Erläuterungen zu negativen laparoskopischen Appendektomien und normalen Laparoskopien

Ziel Ziel der Studie ist es zu untersuchen, welche Infektionskrankheiten die Symptome einer akuten Blinddarmentzündung in einem Ausmaß nachahmen könnten, das eine diagnostische Laparoskopie oder laparoskopische Appendektomie erfordert.

Primärer Endpunkt Ein Vergleich der Inzidenz von Yersinia spp. (Enterocolitica und/oder Pseudotuberkulose)-Infektion, diagnostiziert durch PCR auf Rektumabstrichen in den beiden Gruppen: Patienten mit histopathologisch bestätigter Entzündung (Blinddarmentzündungsgruppe) und Patienten mit einem der folgenden Symptome: ein histopathologisch normaler Blinddarm ohne Entzündung, mesenteriale Lymphadenitis oder eine normale Diagnose Laparoskopie (normale Blinddarmgruppe).

Sekundäre Ergebnisse Ein Vergleich der Inzidenz anderer Mikroben: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. und Aeromonas spp. gefunden durch PCR von Rektalabstrichen in den beiden Gruppen: normale Blinddarmgruppe versus Blinddarmentzündungsgruppe.

Patienten, die positiv auf Yersinia spp. sind. wird einzeln in Untergruppen der beiden Gruppen bewertet: Blinddarmentzündungsgruppe und normale Blinddarmgruppe. Wenn die Finanzierung gelingt, wird eine serologische Untersuchung auf Yersinia durchgeführt.

Ein Vergleich der Inzidenz von Enterobius vermicularis, die bei der histopathologischen Untersuchung in den beiden Gruppen festgestellt wurde.

Design: Eine prospektive, beobachtende Kohortenstudie. Einschlusskriterien für Studienteilnehmer

• ≥18 Jahre alt
• Verdacht auf akute Appendizitis und geplante diagnostische Laparoskopie
• Schriftliche Einverständniserklärung nach schriftlicher und mündlicher Information. Ausschlusskriterien
• Kann kein Dänisch verstehen, lesen oder sprechen
• Bekannt bei entzündlichen Darmerkrankungen
• Andere intraabdominale Pathologien als Blinddarmentzündung, die einen anderen chirurgischen Eingriff oder eine andere Behandlung erfordern (diagnostiziert entweder perioperativ, bei einem präoperativen CT-Scan oder kurz nach der Operation in der histopathologischen Untersuchung)
• Keine diagnostische Laparoskopie, laparoskopische Appendektomie oder offene Appendektomie
• Verwendung antimikrobieller Mittel innerhalb von zwei Wochen vor der Aufnahme bis zur tatsächlichen Aufnahme wegen akuter Bauchschmerzen

Probeverlauf Patienten werden mit Verdacht auf akute Blinddarmentzündung in die Abteilung für Chirurgie des Herlev-Krankenhauses eingeliefert. Ein Chirurg der Abteilung plant entweder eine akute Operation oder behält die Patienten zur weiteren Beobachtung. Die Prüfer der Studie oder wissenschaftliche Mitarbeiter werden auf diese Patienten zukommen, um ihnen Informationen über die Studie zu geben. Dadurch stellen die Untersucher sicher, dass der Patient in dieser akuten Situation so viel Zeit wie möglich für die Überlegung hat. Patienten, die die Einschlusskriterien und keines der Ausschlusskriterien erfüllen (außer den Kriterien, die erst bei oder nach der Operation geklärt werden können), werden nach Aufklärung in die Studie aufgenommen. Basismerkmale der aufgenommenen Patienten, einschließlich ihrer Krankengeschichte, Reisegeschichte und Magen-Darm-Symptome, werden in den elektronischen Fallberichtsformularen (eCRF) in RedCAP registriert. Vor der Operation werden Blutproben und ein Rektalabstrich entnommen. Ein Vermerk über die Einbeziehung des Patienten in die Studie wird der Krankenakte des Patienten hinzugefügt. Eingeschlossene Patienten werden einer diagnostischen Laparoskopie unterzogen, die gemäß der klinischen Standardpraxis durchgeführt wird. Wenn der Blinddarm während einer Operation entfernt wird, wird postoperativ ein Abstrich des entfernten Blinddarms entnommen. Der Blinddarmabstrich wird nur dann entnommen, wenn das Erscheinungsbild des entfernten Blinddarms keinen Verdacht auf eine bösartige Erkrankung ergibt (SOP_Appendixpodning). Dies erfolgt in Übereinstimmung mit der Abteilung für Pathologie des Herlev-Krankenhauses, um die histopathologische Untersuchung nicht zu beeinträchtigen und die Ausbreitung bösartiger Zellen im seltenen Fall eines Blinddarmtumors zu verhindern. Bestehen Zweifel am Aussehen des Blinddarms, wird kein Abstrich entnommen. Zehn Tage nach der Operation wird eine Nachuntersuchung der Krankenakte des Patienten im Hinblick auf den Pathologiebericht durchgeführt. Diese Ergebnisse werden im eCRF des Patienten vermerkt.

