Wyjaśnienia dotyczące ujemnych laparoskopowych appendektomii i normalnych laparoskopii

Cel Celem pracy jest zbadanie, które choroby zakaźne mogą naśladować objawy ostrego zapalenia wyrostka robaczkowego w stopniu powodującym wykonanie laparoskopii diagnostycznej lub laparoskopowej appendektomii.

Pierwotny wynik Porównanie częstości występowania Yersinia spp. (enterocolitica i/lub pseudotuberculosis) rozpoznane metodą PCR na wymazach z odbytu w dwóch grupach: pacjenci z potwierdzonym histopatologicznie zapaleniem (grupa zapalenia wyrostka robaczkowego) oraz pacjenci z jednym z następujących kryteriów: histopatologicznie prawidłowy wyrostek robaczkowy bez zapalenia, zapalenie węzłów chłonnych krezki lub prawidłowy wynik diagnostyczny laparoskopia (normalna grupa wyrostka robaczkowego).

Wyniki drugorzędowe Porównanie częstości występowania innych drobnoustrojów: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. i Aeromonas spp. znalezione przez PCR wymazów z odbytu w dwóch grupach: normalny wyrostek robaczkowy i grupa z zapaleniem wyrostka robaczkowego.

Pacjenci dodatni w kierunku Yersinia spp. będą oceniane indywidualnie w podgrupach z dwóch grup: grupa z zapaleniem wyrostka robaczkowego i grupa z normalnym wyrostkiem robaczkowym. Badania serologiczne w kierunku Yersinia zostaną przeprowadzone, jeśli uzyska się fundusze.

Porównanie częstości występowania Enterobius vermicularis stwierdzonej w badaniu histopatologicznym w obu grupach.

Projekt Prospektywne, obserwacyjne badanie kohortowe. Uczestnicy badania Kryteria włączenia

• ≥18 lat
• Podejrzenie ostrego zapalenia wyrostka robaczkowego i planowana laparoskopia diagnostyczna
• Pisemna świadoma zgoda po informacji pisemnej i ustnej Kryteria wykluczenia
• Nie rozumie, nie czyta ani nie mówi po duńsku
• Znany z nieswoistym zapaleniem jelit
• Inna patologia w obrębie jamy brzusznej niż zapalenie wyrostka robaczkowego wymagająca innej interwencji chirurgicznej lub leczenia (rozpoznana w okresie okołooperacyjnym, w tomografii komputerowej przed operacją lub krótko po operacji w badaniu histopatologicznym)
• Niepoddawany diagnostycznej laparoskopii, laparoskopowej appendektomii lub otwartej appendektomii
• Stosowanie środków przeciwdrobnoustrojowych w ciągu dwóch tygodni przed włączeniem do faktycznego przyjęcia z powodu ostrego bólu brzucha

Kurs próbny Pacjenci przyjmowani są na Oddział Chirurgiczny Szpitala Herlev z podejrzeniem ostrego zapalenia wyrostka robaczkowego. Chirurg z oddziału albo zaplanuje pilną operację, albo zatrzyma pacjentów do dalszej obserwacji. Badacze badania lub asystenci badaczy zwrócą się do tych pacjentów, aby udzielić informacji na temat badania. W ten sposób badacze zapewniają pacjentowi jak najwięcej czasu na rozważenie w tej ostrej sytuacji. Pacjenci, którzy spełniają kryteria włączenia i żadne z kryteriów wykluczenia (z wyjątkiem tych kryteriów, które można wyjaśnić dopiero w trakcie lub po operacji), są włączani do badania po uzyskaniu świadomej zgody. Wyjściowa charakterystyka włączonych pacjentów, w tym ich historia medyczna, historia podróży i objawy żołądkowo-jelitowe, zostanie zarejestrowana w elektronicznych formularzach opisów przypadków (eCRF) w RedCAP. Próbki krwi i wymaz z odbytu pobiera się przed operacją. Notatka o włączeniu pacjenta do badania zostanie dodana do dokumentacji medycznej pacjenta. Zakwalifikowani pacjenci zostaną poddani diagnostycznej laparoskopii wykonywanej zgodnie ze standardową praktyką kliniczną. Jeśli wyrostek zostanie usunięty podczas operacji, wymaz z usuniętego wyrostka zostanie pobrany po operacji. Wymaz z wyrostka robaczkowego zostanie pobrany tylko wtedy, gdy wygląd usuniętego wyrostka robaczkowego nie budzi podejrzenia choroby nowotworowej (SOP_Appendixpodning). Jest to zgodne z Wydziałem Patologii Szpitala Herlev, aby nie narażać na szwank badania histopatologicznego i zapobiegać rozprzestrzenianiu się komórek nowotworowych w rzadkich przypadkach guza wyrostka robaczkowego. W przypadku wątpliwości co do wyglądu wyrostka robaczkowego wymaz nie zostanie pobrany. Dziesięć dni po zabiegu zostanie przeprowadzona kontrola dokumentacji medycznej pacjenta w odniesieniu do raportu patologicznego. Wyniki te są odnotowywane w eCRF pacjenta.

