Forklaringer på negative laparoskopiske appendektomier og normale laparoskopier

Formål Formålet med undersøgelsen er at undersøge, hvilke infektionssygdomme der kan efterligne symptomerne på akut blindtarmsbetændelse i en grad, der forårsager en diagnostisk laparoskopi eller laparoskopisk blindtarmsoperation.

Primært resultat En sammenligning af forekomsten af ​​Yersinia spp. (enterocolitica og/eller pseudotuberculosis) infektion diagnosticeret ved PCR på rektale podninger i de to grupper: patienter med histopatologisk bekræftet inflammation (appendicitis gruppe) og patienter med en af ​​følgende: en histopatologisk normal blindtarm uden betændelse, mesenterisk lymfadenitis eller en normal diagnostisk laparoskopi (normal blindtarmsgruppe).

Sekundære resultater En sammenligning af forekomsten af ​​andre mikrober: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. og Aeromonas spp. fundet ved PCR af rektale podninger i de to grupper: normal blindtarm versus blindtarmsbetændelse gruppe.

Patienter positive for Yersinia spp. vil blive evalueret individuelt i undergrupper af de to grupper: blindtarmsbetændelse gruppe og normal blindtarm gruppe. Serologisk undersøgelse for Yersinia vil blive udført, hvis der opnås finansiering.

En sammenligning af forekomsten af ​​Enterobius vermicularis fundet i den histopatologiske undersøgelse i de to grupper.

Design Et prospektivt, observationelt kohortestudie. Forsøgsdeltagere Inklusionskriterier

• ≥18 år gammel
• Mistanke om akut blindtarmsbetændelse og planlagt til diagnostisk laparoskopi
• Skriftligt informeret samtykke efter skriftlig og mundtlig information Eksklusionskriterier
• Kan ikke forstå, læse eller tale dansk
• Kendt med inflammatorisk tarmsygdom
• Anden intraabdominal patologi end blindtarmsbetændelse, der kræver anden kirurgisk indgreb eller behandling (diagnosticeret enten perioperativt, ved en præoperativ CT-scanning eller kort efter operationen i den histopatologiske undersøgelse)
• Undergår ikke diagnostisk laparoskopi, laparoskopisk appendektomi eller åben blindtarmsoperation
• Brug af antimikrobielle midler inden for to uger før inklusion indtil egentlig indlæggelse for akutte mavesmerter

Forsøgsforløb Patienter indlægges på Kirurgisk Afdeling, Herlev Hospital, med mistanke om akut blindtarmsbetændelse. En kirurg fra afdelingen vil enten planlægge en akut operation eller beholde patienter til yderligere observation. Forsøgets efterforskere eller forskningsassistenter vil henvende sig til disse patienter for at give information om undersøgelsen. Derved sikrer efterforskerne, at patienten har så meget tid som muligt til overvejelse i denne akutte situation. Patienter, som opfylder inklusionskriterierne og ingen af ​​eksklusionskriterierne (bortset fra de kriterier, der først kan afklares ved eller efter operationen), inkluderes i forsøget efter informeret samtykke. Baseline-karakteristika for de indskrevne patienter, herunder deres sygehistorie, rejsehistorie og gastrointestinale symptomer, vil blive registreret i de elektroniske case report formularer (eCRF) i RedCAP. Blodprøver og en rektal podning udtages før operationen. Et notat om patientens optagelse i forsøget vil blive tilføjet patientens journal. Inkluderede patienter vil gennemgå en diagnostisk laparoskopi udført i overensstemmelse med standard klinisk praksis. Hvis blindtarmen fjernes under operationen, vil en podepind fra den fjernede blindtarm blive indsamlet postoperativt. Appendix-podningen vil kun blive indsamlet, hvis udseendet af det fjernede blindtarm ikke er mistænkeligt for malign sygdom (SOP_Appendixpodning). Dette er efter aftale med Patologisk Afdeling, Herlev Hospital, for ikke at kompromittere den histopatologiske undersøgelse og for at forhindre spredning af maligne celler i det sjældne tilfælde af blindtarmssvulst. Hvis der er tvivl om udseendet af tillægget, vil der ikke blive indsamlet podepind. Der vil blive foretaget en opfølgning på patientens journal med hensyn til patologirapporten ti dage efter operationen. Disse resultater er noteret i patientens eCRF.

Kriterier for tilbagetrækning og frafald Deltagerne kan trække deres samtykke tilbage på et hvilket som helst tidspunkt under forsøget. De indsamlede blodprøver, rektalpodning og eventuel appendixpodning vil blive destrueret, hvis en deltager trækker sit samtykke tilbage. En deltager har afsluttet forsøget ti dage efter operationen, når både den endelige registrering af operationen og patologirapporten er tilgængelig. Patienter, som under eller kort efter operationen opfylder ethvert udelukkelseskriterium vedrørende anden intraabdominal patologi, tilstande, der kræver anden behandling, eller ikke gennemgår den planlagte operation, vil droppe ud af undersøgelsen og vil således blive udelukket fra undersøgelsen og det opsamlede blod prøve, rektal podning og eventuel appendix podning vil blive ødelagt. En deltager har afsluttet undersøgelsen, når den 10-dages postoperative opfølgning er gennemført.

