Explications pour les appendicectomies laparoscopiques négatives et les laparoscopies normales

Objectif L'objectif de l'étude est d'étudier quelles maladies infectieuses pourraient imiter les symptômes de l'appendicite aiguë à un degré qui provoque une laparoscopie diagnostique ou une appendicectomie laparoscopique.

Résultat principal Une comparaison de l'incidence de Yersinia spp. (entérocolitique et/ou pseudotuberculose) diagnostiquée par PCR sur frottis rectaux dans les deux groupes : patients présentant une inflammation histopathologique confirmée (groupe appendicite) et patients présentant l'un des éléments suivants : un appendice histopathologiquement normal sans inflammation, une lymphadénite mésentérique ou un diagnostic normal laparoscopie (groupe d'appendice normal).

Résultats secondaires Une comparaison de l'incidence d'autres microbes : Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. et Aeromonas spp. retrouvé par PCR de prélèvements rectaux dans les deux groupes : groupe appendice normal versus groupe appendicite.

Les patients positifs pour Yersinia spp. seront évalués individuellement en sous-groupes des deux groupes : groupe appendicite et groupe appendice normal. Une enquête sérologique pour Yersinia sera menée si le financement est obtenu.

Une comparaison de l'incidence d'Enterobius vermicularis retrouvée à l'examen histopathologique dans les deux groupes.

Conception Une étude de cohorte prospective et observationnelle. Participants à l'essai Critères d'inclusion

• ≥18 ans
• Suspicion d'appendicite aiguë et planification d'une laparoscopie diagnostique
• Consentement éclairé écrit après information écrite et verbale Critères d'exclusion
• Ne comprend pas, ne lit pas ou ne parle pas le danois
• Connu avec une maladie inflammatoire de l'intestin
• Autre pathologie intra-abdominale que l'appendicite nécessitant une autre intervention chirurgicale ou un traitement (diagnostiquée soit en périopératoire, lors d'un scanner préopératoire, soit peu après la chirurgie lors de l'examen histopathologique)
• Ne subissant pas de laparoscopie diagnostique, d'appendicectomie laparoscopique ou d'appendicectomie ouverte
• Utilisation d'agents antimicrobiens dans les deux semaines précédant l'inclusion jusqu'à l'admission effective pour douleur abdominale aiguë

Cours d'essai Les patients sont admis au service de chirurgie de l'hôpital Herlev en cas de suspicion d'appendicite aiguë. Un chirurgien du service planifiera une chirurgie aiguë ou gardera les patients pour une observation plus approfondie. Les investigateurs de l'essai ou les assistants de recherche approcheront ces patients pour leur donner des informations sur l'étude. Ainsi, les enquêteurs s'assurent que le patient a le plus de temps possible pour être pris en considération dans ce contexte aigu. Les patients, qui remplissent les critères d'inclusion et aucun des critères d'exclusion (à l'exception des critères qui ne peuvent être clarifiés qu'au moment ou après la chirurgie), sont inclus dans l'essai après consentement éclairé. Les caractéristiques de base des patients inscrits, y compris leurs antécédents médicaux, leurs antécédents de voyage et leurs symptômes gastro-intestinaux, seront enregistrées dans les formulaires électroniques de rapport de cas (eCRF) dans RedCAP. Des échantillons de sang et un écouvillon rectal sont prélevés avant la chirurgie. Une note d'inclusion du patient dans l'essai sera ajoutée au dossier médical du patient. Les patients inclus subiront une laparoscopie diagnostique réalisée conformément à la pratique clinique standard. Si l'appendice est retiré pendant la chirurgie, un écouvillon de l'appendice retiré sera prélevé après l'opération. L'écouvillon d'appendice ne sera prélevé que si l'apparence de l'appendice retiré n'est pas suspecte d'une maladie maligne (SOP_Appendixpodning). Ceci est en accord avec le Département de Pathologie, Hôpital Herlev, pour ne pas compromettre l'examen histopathologique et pour prévenir la propagation des cellules malignes dans le cas rare d'une tumeur appendiculaire. En cas de doute sur l'apparence de l'appendice, aucun écouvillon ne sera prélevé. Un suivi du dossier médical du patient au regard du rapport de pathologie sera effectué dix jours après l'intervention. Ces résultats sont notés dans l'eCRF du patient.

Critères de retrait et d'abandon Les participants peuvent retirer leur consentement à tout moment au cours de l'essai. Les échantillons de sang prélevés, l'écouvillon rectal et l'éventuel écouvillon d'appendice seront détruits si un participant retire son consentement. Un participant a conclu l'essai dix jours après la chirurgie lorsque le dossier final de la chirurgie et le rapport de pathologie sont disponibles. Les patients qui, pendant ou peu après la chirurgie, remplissent un critère d'exclusion concernant une autre pathologie intra-abdominale, des conditions nécessitant un autre traitement, ou ne subissent pas la chirurgie prévue, abandonneront l'étude et seront donc exclus de l'étude et du sang prélevé. l'échantillon, l'écouvillon rectal et éventuellement l'écouvillon d'appendice seront détruits. Un participant a conclu l'étude lorsque le suivi postopératoire de 10 jours a été effectué.

