A résztvevők a tárgyalás során bármikor visszavonhatják hozzájárulásukat. Ha a résztvevő visszavonja a hozzájárulását, a levett vérmintákat, a végbéltamponot és az esetleges vakbélváladékot megsemmisítjük. Egy résztvevő tíz nappal a műtét után fejezte be a vizsgálatot, amikor a műtét végleges jegyzőkönyve és a patológiai jelentés is rendelkezésre áll. Azok a betegek, akik a műtét alatt vagy röviddel azt követően teljesítenek bármilyen kizárási feltételt az egyéb intraabdominális patológiák, egyéb kezelést igénylő állapotok tekintetében, vagy nem esnek át a tervezett műtéten, kiesnek a vizsgálatból, így kizárják őket a vizsgálatból és a gyűjtött vérből. a minta, a végbéltampon és az esetleges vakbél-tampon megsemmisül. Egy résztvevő a 10 napos posztoperatív követés után fejezte be a vizsgálatot.

Elsődleges eredmény

Az elsődleges eredmény mindkét módszer összesített eredményein alapul:

• Yersinia spp. fertőzés kimutatása. (enterocolitica és/vagy pseudotuberculosis) rektális tampon mikrobiológiai vizsgálatával: A műtét előtt gyűjtött mintákat (rektális tampon) azonnal lefagyasztják -80 °C-on, és a Herlev Kórházban egy kutatási biobankban tárolják. Amikor az utolsó beteg is befejezte a vizsgálatot, az egyes betegektől begyűjtött minták egy részét elküldik a Hvidovre Kórház Klinikai Mikrobiológiai Osztályára, és ezt követően valós idejű PCR-rel vizsgálják a Yersinia spp. Ezeket az eredményeket a páciens eCRF-je feljegyzi, de a beteg kórlapja nem. A pozitív PCR-eredményt mutató mintákat Yersinia spp. pozitív tenyésztési eredmény esetén pedig fogékonysági vizsgálatot végeznek (másodlagos eredmény). A továbbiakban az összegyűjtött emberi anyagot és a tenyésztett Yersinia enterocoliticát -80°C-ra lefagyasztják, és tíz évig tárolják a Hvidovre Kórházban biobankként a jövőbeli kutatások érdekében.

Másodlagos eredmények

• A Yersinia enterocolitica szerológiája: Erről az eredményről a tervezett kiadványban számolunk be, ha elegendő finanszírozást sikerül elérni, ellenkező esetben egy későbbi publikációban. A műtét előtt összegyűjtött hat ml vért azonnal lefagyasztják -80 °C-on, és a Herlev Kórházban egy kutatási biobankban tárolják. Amikor az utolsó beteg is befejezte a vizsgálatot, minden egyes beteg szerológiai vérmintáját elküldik a Statens Serum Institut-nak. Itt a vérmintákat a megérkezés után a lehető leghamarabb megvizsgálják házon belüli ELISA-teszttel Yersinia enterocolitica IgM, IgA és IgG kimutatására. Az elemzést követően a szérummintákat -80°C-on lefagyasztják, és tíz évig tárolják a Statens Serum Institutban biobankként a jövőbeli kutatásokhoz. Ezt követően a mintákat anonimizálják, és a Biobankba továbbítják a Statens Serum Instituthoz tartozó jövőbeli kutatás céljából.

• Egyéb bakteriális kórokozók kimutatása: A műtét előtt gyűjtött mintákat (rektális tampont) azonnal lefagyasztják -80°C-on, és a Herlev Kórházban egy kutatási biobankban tárolják. Amikor az utolsó beteg is befejezte a vizsgálatot, az egyes betegektől begyűjtött minták egy részét elküldik a Hvidovre Kórház Klinikai Mikrobiológiai Osztályára, és ezt követően multiplex valós idejű PCR-rel megvizsgálják:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonella spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. A bakteriális kórokozókra pozitív PCR-eredményű mintákat tenyésztjük (beleértve a Yersinia spp.-t is), és pozitív tenyésztés esetén érzékenységi vizsgálatot végeznek. A továbbiakban az összegyűjtött emberi anyagot és a tenyésztett baktériumokat -80°C-on lefagyasztják és tíz évig ott tárolják kutatási biobankként, a továbbiakban a mintákat anonimizálják.
• A szerológia és a PCR kombinált eredménye Yersinia spp. esetében: Lásd a fenti leírást. Erről az eredményről csak akkor számolunk be, ha a finanszírozás megvalósul.
• A plazmát és a teljes vért megőrzik későbbi elemzés céljából. Betegenként 12 ml vért veszünk: 6 ml-t EDTA-plazma minták és buffycoat készítésére, 6 ml szérummintaként tárolunk. Az összegyűjtött mintákhoz kutatási biobankot hoznak létre, amelyeket lefagyasztanak és tíz évig -80°C-on tárolnak. Ezt követően a plazma és a teljes vérminták megsemmisülnek. A további vizsgálatok megkezdése előtt felvesszük a kapcsolatot a helyi Egészségügyi Kutatási Etikai Bizottsággal (Dánia fővárosi régiója) a kutatási biobank használatával kapcsolatban. A résztvevők hozzájárulását kifejezetten a biobank biológiai anyagára vonatkozóan kérik a jövőbeni kutatásokhoz.
• A rektális tamponok és a függelék tamponok mintáinak megmaradt frakcióit későbbi elemzés céljából tároljuk. Az összegyűjtött mintákhoz a Herlev Kórházban kutatási biobankot hoznak létre, amelyeket lefagyasztanak és tíz évig -80°C-on tárolnak. Ezt követően a példányokat megsemmisítik. A további vizsgálatok megkezdése előtt felvesszük a kapcsolatot a helyi Egészségügyi Kutatási Etikai Bizottsággal (Dánia fővárosi régiója) a kutatási biobank használatával kapcsolatban. A résztvevők hozzájárulását kifejezetten a biobank biológiai anyagára vonatkozóan kérik a jövőbeni kutatásokhoz.

Statisztika A folyamatos numerikus adatokat átlag és szórásként kell jelenteni, ha normális eloszlásúak. Ha nem normális eloszlású, a folyamatos numerikus adatok mediánként és percentilisként jelennek meg. A vizsgálók az adatok megoszlásától függően parametrikus és nem paraméteres statisztikákkal is elemzik az adatokat. A p-érték <0,05 szignifikánsnak tekinthető.

A teljesítmény számítás a következő. A Yersinia spp. a vakbélgyulladás csoportjában várhatóan 13%. A csoportok létszáma várhatóan egyenlőtlen lesz. A bevont betegek körülbelül 80%-a a vakbélgyulladásos csoportba, 20%-a pedig a normál vakbélgyulladás csoportjába tartozik.

Ha az alfa értéke 0,05, a béta értéke 0,80, a legkevésbé érdekes különbség pedig a csoportok között 20%, összesen 225 betegre van szükség: 45 beteg a normál vakbélcsoportban és 180 beteg a vakbélgyulladásos csoportban.