Spiegazioni per appendicectomie laparoscopiche negative e laparoscopie normali

Obiettivo Lo scopo dello studio è indagare quali malattie infettive potrebbero mimare i sintomi dell'appendicite acuta in misura tale da causare una laparoscopia diagnostica o un'appendicectomia laparoscopica.

Outcome primario Un confronto dell'incidenza di Yersinia spp. (enterocolitica e/o pseudotubercolosi) diagnosticata mediante PCR su tamponi rettali nei due gruppi: pazienti con infiammazione confermata istopatologicamente (gruppo appendicite) e pazienti con una delle seguenti condizioni: appendice istopatologica normale senza infiammazione, linfoadenite mesenterica o una diagnosi normale laparoscopia (gruppo appendice normale).

Risultati secondari Un confronto dell'incidenza di altri microbi: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. e Aeromonas spp. trovato mediante PCR di tamponi rettali nei due gruppi: appendice normale contro gruppo appendicite.

Pazienti positivi per Yersinia spp. saranno valutati individualmente in sottogruppi dei due gruppi: gruppo appendicite e gruppo appendice normale. L'indagine sierologica per Yersinia sarà condotta se il finanziamento sarà raggiunto.

Un confronto dell'incidenza di Enterobius vermicularis trovato nell'esame istopatologico nei due gruppi.

Disegno Uno studio di coorte prospettico e osservazionale. Partecipanti allo studio Criteri di inclusione

• ≥18 anni
• Sospetto di appendicite acuta e prevista per la laparoscopia diagnostica
• Consenso informato scritto dopo informazioni scritte e verbali Criteri di esclusione
• Non riesco a capire, leggere o parlare il danese
• Conosciuto con malattia infiammatoria intestinale
• Altra patologia intra-addominale diversa dall'appendicite che richiede altro intervento chirurgico o trattamento (diagnosticata nel perioperatorio, durante una TAC preoperatoria o poco dopo l'intervento chirurgico nell'esame istopatologico)
• Non sottoposti a laparoscopia diagnostica, appendicectomia laparoscopica o appendicectomia aperta
• Uso di agenti antimicrobici entro due settimane prima dell'inclusione fino all'effettivo ricovero per dolore addominale acuto

Corso di prova I pazienti sono ammessi al Dipartimento di Chirurgia, Herlev Hospital, con sospetta appendicite acuta. Un chirurgo del dipartimento pianificherà un intervento chirurgico acuto o manterrà i pazienti per un'ulteriore osservazione. Gli investigatori dello studio o gli assistenti di ricerca si avvicineranno a questi pazienti per fornire informazioni sullo studio. In tal modo, gli investigatori assicurano che il paziente abbia più tempo possibile per essere preso in considerazione in questo contesto acuto. I pazienti che soddisfano i criteri di inclusione e nessuno dei criteri di esclusione (a parte quei criteri che possono essere chiariti solo durante o dopo l'intervento chirurgico), sono inclusi nello studio dopo il consenso informato. Le caratteristiche di base dei pazienti arruolati, inclusa la loro anamnesi, la storia dei viaggi e i sintomi gastrointestinali, saranno registrate nei moduli elettronici di segnalazione dei casi (eCRF) in RedCAP. I campioni di sangue e un tampone rettale vengono raccolti prima dell'intervento chirurgico. Una nota dell'inclusione del paziente nello studio sarà aggiunta alla cartella clinica del paziente. I pazienti inclusi saranno sottoposti a laparoscopia diagnostica eseguita secondo la pratica clinica standard. Se l'appendice viene rimossa durante l'intervento chirurgico, dopo l'intervento verrà raccolto un tampone dall'appendice rimossa. Il tampone dell'appendice verrà raccolto solo se l'aspetto dell'appendice rimossa non è sospetta per malattia maligna (SOP_Appendixpodning). Questo è in accordo con il Dipartimento di Patologia, Herlev Hospital, per non compromettere l'esame istopatologico e per prevenire la diffusione di cellule maligne nel raro caso di un tumore dell'appendice. In caso di dubbi sull'aspetto dell'appendice non verrà prelevato alcun tampone. Dieci giorni dopo l'intervento verrà effettuato un follow-up della cartella clinica del paziente relativamente al referto patologico. Questi risultati sono annotati nella eCRF del paziente.

Ritiro e criteri di abbandono I partecipanti possono ritirare il proprio consenso in qualsiasi momento durante lo studio. I campioni di sangue raccolti, il tampone rettale e l'eventuale tampone dell'appendice verranno distrutti se un partecipante ritira il consenso. Un partecipante ha concluso lo studio dieci giorni dopo l'intervento chirurgico quando sono disponibili sia la registrazione finale dell'intervento chirurgico sia il referto patologico. I pazienti che durante o subito dopo l'intervento chirurgico soddisfano qualsiasi criterio di esclusione riguardante altre patologie intra-addominali, condizioni che richiedono un altro trattamento o non si sottopongono all'intervento chirurgico programmato, abbandoneranno lo studio e saranno quindi esclusi dallo studio e il sangue raccolto il campione, il tampone rettale e l'eventuale tampone dell'appendice verranno distrutti. Un partecipante ha concluso lo studio quando è stato condotto il follow-up postoperatorio di 10 giorni.

