Forklaringer for negative laparoskopiske appendektomier og normale laparoskopier

Mål Målet med studien er å undersøke hvilke infeksjonssykdommer som kan etterligne symptomene på akutt blindtarmbetennelse i en grad som forårsaker en diagnostisk laparoskopi eller laparoskopisk blindtarmsoperasjon.

Primært utfall En sammenligning av forekomsten av Yersinia spp. (enterocolitica og/eller pseudotuberculosis) infeksjon diagnostisert ved PCR på rektale vattpinner i de to gruppene: pasienter med histopatologisk bekreftet betennelse (appendisittgruppe) og pasienter med en av følgende: en histopatologisk normal blindtarm uten betennelse, mesenterisk lymfadenitt, eller en normal diagnostisk laparoskopi (normal blindtarmsgruppe).

Sekundære utfall En sammenligning av forekomsten av andre mikrober: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. og Aeromonas spp. funnet ved PCR av rektale vattpinner i de to gruppene: normal blindtarm versus blindtarmbetennelse gruppe.

Pasienter positive for Yersinia spp. vil bli vurdert individuelt i undergrupper av de to gruppene: blindtarmbetennelsegruppe og normal blindtarmsgruppe. Serologisk undersøkelse for Yersinia vil bli utført hvis finansiering oppnås.

En sammenligning av forekomsten av Enterobius vermicularis funnet i den histopatologiske undersøkelsen i de to gruppene.

Design En prospektiv, observerende kohortstudie. Prøvedeltakere Inklusjonskriterier

• ≥18 år gammel
• Mistanke om akutt blindtarmbetennelse og planlagt diagnostisk laparoskopi
• Skriftlig informert samtykke etter skriftlig og muntlig informasjon Eksklusjonskriterier
• Kan ikke forstå, lese eller snakke dansk
• Kjent med inflammatorisk tarmsykdom
• Annen intraabdominal patologi enn blindtarmbetennelse som krever annen kirurgisk inngrep eller behandling (diagnostisert enten perioperativt, ved en preoperativ CT-skanning eller kort tid etter operasjonen i den histopatologiske undersøkelsen)
• Ikke gjennomgår diagnostisk laparoskopi, laparoskopisk appendektomi eller åpen appendektomi
• Bruk av antimikrobielle midler innen to uker før inkludering frem til faktisk innleggelse for akutte magesmerter

Prøveforløp Pasienter legges inn på Kirurgisk avdeling, Herlev sykehus, med mistanke om akutt blindtarmbetennelse. En kirurg fra avdelingen vil enten planlegge for en akutt operasjon eller beholde pasienter for videre observasjon. Etterforskerne av forsøket eller forskningsassistenter vil henvende seg til disse pasientene for å gi informasjon om studien. Derved sikrer etterforskerne at pasienten får mest mulig tid til vurdering i denne akutte settingen. Pasienter som oppfyller inklusjonskriteriene og ingen av eksklusjonskriteriene (bortsett fra de kriteriene som kun kan avklares ved eller etter operasjon), inkluderes i forsøket etter informert samtykke. Baseline-karakteristika for de registrerte pasientene, inkludert deres sykehistorie, reisehistorie og gastrointestinale symptomer, vil bli registrert i de elektroniske saksrapportskjemaene (eCRF) i RedCAP. Blodprøver og en rektal vattpinne tas før operasjonen. Et notat om pasientens inkludering i forsøket vil bli lagt til pasientens journal. Inkluderte pasienter vil gjennomgå en diagnostisk laparoskopi utført i henhold til standard klinisk praksis. Hvis blindtarmen fjernes under operasjonen, vil en vattpinne fra den fjernede blindtarmen tas postoperativt. Appendiksprøven vil kun bli samlet inn hvis utseendet til den fjernede blindtarmen ikke er mistenkelig for ondartet sykdom (SOP_Appendixpodning). Dette er etter avtale med patologisk avdeling, Herlev sykehus, for ikke å kompromittere den histopatologiske undersøkelsen og for å hindre spredning av ondartede celler i det sjeldne tilfellet med blindtarmsvulst. Hvis det er tvil om utseendet til vedlegget, vil det ikke bli samlet inn en vattpinne. Det vil bli foretatt oppfølging av pasientens journal med hensyn til patologirapporten ti dager etter operasjonen. Disse resultatene er notert i pasientens eCRF.

Kriterier for tilbaketrekning og frafall Deltakerne kan trekke tilbake samtykket sitt når som helst under forsøket. De innsamlede blodprøvene, endetarmsprøven og eventuell blindtarmsprøve vil bli ødelagt dersom en deltaker trekker samtykket. En deltaker har avsluttet forsøket ti dager etter operasjonen når både den endelige oversikten over operasjonen og patologirapporten er tilgjengelig. Pasienter som under eller kort tid etter operasjonen oppfyller et eksklusjonskriterium angående annen intraabdominal patologi, tilstander som krever annen behandling, eller som ikke gjennomgår den planlagte operasjonen, vil falle ut av studien og vil dermed bli ekskludert fra studien og det innsamlede blodet. prøve, rektal vattpinne og eventuell appendix vattpinne vil bli ødelagt. En deltaker har avsluttet studien når den 10-dagers postoperative oppfølgingen er gjennomført.