Primært resultat

Det primære resultat vil være baseret på de kumulative resultater fra begge metoder:

• Påvisning af infektion med Yersinia spp. (enterocolitica og/eller pseudotuberkulose) ved mikrobiologisk undersøgelse af rektal podning: Prøver (rektal podning) opsamlet før operation fryses straks ved -80°C og opbevares på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. Når den sidste patient har afsluttet forsøget, sendes en brøkdel af de indsamlede prøver fra hver patient til Klinisk Mikrobiologisk Afdeling, Hvidovre Hospital og undersøges derefter med en realtids-PCR for Yersinia spp. Disse resultater noteres i patientens eCRF, men ikke i patientens journal. Prøver med et positivt PCR-resultat vil blive dyrket til Yersinia spp. og i tilfælde af positive dyrkningsresultater vil der blive udført følsomhedstest (sekundært resultat). Herefter skal det indsamlede humane materiale og den dyrkede Yersinia enterocolitica nedfryses ved -80°C og opbevares i ti år på Hvidovre Hospital som biobank til fremtidig forskning.

Sekundære resultater

• Serology of Yersinia enterocolitica: Dette resultat vil blive rapporteret om i den planlagte publikation, hvis der opnås tilstrækkelig finansiering, ellers vil det blive præsenteret i en senere publikation. Seks ml blod opsamlet før operationen fryses straks ved -80°C og opbevares på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. Når sidste patient har afsluttet forsøget, sendes blodprøven til serologi fra hver patient til Statens Serum Institut. Her undersøges blodprøverne hurtigst muligt efter ankomsten med en intern ELISA-test for Yersinia enterocolitica IgM, IgA og IgG. Efter analysen vil serumprøverne blive frosset ved -80°C og opbevaret i ti år på Statens Serum Institut som biobank til fremtidig forskning. Herefter vil prøverne blive anonymiseret og overført til biobanken til fremtidig forskning tilhørende Statens Serum Institut.

• Påvisning af andre bakterielle patogener: Prøverne (rektal podning) opsamlet før operationen nedfryses straks ved -80°C og opbevares på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. Når den sidste patient har afsluttet forsøget, sendes en brøkdel af de indsamlede prøver fra hver patient til Klinisk Mikrobiologisk Afdeling, Hvidovre Hospital og undersøges derefter med en multipleks realtids-PCR for:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonella spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Prøver med positive PCR-resultater for bakterielle patogener vil blive dyrket (inklusive Yersinia spp.), og i tilfælde af positiv dyrkning vil der blive udført følsomhedstest. Herefter vil det indsamlede humane materiale og de dyrkede bakterier blive frosset ved -80°C og opbevaret i ti år på dette sted som en forskningsbiobank, herefter anonymiseres prøverne.
• Kombineret resultat af serologi og PCR for Yersinia spp.: Se beskrivelse ovenfor. Dette resultat vil kun blive rapporteret, hvis finansiering er opnået.
• Plasma og fuldblod opbevares til senere analyse. 12 ml blod vil blive indsamlet pr. patient: 6 ml vil blive brugt til at lave EDTA-plasmaprøver og buffycoat og 6 ml vil blive opbevaret som serumprøver. Der etableres en forskningsbiobank for de indsamlede prøver, som skal fryses og opbevares ved -80°C i ti år. Derefter ødelægges plasma- og fuldblodprøverne. Den lokale Sundhedsforskningsetiske Komité (Region Hovedstaden) vil blive kontaktet vedrørende brugen af ​​denne forskningsbiobank, inden yderligere undersøgelser igangsættes. Deltagerne vil blive bedt om samtykke specifikt vedrørende det biologiske materiale til biobanken til fremtidig forskning.
• De resterende fraktioner af prøver fra de rektale podninger og prøver fra appendixpodningerne opbevares til senere analyse. Der etableres en forskningsbiobank for de indsamlede prøver på Herlev Hospital, som skal fryses og opbevares ved -80°C i ti år. Derefter destrueres prøverne. Den lokale Sundhedsforskningsetiske Komité (Region Hovedstaden) vil blive kontaktet vedrørende brugen af ​​forskningsbiobanken, inden yderligere undersøgelser igangsættes. Deltagerne vil blive bedt om samtykke specifikt vedrørende det biologiske materiale til biobanken til fremtidig forskning.

Statistik Løbende numeriske data vil blive rapporteret som middelværdi og standardafvigelse, hvis normalfordelt. Hvis det ikke er normalfordelt, vil kontinuerlige numeriske data blive rapporteret som median og percentiler. Efterforskerne vil analysere data med både parametrisk og ikke-parametrisk statistik afhængigt af fordelingen af ​​dataene. En p-værdi <0,05 anses for signifikant.

Effektberegningen er som følger. Satsen for Yersinia spp. i blindtarmsbetændelsesgruppen forventes at være 13 %. Størrelsen af ​​grupperne forventes at være ulige. Cirka 80 % af de inkluderede patienter vil være i blindtarmsbetændelsesgruppen og 20 % vil være i den normale blindtarmsgruppe.

Når alfa er sat til 0,05, beta er sat til 0,80, og den mindst interessante forskel mellem grupperne er sat til 20 %, kræves der i alt 225 patienter: 45 patienter i normal blindtarmsgruppen og 180 patienter i blindtarmsgruppen.