Kryteria wycofania i rezygnacji Uczestnicy mogą wycofać swoją zgodę w dowolnym momencie badania. Pobrane próbki krwi, wymaz z odbytu i ewentualnie wymaz z wyrostka robaczkowego zostaną zniszczone w przypadku wycofania zgody przez uczestnika. Uczestnik zakończył badanie 10 dni po operacji, gdy dostępny jest zarówno końcowy zapis operacji, jak i raport patologiczny. Pacjenci, którzy w trakcie lub krótko po operacji spełnią jakiekolwiek kryterium wykluczenia dotyczące innej patologii w obrębie jamy brzusznej, stanów wymagających innego leczenia lub nie przejdą planowanej operacji, zostaną wycofani z badania i tym samym zostaną wykluczeni z badania, a pobrana krew próbka, wymaz z odbytu i ewentualny wymaz z wyrostka robaczkowego zostaną zniszczone. Uczestnik zakończył badanie po przeprowadzeniu 10-dniowej obserwacji pooperacyjnej.

Podstawowy wynik

Podstawowy wynik będzie oparty na skumulowanych wynikach obu metod:

• Wykrywanie zakażenia Yersinia spp. (enterocolitica i/lub pseudotuberculosis) poprzez badanie mikrobiologiczne wymazu z odbytu: Próbki (wymaz z odbytu) pobrane przed operacją są natychmiast zamrażane w temperaturze -80°C i przechowywane w szpitalu Herlev w biobanku badawczym. Kiedy ostatni pacjent zakończy badanie, część pobranych próbek od każdego pacjenta jest wysyłana do Oddziału Mikrobiologii Klinicznej Szpitala Hvidovre, a następnie badana metodą PCR w czasie rzeczywistym w kierunku Yersinia spp. Wyniki te są odnotowywane w eCRF pacjenta, ale nie w dokumentacji medycznej pacjenta. Próbki z dodatnim wynikiem PCR będą hodowane na obecność Yersinia spp. aw przypadku pozytywnego wyniku posiewu zostanie wykonane badanie lekowrażliwości (wynik drugorzędny). Następnie pobrany materiał ludzki i wyhodowana Yersinia enterocolitica zostaną zamrożone w temperaturze -80°C i przechowywane przez dziesięć lat w szpitalu Hvidovre jako biobank do przyszłych badań.

Wyniki drugorzędne

• Serologia Yersinia enterocolitica: Wynik ten zostanie przedstawiony w planowanej publikacji, jeśli uzyska się wystarczające fundusze, w przeciwnym razie zostanie przedstawiony w późniejszej publikacji. Sześć ml krwi pobranej przed operacją jest natychmiast zamrażane w temperaturze -80°C i przechowywane w szpitalu Herlev w biobanku badawczym. Kiedy ostatni pacjent zakończy badanie, próbka krwi do badań serologicznych od każdego pacjenta jest wysyłana do Statens Serum Institut. Tutaj próbki krwi są badane jak najszybciej po przybyciu za pomocą wewnętrznego testu ELISA na Yersinia enterocolitica IgM, IgA i IgG. Po analizie próbki surowicy zostaną zamrożone w temperaturze -80°C i przechowywane przez dziesięć lat w Statens Serum Institut jako biobank do przyszłych badań. Następnie próbki zostaną zanonimizowane i przekazane do biobanku do przyszłych badań należącego do Statens Serum Institut.

