Explicações para apendicectomias laparoscópicas negativas e laparoscopias normais

Objetivo O objetivo do estudo é investigar quais doenças infecciosas podem imitar os sintomas de apendicite aguda a ponto de causar uma laparoscopia diagnóstica ou apendicectomia laparoscópica.

Desfecho primário Uma comparação da incidência de Yersinia spp. (enterocolitica e/ou pseudotuberculosis) diagnosticada por PCR em esfregaços retais nos dois grupos: pacientes com inflamação histopatológica confirmada (grupo apendicite) e pacientes com um dos seguintes: apêndice histopatológico normal sem inflamação, linfadenite mesentérica ou diagnóstico normal laparoscopia (grupo apêndice normal).

Resultados secundários Uma comparação da incidência de outros micróbios: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. e Aeromonas spp. encontrados por PCR de swabs retais nos dois grupos: apêndice normal versus grupo apendicite.

Pacientes positivos para Yersinia spp. serão avaliados individualmente em subgrupos dos dois grupos: grupo apendicite e grupo apêndice normal. A investigação sorológica para Yersinia será realizada se o financiamento for obtido.

Comparação da incidência de Enterobius vermicularis encontrada no exame histopatológico nos dois grupos.

Projeto Um estudo de coorte prospectivo e observacional. Participantes do estudo Critérios de inclusão

• ≥18 anos
• Suspeita de apendicite aguda e planejado para laparoscopia diagnóstica
• Consentimento informado por escrito após informação escrita e verbal Critérios de exclusão
• Não consegue entender, ler ou falar dinamarquês
• Conhecido com doença inflamatória intestinal
• Outra patologia intra-abdominal além da apendicite que requer outra intervenção ou tratamento cirúrgico (diagnosticada no período perioperatório, em uma tomografia computadorizada pré-operatória ou logo após a cirurgia no exame histopatológico)
• Não submetidos a laparoscopia diagnóstica, apendicectomia laparoscópica ou apendicectomia aberta
• Uso de agentes antimicrobianos nas duas semanas anteriores à inclusão até a admissão real por dor abdominal aguda

Curso experimental Os pacientes são internados no Departamento de Cirurgia do Hospital Herlev com suspeita de apendicite aguda. Um cirurgião do departamento planejará uma cirurgia aguda ou manterá os pacientes para observação posterior. Os investigadores do estudo ou assistentes de pesquisa abordarão esses pacientes para fornecer informações sobre o estudo. Assim, os investigadores garantem que o paciente tenha o máximo de tempo possível para consideração neste cenário agudo. Os pacientes que preenchem os critérios de inclusão e nenhum dos critérios de exclusão (exceto aqueles critérios que só podem ser esclarecidos durante ou após a cirurgia) são incluídos no estudo após consentimento informado. As características basais dos pacientes inscritos, incluindo seu histórico médico, histórico de viagens e sintomas gastrointestinais, serão registradas nos formulários eletrônicos de relato de caso (eCRF) no RedCAP. Amostras de sangue e um swab retal são coletados antes da cirurgia. Uma nota sobre a inclusão do paciente no estudo será adicionada ao prontuário médico do paciente. Os pacientes incluídos serão submetidos a uma laparoscopia diagnóstica realizada de acordo com a prática clínica padrão. Se o apêndice for removido durante a cirurgia, um swab do apêndice removido será coletado no pós-operatório. O swab do apêndice só será coletado se a aparência do apêndice removido não for suspeita de doença maligna (SOP_Appendixpodning). Isso está de acordo com o Departamento de Patologia do Hospital Herlev, para não comprometer o exame histopatológico e evitar a disseminação de células malignas no caso raro de um tumor de apêndice. Se houver qualquer dúvida quanto à aparência do apêndice, nenhum swab será coletado. Um acompanhamento do prontuário do paciente em relação ao laudo da patologia será feito dez dias após a cirurgia. Esses resultados são anotados na eCRF do paciente.

Critérios de retirada e desistência Os participantes podem retirar seu consentimento a qualquer momento durante o estudo. As amostras de sangue coletadas, swab retal e possível swab de apêndice serão destruídos se um participante retirar o consentimento. Um participante concluiu o estudo dez dias após a cirurgia, quando o registro final da cirurgia e o relatório da patologia estão disponíveis. Os pacientes que, durante ou logo após a cirurgia, cumprirem qualquer critério de exclusão referente a outra patologia intra-abdominal, condições que requeiram outro tratamento ou não sejam submetidos à cirurgia planejada, serão excluídos do estudo e, portanto, serão excluídos do estudo e do sangue coletado. amostra, swab retal e possível swab de apêndice serão destruídos. Um participante concluiu o estudo quando o acompanhamento pós-operatório de 10 dias foi realizado.

