Explicaciones para apendicectomías laparoscópicas negativas y laparoscopias normales

Objetivo El objetivo del estudio es investigar qué enfermedades infecciosas podrían imitar los síntomas de la apendicitis aguda hasta el punto de provocar una laparoscopia diagnóstica o una apendicectomía laparoscópica.

Resultado primario Una comparación de la incidencia de Yersinia spp. (enterocolítica y/o pseudotuberculosis) diagnosticada por PCR en hisopos rectales en los dos grupos: pacientes con inflamación histopatológica confirmada (grupo de apendicitis) y pacientes con uno de los siguientes: un apéndice histopatológico normal sin inflamación, linfadenitis mesentérica o un diagnóstico normal laparoscopia (grupo de apéndice normal).

Resultados secundarios Una comparación de la incidencia de otros microbios: Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp. y Aeromonas spp. encontrado por PCR de hisopos rectales en los dos grupos: apéndice normal versus grupo de apendicitis.

Pacientes positivos para Yersinia spp. serán evaluados individualmente en subgrupos de los dos grupos: grupo de apendicitis y grupo de apéndice normal. Se llevará a cabo una investigación serológica para Yersinia si se logra la financiación.

Una comparación de la incidencia de Enterobius vermicularis encontrada en el examen histopatológico en los dos grupos.

Diseño Un estudio de cohorte observacional prospectivo. Participantes del ensayo Criterios de inclusión

• ≥18 años
• Sospecha de apendicitis aguda y prevista para laparoscopia diagnóstica
• Consentimiento informado por escrito después de información escrita y verbal Criterios de exclusión
• No puede entender, leer o hablar danés
• Conocido con la enfermedad inflamatoria intestinal
• Otra patología intraabdominal distinta de la apendicitis que requiere otra intervención o tratamiento quirúrgico (diagnosticada perioperatoriamente, en una tomografía computarizada preoperatoria o poco después de la cirugía en el examen histopatológico)
• No sometido a laparoscopia diagnóstica, apendicectomía laparoscópica o apendicectomía abierta
• Uso de agentes antimicrobianos dentro de las dos semanas previas a la inclusión hasta el ingreso real por dolor abdominal agudo

Curso de prueba Los pacientes ingresan en el Departamento de Cirugía del Hospital Herlev con sospecha de apendicitis aguda. Un cirujano del departamento planificará una cirugía aguda o mantendrá a los pacientes en observación. Los investigadores del ensayo o asistentes de investigación se acercarán a estos pacientes para darles información sobre el estudio. Por lo tanto, los investigadores se aseguran de que el paciente tenga el mayor tiempo posible para su consideración en este entorno agudo. Los pacientes que cumplen los criterios de inclusión y ninguno de los criterios de exclusión (aparte de aquellos criterios que solo pueden aclararse durante o después de la cirugía), se incluyen en el ensayo después del consentimiento informado. Las características iniciales de los pacientes inscritos, incluidos su historial médico, historial de viajes y síntomas gastrointestinales, se registrarán en los formularios electrónicos de informes de casos (eCRF) en RedCAP. Se recolectan muestras de sangre y un hisopo rectal antes de la cirugía. Se agregará una nota de la inclusión del paciente en el ensayo a la historia clínica del paciente. Los pacientes incluidos se someterán a una laparoscopia diagnóstica realizada de acuerdo con la práctica clínica habitual. Si se extirpa el apéndice durante la cirugía, se recolectará una muestra del apéndice extirpado después de la operación. El hisopo del apéndice solo se recolectará si la apariencia del apéndice extraído no es sospechosa de enfermedad maligna (SOP_Appendixpodning). Esto está de acuerdo con el Departamento de Patología del Hospital Herlev, para no comprometer el examen histopatológico y para prevenir la propagación de células malignas en el raro caso de un tumor de apéndice. Si existe alguna duda sobre el aspecto del apéndice no se recogerá hisopo. Se realizará un seguimiento de la historia clínica del paciente con respecto al informe de patología diez días después de la cirugía. Estos resultados se anotan en el eCRF del paciente.

Criterios de retiro y abandono Los participantes pueden retirar su consentimiento en cualquier momento durante el ensayo. Las muestras de sangre recolectadas, el hisopo rectal y el posible hisopo del apéndice se destruirán si un participante retira el consentimiento. Un participante ha concluido el ensayo diez días después de la cirugía cuando tanto el registro final de la cirugía como el informe patológico están disponibles. Los pacientes que durante o poco después de la cirugía cumplan cualquier criterio de exclusión con respecto a otra patología intraabdominal, condiciones que requieran otro tratamiento, o que no se sometan a la cirugía planificada, abandonarán el estudio y, por lo tanto, serán excluidos del estudio y de la sangre recolectada. Se destruirá la muestra, el hisopo rectal y el posible hisopo del apéndice. Un participante ha concluido el estudio cuando se ha realizado el seguimiento postoperatorio de 10 días.