• Wykrywanie innych patogenów bakteryjnych: Próbki (wymaz z odbytu) pobrane przed operacją są natychmiast zamrażane w temperaturze -80°C i przechowywane w szpitalu Herlev w biobanku badawczym. Kiedy ostatni pacjent zakończy badanie, część pobranych próbek od każdego pacjenta jest wysyłana do Oddziału Mikrobiologii Klinicznej Szpitala Hvidovre, a następnie badana za pomocą multipleksowej reakcji PCR w czasie rzeczywistym pod kątem:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonella spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Próbki z dodatnimi wynikami PCR w kierunku patogenów bakteryjnych będą hodowane (w tym Yersinia spp.), aw przypadku pozytywnej hodowli wykonywane będzie badanie lekowrażliwości. Następnie pobrany materiał ludzki i hodowane bakterie zostaną zamrożone w temperaturze -80°C i przechowywane przez dziesięć lat w tym miejscu jako biobank badawczy, po czym próbki zostaną zanonimizowane.
• Łączny wynik serologii i PCR dla Yersinia spp.: Patrz opis powyżej. Wynik ten zostanie przedstawiony dopiero po uzyskaniu finansowania.
• Osocze i pełną krew przechowuje się do późniejszej analizy. Od pacjenta zostanie pobrane 12 ml krwi: 6 ml zostanie wykorzystane do przygotowania próbek osocza z EDTA i kożuszka leukocytarnego, a 6 ml zostanie wykorzystane jako próbki surowicy. Dla pobranych próbek zostanie utworzony biobank badawczy, który zostanie zamrożony i przechowywany w temperaturze -80°C przez dziesięć lat. Następnie próbki osocza i pełnej krwi są niszczone. Przed rozpoczęciem dalszych dochodzeń skontaktujemy się z lokalną Komisją ds. Etyki Badań Medycznych (region stołeczny Danii) w sprawie korzystania z tego biobanku badawczego. Uczestnicy zostaną poproszeni o wyrażenie zgody w szczególności w odniesieniu do materiału biologicznego do biobanku do przyszłych badań.
• Pozostałe frakcje wymazów z odbytu i wymazów z wyrostka robaczkowego przechowuje się do późniejszej analizy. W szpitalu Herlev zostanie utworzony biobank badawczy dla pobranych próbek, które będą zamrażane i przechowywane w temperaturze -80°C przez dziesięć lat. Następnie okazy są niszczone. Przed rozpoczęciem dalszych dochodzeń skontaktujemy się z lokalną Komisją ds. Etyki Badań Medycznych (region stołeczny Danii) w sprawie korzystania z biobanku badawczego. Uczestnicy zostaną poproszeni o wyrażenie zgody w szczególności w odniesieniu do materiału biologicznego do biobanku do przyszłych badań.

Statystyki Ciągłe dane liczbowe będą przedstawiane jako średnia i odchylenie standardowe, jeśli mają rozkład normalny. Jeśli nie ma rozkładu normalnego, ciągłe dane liczbowe będą przedstawiane jako mediana i percentyle. Badacze będą analizować dane ze statystykami zarówno parametrycznymi, jak i nieparametrycznymi, w zależności od rozkładu danych. Wartość p <0,05 uważa się za istotną.

Obliczenie mocy jest następujące. Stawka Yersinia spp. w grupie z zapaleniem wyrostka robaczkowego ma wynieść 13%. Oczekuje się, że rozmiary grup będą nierówne. Około 80% włączonych pacjentów będzie w grupie z zapaleniem wyrostka robaczkowego, a 20% w grupie z normalnym wyrostkiem robaczkowym.

Kiedy alfa jest ustawiona na 0,05, beta na 0,80, a najmniej interesująca różnica między grupami jest ustawiona na 20%, potrzebnych jest łącznie 225 pacjentów: 45 pacjentów w grupie z normalnym wyrostkiem robaczkowym i 180 pacjentów w grupie z zapaleniem wyrostka robaczkowego.