Résultat primaire

Le résultat principal sera basé sur les résultats cumulés des deux méthodes :

• Détection d'infection à Yersinia spp. (enterocolitica et/ou pseudotuberculosis) par investigation microbiologique sur écouvillon rectal : les échantillons (écouvillon rectal) prélevés avant la chirurgie sont immédiatement congelés à -80 °C et conservés à l'hôpital Herlev dans une biobanque de recherche. Lorsque le dernier patient a terminé l'essai, une fraction des échantillons prélevés sur chaque patient est envoyée au département de microbiologie clinique de l'hôpital de Hvidovre et ensuite étudiée avec une PCR en temps réel pour Yersinia spp. Ces résultats sont notés dans l'eCRF du patient, mais pas dans le dossier médical du patient. Les échantillons avec un résultat PCR positif seront cultivés pour Yersinia spp. et en cas de résultats de culture positifs, un test de sensibilité sera effectué (résultat secondaire). Par la suite, le matériel humain collecté et la culture de Yersinia enterocolitica seront congelés à -80°C et stockés pendant dix ans à l'hôpital de Hvidovre en tant que biobanque pour de futures recherches.

Résultats secondaires

• Sérologie de Yersinia enterocolitica : Ce résultat sera rapporté dans la publication prévue si un financement suffisant est atteint, sinon, il sera présenté dans une publication ultérieure. Six ml de sang prélevés avant la chirurgie sont immédiatement congelés à -80°C et stockés à l'hôpital Herlev dans une biobanque de recherche. Lorsque le dernier patient a terminé l'essai, l'échantillon de sang pour sérologie de chaque patient est envoyé au Statens Serum Institut. Ici, les échantillons de sang sont examinés dès que possible après leur arrivée avec un test ELISA interne pour Yersinia enterocolitica IgM, IgA et IgG. Après l'analyse, les échantillons de sérum seront congelés à -80°C et stockés pendant dix ans au Statens Serum Institut en tant que biobanque pour les recherches futures. Par la suite, les échantillons seront anonymisés et transférés à la biobanque pour de futures recherches appartenant au Statens Serum Institut.

• Détection d'autres pathogènes bactériens : Les échantillons (écouvillonnage rectal) prélevés avant la chirurgie sont immédiatement congelés à -80°C et conservés à l'hôpital Herlev dans une biobanque de recherche. Lorsque le dernier patient a terminé l'essai, une fraction des échantillons collectés de chaque patient est envoyée au Département de microbiologie clinique de l'hôpital de Hvidovre et ensuite étudiée avec une PCR en temps réel multiplex pour :

  • Campylobacter spp.
  • Salmonella spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Les échantillons avec des résultats PCR positifs pour les agents pathogènes bactériens seront cultivés (y compris Yersinia spp.) et en cas de culture positive, des tests de sensibilité seront effectués. Par la suite, le matériel humain collecté et les bactéries cultivées seront congelés à -80°C et stockés pendant dix ans sur ce site en tant que biobanque de recherche, ci-après les échantillons sont anonymisés.
• Résultat combiné de la sérologie et de la PCR pour Yersinia spp. : Voir la description ci-dessus. Ce résultat ne sera signalé que si le financement est atteint.
• Le plasma et le sang total sont conservés pour une analyse ultérieure. 12 ml de sang seront prélevés par patient : 6 ml seront utilisés pour faire des échantillons de plasma EDTA et de buffycoat et 6 ml seront conservés comme échantillons de sérum. Une biobanque de recherche sera établie pour les échantillons collectés, qui seront congelés et conservés à -80°C pendant dix ans. Ensuite, les échantillons de plasma et de sang complet sont détruits. Le comité local d'éthique de la recherche en santé (région de la capitale du Danemark) sera contacté concernant l'utilisation de cette biobanque de recherche avant que d'autres enquêtes ne soient lancées. Il sera demandé aux participants un consentement spécifique concernant le matériel biologique de la biobanque pour les recherches futures.
• Les fractions restantes des échantillons des écouvillons rectaux et des échantillons des écouvillons appendiculaires sont stockées pour une analyse ultérieure. Une biobanque de recherche sera établie pour les échantillons collectés à l'hôpital Herlev, qui seront congelés et stockés à -80°C pendant dix ans. Les spécimens sont ensuite détruits. Le comité local d'éthique de la recherche en santé (région de la capitale du Danemark) sera contacté concernant l'utilisation de la biobanque de recherche avant que d'autres enquêtes ne soient lancées. Il sera demandé aux participants un consentement spécifique concernant le matériel biologique de la biobanque pour les recherches futures.

Statistiques Les données numériques continues seront rapportées sous forme de moyenne et d'écart-type si elles sont normalement distribuées. Si elles ne sont pas distribuées normalement, les données numériques continues seront rapportées sous forme de médiane et de centiles. Les enquêteurs analyseront les données avec des statistiques paramétriques et non paramétriques en fonction de la distribution des données. Une valeur de p <0,05 est considérée comme significative.

Le calcul de la puissance est le suivant. Le taux de Yersinia spp. dans le groupe de l'appendicite devrait être de 13 %. La taille des groupes devrait être inégale. Environ 80 % des patients inclus seront dans le groupe appendicite et 20 % seront dans le groupe appendice normal.

Lorsque alpha est fixé à 0,05, bêta est fixé à 0,80, et la différence la moins intéressante entre les groupes est fixée à 20 %, il faut un total de 225 patients : 45 patients dans le groupe appendice normal et 180 patients dans le groupe appendicite.