Resultado primario

El resultado primario se basará en los resultados acumulativos de ambos métodos:

• Detección de infección por Yersinia spp. (enterocolítica y/o pseudotuberculosis) por investigación microbiológica de hisopo rectal: Las muestras (hisopo rectal) recolectadas antes de la cirugía se congelan inmediatamente a -80°C y se almacenan en el Hospital Herlev en un biobanco de investigación. Cuando el último paciente ha concluido el ensayo, una fracción de las muestras recolectadas de cada paciente se envía al Departamento de Microbiología Clínica del Hospital Hvidovre y luego se investiga con una PCR en tiempo real para Yersinia spp. Estos resultados se anotan en el eCRF del paciente, pero no en la historia clínica del paciente. Las muestras con un resultado de PCR positivo se cultivarán para Yersinia spp. y en caso de resultado positivo del cultivo, se realizarán pruebas de susceptibilidad (resultado secundario). A partir de ahora, el material humano recolectado y la Yersinia enterocolitica cultivada se congelarán a -80 °C y se almacenarán durante diez años en el Hospital Hvidovre como biobanco para futuras investigaciones.

Resultados secundarios

• Serología de Yersinia enterocolitica: este resultado se informará en la publicación planificada si se logra la financiación suficiente; de ​​lo contrario, se presentará en una publicación posterior. Seis ml de sangre recolectada antes de la cirugía se congelan inmediatamente a -80°C y se almacenan en el Hospital Herlev en un biobanco de investigación. Cuando el último paciente ha concluido el ensayo, la muestra de sangre para serología de cada paciente se envía a Statens Serum Institut. Aquí, las muestras de sangre se analizan lo antes posible después de su llegada con una prueba ELISA interna para Yersinia enterocolitica IgM, IgA e IgG. Después del análisis, las muestras de suero se congelarán a -80 °C y se almacenarán durante diez años en el Statens Serum Institut como biobanco para futuras investigaciones. Posteriormente, las muestras serán anonimizadas y transferidas al biobanco para futuras investigaciones perteneciente a Statens Serum Institut.

• Detección de otros patógenos bacterianos: Las muestras (hisopo rectal) recolectadas antes de la cirugía se congelan inmediatamente a -80 °C y se almacenan en el Hospital Herlev en un biobanco de investigación. Cuando el último paciente ha concluido el ensayo, una fracción de las muestras recolectadas de cada paciente se envía al Departamento de Microbiología Clínica del Hospital de Hvidovre y luego se investiga con una PCR multiplex en tiempo real para:

  • Campylobacter spp.
  • Salmonella spp.
  • Shigella spp.
  • Aeromonas spp. Las muestras con resultados positivos de PCR para patógenos bacterianos serán cultivadas (incluyendo Yersinia spp.) y en caso de cultivo positivo, se realizarán pruebas de susceptibilidad. De ahora en adelante, el material humano recolectado y las bacterias cultivadas se congelarán a -80°C y se almacenarán durante diez años en ese sitio como un biobanco de investigación, de aquí en adelante las muestras se anonimizarán.
• Resultado combinado de serología y PCR para Yersinia spp.: Ver descripción anterior. Este resultado solo se informará si se logra la financiación.
• El plasma y la sangre completa se conservan para análisis posteriores. Se recogerán 12 ml de sangre por paciente: 6 ml se utilizarán para preparar muestras de plasma con EDTA y capa leucocitaria y 6 ml se almacenarán como muestras de suero. Se establecerá un biobanco de investigación para las muestras recolectadas, que se congelarán y almacenarán a -80°C durante diez años. Posteriormente, se destruyen las muestras de plasma y sangre completa. Se contactará al Comité de Ética de Investigación en Salud local (región de la capital de Dinamarca) con respecto al uso de este biobanco de investigación antes de que se inicien más investigaciones. Se solicitará el consentimiento de los participantes específicamente sobre el material biológico del biobanco para futuras investigaciones.
• Las fracciones restantes de las muestras de los hisopos rectales y las muestras de los hisopos del apéndice se almacenan para su posterior análisis. Se establecerá un biobanco de investigación para las muestras recolectadas en el Hospital Herlev, que se congelarán y almacenarán a -80°C durante diez años. Posteriormente, los especímenes son destruidos. Se contactará al Comité de Ética de Investigación en Salud local (región de la capital de Dinamarca) con respecto al uso del biobanco de investigación antes de que se inicien más investigaciones. Se solicitará el consentimiento de los participantes específicamente sobre el material biológico del biobanco para futuras investigaciones.

Estadísticas Los datos numéricos continuos se reportarán como media y desviación estándar si se distribuyen normalmente. Si no se distribuyen normalmente, los datos numéricos continuos se reportarán como mediana y percentiles. Los investigadores analizarán los datos con estadísticas paramétricas y no paramétricas según la distribución de los datos. Un valor de p <0,05 se considera significativo.

El cálculo de potencia es el siguiente. La tasa de Yersinia spp. en el grupo de apendicitis se espera que sea del 13%. Se espera que los tamaños de los grupos sean desiguales. Aproximadamente el 80% de los pacientes incluidos estarán en el grupo de apendicitis y el 20% estarán en el grupo de apéndice normal.

Cuando alfa se establece en 0.05, beta se establece en 0.80 y la diferencia menos interesante entre los grupos se establece en 20%, se requieren un total de 225 pacientes: 45 pacientes en el grupo de apéndice normal y 180 pacientes en el grupo de apendicitis.