Resultado primário

O resultado primário será baseado nos resultados cumulativos de ambos os métodos:

• Detecção de infecção por Yersinia spp. (enterocolitica e/ou pseudotuberculose) por investigação microbiológica de swab retal: As amostras (swab retal) coletadas antes da cirurgia são imediatamente congeladas a -80°C e armazenadas no Herlev Hospital em um biobanco de pesquisa. Quando o último paciente conclui o ensaio, uma fração das amostras coletadas de cada paciente é enviada ao Departamento de Microbiologia Clínica do Hospital Hvidovre e posteriormente investigada com PCR em tempo real para Yersinia spp. Esses resultados são anotados na eCRF do paciente, mas não no prontuário do paciente. Amostras com resultado de PCR positivo serão cultivadas para Yersinia spp. e em caso de resultado positivo da cultura, será realizado teste de suscetibilidade (desfecho secundário). Posteriormente, o material humano coletado e a cultura de Yersinia enterocolitica serão congelados a -80°C e armazenados por dez anos no Hvidovre Hospital como um biobanco para futuras pesquisas.

Resultados secundários

• Sorologia de Yersinia enterocolitica: Este resultado será relatado na publicação planejada se for obtido financiamento suficiente, caso contrário, será apresentado em uma publicação posterior. Seis ml de sangue coletados antes da cirurgia são imediatamente congelados a -80°C e armazenados no Herlev Hospital em um biobanco de pesquisa. Quando o último paciente conclui o estudo, a amostra de sangue para sorologia de cada paciente é enviada ao Statens Serum Institut. Aqui, as amostras de sangue são investigadas o mais rápido possível após a chegada com um teste ELISA interno para Yersinia enterocolitica IgM, IgA e IgG. Após a análise, as amostras de soro serão congeladas a -80°C e armazenadas por dez anos no Statens Serum Institut como um biobanco para futuras pesquisas. Posteriormente, as amostras serão anonimizadas e transferidas para o biobanco para futuras pesquisas pertencentes ao Statens Serum Institut.

• Detecção de outros patógenos bacterianos: As amostras (swab retal) coletadas antes da cirurgia são imediatamente congeladas a -80°C e armazenadas no Herlev Hospital em um biobanco de pesquisa. Quando o último paciente conclui o estudo, uma fração das amostras coletadas de cada paciente é enviada ao Departamento de Microbiologia Clínica do Hospital Hvidovre e posteriormente investigada com uma PCR multiplex em tempo real para:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonela spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Amostras com resultados de PCR positivos para patógenos bacterianos serão cultivadas (incluindo Yersinia spp.) e em caso de cultura positiva será realizado teste de suscetibilidade. A seguir, o material humano coletado e as bactérias cultivadas serão congelados a -80°C e armazenados por dez anos naquele local como um biobanco de pesquisa, a partir de agora as amostras serão anonimizadas.
• Resultado combinado de sorologia e PCR para Yersinia spp.: Ver descrição acima. Este resultado só será relatado se o financiamento for alcançado.
• Plasma e sangue total são guardados para análise posterior. Serão coletados 12 ml de sangue por paciente: 6 ml serão usados ​​para fazer amostras de EDTA-plasma e buffycoat e 6 ml serão armazenados como amostras de soro. Um biobanco de pesquisa será estabelecido para as amostras coletadas, que serão congeladas e armazenadas a -80°C por dez anos. Em seguida, as amostras de plasma e sangue total são destruídas. O Comitê de Ética em Pesquisa em Saúde local (região da capital da Dinamarca) será contatado sobre o uso deste biobanco de pesquisa antes que novas investigações sejam iniciadas. Será solicitado consentimento dos participantes especificamente em relação ao material biológico para o biobanco para futuras pesquisas.
• As restantes frações de espécimes das zaragatoas retais e espécimes das zaragatoas do apêndice são armazenadas para análise posterior. Um biobanco de pesquisa será estabelecido para as amostras coletadas no Hospital Herlev, que serão congeladas e armazenadas a -80°C por dez anos. Depois disso, os espécimes são destruídos. O Comitê de Ética em Pesquisa em Saúde local (região da capital da Dinamarca) será contatado sobre o uso do biobanco de pesquisa antes que novas investigações sejam iniciadas. Será solicitado consentimento dos participantes especificamente em relação ao material biológico para o biobanco para futuras pesquisas.

Estatísticas Dados numéricos contínuos serão relatados como média e desvio padrão se forem normalmente distribuídos. Se não forem distribuídos normalmente, os dados numéricos contínuos serão relatados como mediana e percentis. Os investigadores analisarão os dados com estatísticas paramétricas e não paramétricas, dependendo da distribuição dos dados. Um p-valor <0,05 é considerado significativo.

O cálculo da potência é o seguinte. A taxa de Yersinia spp. no grupo de apendicite é de 13%. Espera-se que os tamanhos dos grupos sejam desiguais. Aproximadamente 80% dos pacientes incluídos estarão no grupo de apendicite e 20% estarão no grupo de apêndice normal.

Quando alfa é definido em 0,05, beta é definido em 0,80 e a diferença menos interessante entre os grupos é definida em 20%, um total de 225 pacientes são necessários: 45 pacientes no grupo de apêndice normal e 180 pacientes no grupo de apendicite.