Widerrufs- und Abbruchkriterien Die Teilnehmer können ihre Einwilligung jederzeit während der Studie widerrufen. Die gesammelten Blutproben, Rektalabstriche und eventuelle Blinddarmabstriche werden vernichtet, wenn ein Teilnehmer seine Einwilligung widerruft. Ein Teilnehmer hat die Studie zehn Tage nach der Operation abgeschlossen, wenn sowohl das endgültige Operationsprotokoll als auch der Pathologiebericht vorliegen. Patienten, die während oder kurz nach der Operation ein Ausschlusskriterium in Bezug auf andere intraabdominale Pathologien oder Erkrankungen, die eine andere Behandlung erfordern, erfüllen oder sich der geplanten Operation nicht unterziehen, scheiden aus der Studie aus und werden daher von der Studie und der Blutentnahme ausgeschlossen Probe, Rektalabstrich und eventueller Blinddarmabstrich werden vernichtet. Ein Teilnehmer hat die Studie abgeschlossen, als die 10-tägige postoperative Nachuntersuchung durchgeführt wurde.

Primäres Ergebnis

Das primäre Ergebnis basiert auf den kumulativen Ergebnissen beider Methoden:

• Nachweis einer Infektion mit Yersinia spp. (Enterocolitica und/oder Pseudotuberkulose) durch mikrobiologische Untersuchung von Rektalabstrichen: Vor der Operation entnommene Proben (Rektalabstriche) werden sofort bei -80 °C eingefroren und im Herlev-Krankenhaus in einer Forschungsbiobank gelagert. Wenn der letzte Patient die Studie abgeschlossen hat, wird ein Teil der gesammelten Proben jedes Patienten an die Abteilung für klinische Mikrobiologie des Hvidovre-Krankenhauses geschickt und anschließend mit einer Echtzeit-PCR auf Yersinia spp. untersucht. Diese Ergebnisse werden im eCRF des Patienten vermerkt, jedoch nicht in der Krankenakte des Patienten. Proben mit einem positiven PCR-Ergebnis werden auf Yersinia spp. kultiviert. und im Falle positiver Kulturergebnisse wird ein Empfindlichkeitstest durchgeführt (sekundärer Endpunkt). Anschließend werden das gesammelte menschliche Material und die kultivierte Yersinia enterocolitica bei -80 °C eingefroren und zehn Jahre lang im Hvidovre-Krankenhaus als Biobank für zukünftige Forschungen gelagert.

Sekundäre Ergebnisse

• Serologie von Yersinia enterocolitica: Über dieses Ergebnis wird in der geplanten Veröffentlichung berichtet, wenn ausreichende Mittel bereitgestellt werden, andernfalls wird es in einer späteren Veröffentlichung vorgestellt. Sechs ml vor der Operation entnommenes Blut werden sofort bei -80 °C eingefroren und im Herlev-Krankenhaus in einer Forschungsbiobank gelagert. Wenn der letzte Patient die Studie abgeschlossen hat, wird die Blutprobe jedes Patienten zur Serologie an das Statens Serum Institut geschickt. Dabei werden die Blutproben möglichst zeitnah nach Eintreffen mit einem hauseigenen ELISA-Test auf Yersinia enterocolitica IgM, IgA und IgG untersucht. Nach der Analyse werden die Serumproben bei -80 °C eingefroren und zehn Jahre lang im Statens Serum Institut als Biobank für zukünftige Forschungen gelagert. Anschließend werden die Proben anonymisiert und zur künftigen Forschung an die Biobank des Statens Serum Institut übertragen.