Primært resultat

Det primære resultatet vil være basert på de kumulative resultatene fra begge metodene:

• Påvisning av infeksjon med Yersinia spp. (enterocolitica og/eller pseudotuberkulose) ved mikrobiologisk undersøkelse av rektal vattpinne: Prøver (rektal vattpinne) tatt før operasjon fryses umiddelbart ved -80°C og lagres ved Herlev Hospital i en forskningsbiobank. Når siste pasient har avsluttet studien, sendes en brøkdel av de innsamlede prøvene fra hver pasient til Avdeling for klinisk mikrobiologi, Hvidovre sykehus og deretter undersøkt med en sanntids-PCR for Yersinia spp. Disse resultatene er notert i pasientens eCRF, men ikke i pasientens journal. Prøver med positivt PCR-resultat vil bli dyrket for Yersinia spp. og ved positive dyrkingsresultater vil følsomhetstesting bli utført (sekundært utfall). Deretter vil det innsamlede menneskelige materialet og den dyrkede Yersinia enterocolitica fryses ved -80°C og lagres i ti år ved Hvidovre sykehus som en biobank for fremtidig forskning.

Sekundære utfall

• Serology of Yersinia enterocolitica: Dette resultatet vil bli rapportert om i den planlagte publikasjonen dersom tilstrekkelig finansiering oppnås, ellers vil det bli presentert i en senere publikasjon. Seks ml blod samlet før operasjonen fryses umiddelbart ved -80°C og lagres på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. Når siste pasient har avsluttet forsøket, sendes blodprøven for serologi fra hver pasient til Statens Serum Institut. Her undersøkes blodprøvene så raskt som mulig etter ankomst med en intern ELISA-test for Yersinia enterocolitica IgM, IgA og IgG. Etter analysen skal serumprøvene fryses ved -80°C og oppbevares i ti år ved Statens Serum Institut som biobank for fremtidig forskning. Deretter vil prøvene anonymiseres og overføres til biobanken for fremtidig forskning tilhørende Statens Serum Institut.

• Påvisning av andre bakterielle patogener: Prøvene (rektal vattpinne) tatt før operasjonen fryses umiddelbart ved -80°C og lagres på Herlev Hospital i en forskningsbiobank. Når siste pasient har avsluttet studien, sendes en brøkdel av de innsamlede prøvene fra hver pasient til Avdeling for klinisk mikrobiologi, Hvidovre sykehus og deretter undersøkt med multipleks sanntids-PCR for:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonella spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Prøver med positive PCR-resultater for bakterielle patogener vil bli dyrket (inkludert Yersinia spp.) og ved positiv dyrking vil følsomhetstesting bli utført. Deretter vil det innsamlede menneskelige materialet og de dyrkede bakteriene fryses ved -80°C og lagres i ti år på dette stedet som en forskningsbiobank, deretter blir prøvene anonymisert.
• Kombinert utfall av serologi og PCR for Yersinia spp.: Se beskrivelse ovenfor. Dette resultatet vil kun bli rapportert dersom finansiering oppnås.
• Plasma og fullt blod oppbevares for senere analyse. 12 ml blod vil bli samlet inn per pasient: 6 ml vil bli brukt til å lage EDTA-plasmaprøver og buffycoat og 6 ml vil bli lagret som serumprøver. Det skal etableres en forskningsbiobank for de innsamlede prøvene, som skal fryses og lagres ved -80°C i ti år. Deretter blir plasma- og fullblodprøvene ødelagt. Den lokale helseforskningsetiske komité (hovedstadsregionen i Danmark) vil bli kontaktet angående bruken av denne forskningsbiobanken før videre undersøkelser settes i gang. Deltakerne vil bli bedt om samtykke spesifikt angående det biologiske materialet til biobanken for fremtidig forskning.
• De gjenværende fraksjonene av prøver fra de rektale vattpinneprøvene og prøver fra vedleggsprøvene lagres for senere analyse. Det skal etableres en forskningsbiobank for de innsamlede prøvene ved Herlev Hospital, som skal fryses og lagres ved -80°C i ti år. Deretter blir prøvene ødelagt. Den lokale helseforskningsetiske komité (hovedstadsregionen i Danmark) vil bli kontaktet angående bruk av forskningsbiobanken før videre undersøkelser settes i gang. Deltakerne vil bli bedt om samtykke spesifikt angående det biologiske materialet til biobanken for fremtidig forskning.

Statistikk Kontinuerlige numeriske data vil bli rapportert som gjennomsnitt og standardavvik hvis normalfordelt. Hvis det ikke er normalfordelt, vil kontinuerlige numeriske data rapporteres som median og persentiler. Etterforskerne vil analysere data med både parametrisk og ikke-parametrisk statistikk avhengig av fordelingen av dataene. En p-verdi <0,05 anses som signifikant.

Effektberegningen er som følger. Satsen for Yersinia spp. i blindtarmbetennelsesgruppen forventes å være 13 %. Størrelsene på gruppene forventes å være ulik. Omtrent 80 % av de inkluderte pasientene vil være i blindtarmbetennelsesgruppen og 20 % vil være i normal blindtarmsgruppen.

Når alfa er satt til 0,05, beta er satt til 0,80, og den minst interessante forskjellen mellom gruppene er satt til 20 %, kreves det totalt 225 pasienter: 45 pasienter i normal blindtarmsgruppen og 180 pasienter i blindtarmbetennelsesgruppen.