Il risultato principale

L'esito primario si baserà sui risultati cumulativi di entrambi i metodi:

• Rilevazione di infezione da Yersinia spp. (enterocolitica e/o pseudotubercolosi) mediante indagine microbiologica su tampone rettale: i campioni (tampone rettale) raccolti prima dell'intervento chirurgico vengono immediatamente congelati a -80°C e conservati presso l'ospedale Herlev in una biobanca di ricerca. Quando l'ultimo paziente ha concluso la sperimentazione, una frazione dei campioni raccolti da ciascun paziente viene inviata al Dipartimento di Microbiologia Clinica, Hvidovre Hospital e successivamente analizzata con una PCR in tempo reale per Yersinia spp. Questi risultati sono annotati nella eCRF del paziente, ma non nella cartella clinica del paziente. I campioni con un risultato PCR positivo saranno coltivati ​​per Yersinia spp. e in caso di risultati positivi della coltura, verrà eseguito il test di sensibilità (esito secondario). Successivamente, il materiale umano raccolto e la Yersinia enterocolitica in coltura saranno congelati a -80°C e conservati per dieci anni presso l'ospedale di Hvidovre come biobanca per ricerche future.

Esiti secondari

• Sierologia di Yersinia enterocolitica: questo risultato sarà riportato nella pubblicazione pianificata se si ottengono finanziamenti sufficienti, altrimenti sarà presentato in una pubblicazione successiva. Sei ml di sangue raccolti prima dell'intervento vengono immediatamente congelati a -80°C e conservati all'ospedale di Herlev in una biobanca di ricerca. Quando l'ultimo paziente ha concluso la sperimentazione, il campione di sangue per la sierologia di ciascun paziente viene inviato allo Statens Serum Institut. Qui, i campioni di sangue vengono esaminati il ​​prima possibile dopo l'arrivo con un test ELISA interno per Yersinia enterocolitica IgM, IgA e IgG. Dopo l'analisi, i campioni di siero saranno congelati a -80°C e conservati per dieci anni presso lo Statens Serum Institut come biobanca per ricerche future. Successivamente, i campioni saranno resi anonimi e trasferiti alla biobanca per future ricerche appartenenti allo Statens Serum Institut.

• Rilevamento di altri patogeni batterici: i campioni (tampone rettale) raccolti prima dell'intervento chirurgico vengono immediatamente congelati a -80°C e conservati presso l'ospedale di Herlev in una biobanca di ricerca. Quando l'ultimo paziente ha concluso la sperimentazione, una frazione dei campioni raccolti da ciascun paziente viene inviata al Dipartimento di Microbiologia Clinica, Hvidovre Hospital e successivamente analizzata con una PCR multiplex in tempo reale per:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonelle spp.
  • Shigelle spp.
  • Aeromonas spp. I campioni con risultati PCR positivi per patogeni batterici saranno messi in coltura (inclusa Yersinia spp.) e in caso di coltura positiva, verrà eseguito il test di sensibilità. Successivamente, il materiale umano raccolto e i batteri in coltura saranno congelati a -80°C e conservati per dieci anni in quel sito come biobanca di ricerca, in seguito i campioni saranno resi anonimi.
• Risultati combinati di sierologia e PCR per Yersinia spp.: vedere la descrizione sopra. Questo risultato verrà comunicato solo se il finanziamento viene raggiunto.
• Il plasma e il sangue intero vengono conservati per analisi successive. Saranno raccolti 12 ml di sangue per paziente: 6 ml saranno usati per fare campioni di plasma EDTA e buffycoat e 6 ml saranno conservati come campioni di siero. Verrà istituita una biobanca di ricerca per i campioni raccolti, che saranno congelati e conservati a -80°C per dieci anni. Successivamente il plasma e i campioni di sangue intero vengono distrutti. Il comitato etico per la ricerca sanitaria locale (regione della capitale della Danimarca) sarà contattato in merito all'uso di questa biobanca di ricerca prima che vengano avviate ulteriori indagini. Ai partecipanti verrà chiesto il consenso specifico per quanto riguarda il materiale biologico per la biobanca per future ricerche.
• Le restanti frazioni di campioni dei tamponi rettali e dei campioni dei tamponi dell'appendice vengono conservate per analisi successive. Verrà istituita una biobanca di ricerca per i campioni raccolti presso l'ospedale di Herlev, che saranno congelati e conservati a -80°C per dieci anni. Successivamente gli esemplari vengono distrutti. Il comitato etico per la ricerca sanitaria locale (regione della capitale della Danimarca) sarà contattato in merito all'uso della biobanca di ricerca prima che vengano avviate ulteriori indagini. Ai partecipanti verrà chiesto il consenso specifico per quanto riguarda il materiale biologico per la biobanca per future ricerche.

Statistiche I dati numerici continui saranno riportati come media e deviazione standard se distribuiti normalmente. Se non distribuiti normalmente, i dati numerici continui saranno riportati come mediana e percentili. Gli investigatori analizzeranno i dati con statistiche sia parametriche che non parametriche a seconda della distribuzione dei dati. Un p-value <0,05 è considerato significativo.

Il calcolo della potenza è il seguente. Il tasso di Yersinia spp. nel gruppo appendicite dovrebbe essere del 13%. Le dimensioni dei gruppi dovrebbero essere disuguali. Circa l'80% dei pazienti inclusi sarà nel gruppo dell'appendicite e il 20% sarà nel gruppo dell'appendice normale.

Quando alfa è impostato a 0,05, beta è impostato a 0,80 e la differenza meno interessante tra i gruppi è impostata al 20%, sono richiesti un totale di 225 pazienti: 45 pazienti nel gruppo con appendice normale e 180 pazienti nel gruppo con appendicite.