• Nachweis anderer bakterieller Krankheitserreger: Die vor der Operation entnommenen Proben (Rektalabstrich) werden sofort bei -80 °C eingefroren und im Herlev-Krankenhaus in einer Forschungsbiobank gelagert. Wenn der letzte Patient die Studie abgeschlossen hat, wird ein Teil der gesammelten Proben jedes Patienten an die Abteilung für klinische Mikrobiologie des Hvidovre-Krankenhauses geschickt und anschließend mit einer Multiplex-Echtzeit-PCR auf Folgendes untersucht:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonellen spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Proben mit positiven PCR-Ergebnissen für bakterielle Krankheitserreger werden kultiviert (einschließlich Yersinia spp.) und im Falle einer positiven Kultur werden Empfindlichkeitstests durchgeführt. Anschließend werden das gesammelte menschliche Material und die kultivierten Bakterien bei -80 °C eingefroren und zehn Jahre lang an diesem Standort als Forschungsbiobank gelagert; anschließend werden die Proben anonymisiert.
• Kombiniertes Ergebnis aus Serologie und PCR für Yersinia spp.: Siehe Beschreibung oben. Dieses Ergebnis wird nur gemeldet, wenn die Finanzierung erreicht wird.
• Plasma und Vollblut werden für eine spätere Analyse aufbewahrt. Pro Patient werden 12 ml Blut gesammelt: 6 ml werden zur Herstellung von EDTA-Plasmaproben und Buffycoat verwendet und 6 ml werden als Serumproben aufbewahrt. Für die gesammelten Proben wird eine Forschungsbiobank eingerichtet, die eingefroren und zehn Jahre lang bei -80 °C gelagert wird. Anschließend werden die Plasma- und Vollblutproben vernichtet. Die örtliche Ethikkommission für Gesundheitsforschung (Hauptstadtregion Dänemarks) wird bezüglich der Nutzung dieser Forschungsbiobank kontaktiert, bevor weitere Untersuchungen eingeleitet werden. Die Teilnehmer werden um ihre Zustimmung speziell bezüglich des biologischen Materials für die Biobank für zukünftige Forschungen gebeten.
• Die verbleibenden Fraktionen der Proben aus den Rektumabstrichen und Proben aus den Blinddarmabstrichen werden zur späteren Analyse aufbewahrt. Für die gesammelten Proben im Herlev-Krankenhaus wird eine Forschungsbiobank eingerichtet, die eingefroren und zehn Jahre lang bei -80 °C gelagert wird. Anschließend werden die Proben vernichtet. Die örtliche Ethikkommission für Gesundheitsforschung (Hauptstadtregion Dänemarks) wird bezüglich der Nutzung der Forschungsbiobank kontaktiert, bevor weitere Untersuchungen eingeleitet werden. Die Teilnehmer werden um ihre Zustimmung speziell bezüglich des biologischen Materials für die Biobank für zukünftige Forschungen gebeten.

Statistiken Kontinuierliche numerische Daten werden bei Normalverteilung als Mittelwert und Standardabweichung angegeben. Wenn sie nicht normalverteilt sind, werden kontinuierliche numerische Daten als Median und Perzentile gemeldet. Die Forscher analysieren Daten je nach Verteilung der Daten sowohl mit parametrischen als auch mit nichtparametrischen Statistiken. Ein p-Wert <0,05 gilt als signifikant.

Die Leistungsberechnung ist wie folgt. Die Rate von Yersinia spp. in der Blinddarmentzündungsgruppe wird mit 13 % gerechnet. Es wird erwartet, dass die Gruppengrößen ungleich sind. Ungefähr 80 % der eingeschlossenen Patienten gehören zur Blinddarmentzündungsgruppe und 20 % zur normalen Blinddarmgruppe.

Wenn Alpha auf 0,05, Beta auf 0,80 und der am wenigsten interessante Unterschied zwischen den Gruppen auf 20 % eingestellt ist, sind insgesamt 225 Patienten erforderlich: 45 Patienten in der Gruppe mit normalem Blinddarm und 180 Patienten in der Gruppe mit Blinddarmentzündung.